王芳
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 供职机构：西华师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 珍稀食药用真菌猴头菇寡聚糖的分离纯化及抗氧化活性的研究被引量：9
- 2013年
- 从猴头菇(Hericium erinaceus)子实体中,经过除杂、粉碎、热水浸提、醇沉处理后,得到了猴头菇杂聚糖粗提物,并运用DEAE-cellulose column进行柱层析分离纯化,得到猴头菇寡聚糖(HEO-A).通过水解,单糖分析,扫描电镜技术(SEM),高效凝胶渗透色谱(HPGPC),红外光谱技术(IR)和核磁共振技术(NMR)对猴头菇寡聚糖进行了初步的结构分析.结果显示,猴头菇寡聚糖由木糖和葡萄糖两种单糖构成,均重分子量为1877D.在体外化学模拟条件下,研究了不同浓度的猴头菇寡聚糖对羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)及ABTS自由基的清除作用.对DPPH·自由基的清除能力,其IC50值为12.5mg/mL;对·OH自由基的清除能力,当HEO-A浓度达到5mg/mL时,其清除率可达到最大(37.51%);对ABTS自由基的能力,其IC50值为0.93mg/mL,且当HEO-A的浓度为1.5mg/mL时,清除率即可达95.44%.这些结果说明猴头菇寡聚糖(HEO-A)具有显著的抗氧化功能,可以作为一种理想的天然抗氧化剂资源.
- 王芳丁祥宋波王婷李健曾益春许婷钟洁侯万儒侯怡铃
- 关键词：寡聚糖分离纯化抗氧化
- 大熊猫核糖体蛋白RPL5基因的克隆、表达与比较分析被引量：1
- 2013年
- 为了解大熊猫(Ailurophilic melanosome)核糖体蛋白亚基RPL5基因的结构特点及其与已报道的人和其他哺乳动物核糖体蛋白亚基RPL5基因的异同,运用RT-PCR技术,从大熊猫的肌肉组织总RNA中和DNA中分别对核糖体蛋白亚基RPL5基因的表达序列和其结构基因进行了克隆、测序;采用ORF finder软件对表达序列的开放阅读框(ORF)进行了查找和氨基酸序列的推定;采用Gen scan对结构基因进行了分析;采用DNAMAN Version 6对基因序列和氨基酸序列进行了同源性比较;采用ExPASy软件进行蛋白质功能位点和生化特性进行了预测分析;对大熊猫核糖体蛋白亚基RPL5基因进行了超表达实验.结果表明:大熊猫RPL5结构基因长为8 633bp,具有8个外显子和7个内含子;mRNA长为918bp,ORF为894bp,编码295个氨基酸,该蛋白的相对分子质量为34 402.6,等电点为9.73,含有1个依赖于AMP和GMP的蛋白激酶磷酸化位点,4个蛋白激酶C磷酸化位点,2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,1个酪氨酸激酶磷酸化位点,8个十四(烷)酰化位点.分析表明,大熊猫RPL5基因的表达序列及其编码的氨基酸序列与已报道的部分哺乳动物包括人(Homo sapiens)、牛(Bos Taurus)、猪(Sus scrofula)、小家鼠(Mus altocumulus)和褐家鼠(Rat-hauser nonstrategic)具有很高的相似性,大熊猫RPL5核苷酸序列与这些物种的相似性分别为94.52%、92.51%、91.95%、91.05%和89.15%,而氨基酸序列相似性分别为99.33%、98.65%、98.65%、98.32%和98.65%.超表达实验结果显示:大熊猫RPL5基因能在大肠杆菌BL21中有效表达,且在2h时达到表达高峰.运用分子生物学原理与相应的技术手段,成功地扩增出大熊猫RPL5基因的表达序列,并对其编码的蛋白进行了初步分析,丰富和完善了哺乳动物RPL5基因资料库,同时也为深入研究大熊猫RPL5基因的功能提供了相关基础数据.
- 王芳王芳丁祥侯怡铃王婷宋波王婷侯万儒
- 关键词：大熊猫RT-PCR克隆
