李琳
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：第四军医大学口腔医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 复合PCR扩增人mtDNA HVR方法的初探被引量：1
- 2013年
- 目的:建立一种高效的扩增线粒体DNA高可变区(mtDNA HVR)的方法。方法:本研究选取5例健康成人静脉血,用人血全基因组DNA试剂盒,提取全基因组DNA,设计引物,用复合PCR方式,对线粒体DNA中的高可变区进行扩增。复合扩增的方式为:用6对套叠引物分开进行两次独立的PCR,扩增mtDNA HVR。第一次扩增用3对引物,目标DNA片段基本涵盖整个线粒体DNA的高可变区,扩增后得到互不重叠的3个短片段,分别为113 bp,126 bp和131 bp。第二次复合扩增用其余的3对引物,目标片段基本重叠在第一次扩增所得的目标片段的区域内,扩增得到3个互不重叠的片段为124 bp,133 bp和93 bp。所有扩增产物经过纯化后测序。结果:复合PCR方式获得的mtDNA HVR基因序列完整,5个样本均出现特异性条带,电泳结果条带单一、清晰。结论:复合扩增PCR方法对mtDNA HVR区的扩增效率高,测序结果稳定,结合6对套叠引物,不但保证了序列的完整性,另外,两次独立的PCR也减少了PCR反应过程中错配的发生,此法也适用于保存时间较久的古代线粒体DNA短片段的研究。复合扩增PCR还展示出了潜在的高产量的特点,相对传统PCR显示了其更多的优势。
- 李琳邵金陵段小红李雪娟刘振霞
- 关键词：MTDNAMULTIPLEX-PCR
- 细胞外基质囊泡模拟物制备及其生物学性能的初步研究
- 2024年
- 目的探讨运用机械挤压法制备细胞外基质囊泡模拟物的生物学性能及其对人牙周膜干细胞(PDLSC)细胞活性和成骨分化潜能的影响。方法胶原酶消化法制备PDLSC来源细胞外基质囊泡,机械挤压法制备亲本细胞来源囊泡模拟物;将获取的天然细胞外基质囊泡和亲本细胞来源囊泡模拟物分为4组:基础培养基培养7 d的PDLSC来源基质囊泡(PDLSC matrix vesicles,MVs)和基础培养基培养7 d的PDLSC来源囊泡模拟物(PDLSC vesicle mimetics,CVMs),成骨诱导培养基培养7 d的PDLSC来源基质囊泡(osteogenic-induced PDLSC matrix vesicles,O-MVs)和成骨诱导培养基培养7 d的PDLSC来源囊泡模拟物(osteogenic-induced PDLSC vesicle mimetics,O-CVMs);透射电镜和纳米颗粒示踪分析观察囊泡形态和大小,免疫荧光检测细胞摄取囊泡情况;以PDLSC作为对照组,细胞活性实验检测囊泡对PDLSC细胞活性的影响,茜素红染色和蛋白质印迹法检测囊泡对PDLSC成骨分化潜能的影响。结果MVs、O-MVs、CVMs和O-CVMs均表现为圆形囊泡结构(直径50~250 nm),均能被PDLSC摄取,且不影响PDLSC的细胞活性;成骨诱导条件下,O-MVs和O-CVMs孵育的PDLSC相比于对照组细胞形成更多的矿化结节;MVs、O-MVs、CVMs和O-CVMs均能促进PDLSC表达成骨相关蛋白,O-CVMs孵育的PDLSC表达的碱性磷酸酶(1.571±0.348)、骨桥蛋白(1.827±0.627)和骨钙蛋白(1.798±0.537)表达水平均显著高于MVs孵育的细胞(分别为1.156±0.170、1.260±0.293和1.286±0.302)(均P<0.05),Runt相关转录因子2(1.632±0.455)和骨桥蛋白(1.827±0.627)表达水平均显著高于CMVs孵育的细胞(分别为1.176±0.128和1.428±0.427)(均P<0.05),MVs、O-MVs和CVMs孵育的PDLSC成骨相关蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论机械挤压法制备的囊泡模拟物与天然细胞外基质囊泡的形态、大小类似,不影响PDLSC的细胞活性,并可在一定程度上促进PDLSC的成骨分化潜能。
- 张忻妤李琳李思瑶梁嘉鑫陈发明殷园
- 关键词：牙周膜干细胞
- 不同类型错畸形的Bolton指数分析
- 目的:通过对不同类型错患者上下颌Bolton指数的测量分析,了解三种安氏错类型患者的上下颌Bolton比不调的发生率及是否存在性别差异。材料和方法:选取360例安氏错患者的初始模型并分组,第1组安氏Ⅰ类错100例,第2组...
- 李琳邵金陵
- 文献传递
- 不同正畸拔牙方式对下颌第三磨牙的影响
- 李琳邵金陵
