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麻花艽6个成分对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞的影响及机制: 2024年; 目的:探讨麻花艽6个成分对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞(RA-FLS)的影响及机制。方法:采用CCK-8法筛选麻花艽6个成分的最佳给药浓度;流式细胞术测定最佳给药浓度干预下的细胞凋亡水平,ELISA检测细胞凋亡诱导因子(AIF)及基质金属蛋白酶(MMPs)表达水平;Western Blot法检测沉默信息调节因子1(SIRT1)、核因子-κB p65(NF-κB p65)、Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果:麻花艽6个成分最佳给药浓度:龙胆苦苷为150μmol/L、马钱苷酸为150μmol/L、獐牙菜苦苷为30μmol/L、獐牙菜苷为150μmol/L、异荭草素为200μmol/L、异牡荆素为200μmol/L。与空白对照组比较,龙胆苦苷的促细胞凋亡作用最强(P<0.01),马钱苷酸、獐牙菜苦苷、异荭草素次之(P<0.01),獐牙菜苷、异牡荆素组最次(P<0.05);各给药组能显著增加RA-FLS中AIF表达(P<0.01,P<0.05),显著降低RA-FLS中MMPs表达(P<0.01,P<0.05);各给药组能显著降低RA-FLS中NF-κB p65、Bcl-2蛋白表达(P<0.05),显著增加SIRT1、Bax蛋白表达(P<0.05)。结论:麻花艽6个成分具有一定的抑制RA-FLS增殖活性和促凋亡作用,并能调控AIF和MMPs的表达,其潜在机制可能是通过抑制NF-κB信号通路炎症因子的释放和促进线粒体凋亡通路中诱导凋亡因子、促凋亡蛋白水平来促进RA-FLS凋亡。; 白永峰曹乌吉斯古楞; 关键词：类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞麻花艽化学成分核因子-ΚB信号通路

miR-let-7d-HMGA2通路调控缺氧诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞增殖被引量：1: 2024年; 目的研究缺氧在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜成纤维样细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)增殖中的作用及机制。方法采用HE染色法检测RA和对照骨关节炎(osteoarthritis,OA)滑膜组织FLS增生情况。分离原代RA-FLS并采用流式细胞术鉴定;将RA-FLS置于常氧(21%O_(2))或缺氧环境(3%O_(2))中培养,CCK-8法检测细胞增殖水平的变化,RT-PCR检测miR-let-7d表达的变化。通过类似物或抑制物改变miR-let-7d的表达,观察其对RA-FLS增殖、凋亡的影响;探究miR-let-7d靶基因在缺氧诱导的RA-FLS增殖中的作用。结果 FLS在RA滑膜中增生明显,在缺氧环境下RA-FLS增殖加快,miR-let-7d表达水平降低;过表达miR-let-7d抑制RA-FLS增殖,但对细胞凋亡水平无明显影响;进一步的研究证实miR-let-7d靶基因HMGA2参与缺氧诱导的RA-FLS增殖。结论 miR-let-7d-HMGA2通路调控缺氧诱导的RA-FLS增殖。; 虞珊珊李静谭琪丁梦蕾宗明范列英; 关键词：类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞缺氧 HMGA2

RA滑膜成纤维样细胞外泌体促进巨噬细胞向M1极化被引量：2: 2023年; 目的探讨类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes, RA-FLS)外泌体在调控巨噬细胞(macrophage, M■)极化中的作用。方法收集6例骨关节炎(osteoarthritis, OA)患者和6例类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患者关节液和滑膜组织,流式微珠阵列(CBA)法检测关节液中M1和M2型细胞因子的表达;免疫组织化学法检测滑膜中外泌体标志物CD9的表达;分离培养原代RA-FLS和OA-FLS并提取上清液外泌体,使用Western印迹法和粒径分析(nanoparticle tracking analysis, NTA)鉴定;实时荧光定量PCR(RT-PCR)和CBA法分别检测OA-FLS和RA-FLS外泌体对M1和M2型极化分子mRNA水平及细胞因子分泌的影响。结果 RA关节液中M1型细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8及M2型细胞因子IL-10水平均显著高于OA组;RA滑膜中CD9高表达;RA-FLS分泌的外泌体较OA-FLS明显增多;RA-FLS外泌体刺激M■后,细胞M1型极化分子mRNA表达和细胞因子分泌均增加。结论 RA-FLS外泌体促进M■向M1极化。; 虞珊珊李静徐臻成宇宗明范列英; 关键词：滑膜成纤维细胞巨噬细胞外泌体

基于纳米药物调控肿瘤成纤维样细胞用于肿瘤治疗的研究进展被引量：2: 2023年; 肿瘤成纤维样细胞是肿瘤间质内数量最多的细胞组分.不同类型实体肿瘤的成纤维样细胞来源有所不同,但均对肿瘤微环境的塑造起到至关重要的作用.其可以大量分泌细胞外基质,促进肿瘤血管新生,阻碍药物输运,阻止免疫细胞的肿瘤浸润,增强肿瘤的化疗及免疫治疗耐受等.因此,针对肿瘤成纤维样细胞促进肿瘤发展的功能进行调控,可重塑肿瘤微环境,提高肿瘤的治疗效果.本文简要介绍了肿瘤成纤维样细胞在肿瘤微环境中的重要作用,并重点介绍基于纳米药物精准调控肿瘤成纤维样细胞的研究进展,为继续开发基于调控肿瘤成纤维样细胞的肿瘤治疗策略提供思路.; 张淑慧阳卉茹赵颖李一叶赵潇王海季天骄聂广军; 关键词：纳米药物肿瘤微环境肿瘤治疗

miR-181a-5p在皮肤成纤维样细胞衰老中的作用和机制: 2022年; 目的观察miR-181a-5p在H 2 O 2诱导大鼠皮肤成纤维样细胞衰老过程中的表达变化,并探讨其表达水平对细胞自噬和凋亡的影响。方法采用200μmol/L H_(2)O_(2)诱导大鼠皮肤成纤维样RS1细胞6 h,构建细胞衰老模型。将细胞分为5组:H 2 O 2处理组、mimic-NC组、mimic组、inhibitor-NC组和inhibitor组,采用脂质体转染技术将miR-181a-5p mimic、inhibitor等转染入相应的细胞中。MTT法检测细胞增殖活性;qPCR检测细胞miR-181a-5p表达水平。利用流式细胞术检测细胞凋亡;利用吖啶橙染色观察细胞自噬水平;采用Western blot检测细胞LC3B、p62、Beclin-1、自噬相关基因5(autophagy related 5,ATG5)蛋白表达水平。结果与正常RS1细胞比较,H 2 O 2诱导后的RS1细胞增殖活性显著降低(P<0.05),而miR-181a-5p表达水平显著升高(P<0.05)。与H 2 O 2处理组比较,mimic组RS1细胞排列紊乱,细胞轮廓不清晰,碎片较多,凋亡率显著升高(P<0.05),自噬水平降低,Beclin-1和ATG5表达显著降低(均P<0.05);inhibitor组RS1细胞轮廓清晰,过度伸展、空泡化的细胞减少,凋亡率显著降低(P<0.05),自噬水平升高,Beclin-1和ATG5表达显著升高(均P<0.05)。结论H 2 O 2诱导大鼠皮肤成纤维样细胞miR-181a-5p表达增加,且上调miR-181a-5p表达,可抑制细胞自噬、促进细胞凋亡。; 黄燕杨艳清万睿周进飞张层层刘睿许其军张名李慧娟; 关键词：细胞衰老自噬凋亡

杜仲皮水提取物调节circFADS2靶向miR-491-5p干预类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长与凋亡被引量：4: 2021年; 目的:探讨杜仲皮水提取物(water extract of Eucommia cortex,WEEC)对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)生长与凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度WEEC(0.1、0.3、0.9和2.7 g/L)处理RA-FLS,CCK-8法检测细胞活力,选取最适WEEC浓度进行后续实验。细胞分别转染pcDNA-circFADS2和/或anti-miR-491-5p,探讨WEEC对RA-FLS生长与凋亡的影响及分子机制:用CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测cleaved caspase-3的蛋白水平;RT-qPCR检测环状RNA-FADS2(circular RNA-FADS2,circFADS2)和miR-491-5p的表达水平;双萤光素酶基因报告实验检测circ-FADS2和miR-491-5p的靶向关系。结果:不同浓度WEEC处理后,RA-FLS的活力降低,凋亡率升高,cleaved cas-pase-3蛋白水平升高,circFADS2表达水平降低,miR-491-5p表达水平升高(P<0.05)。过表达circFADS2或抑制miR-491-5p表达后,WEEC处理的细胞活力升高,凋亡率及cleaved caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。circFADS2靶向调控miR-491-5p,过表达miR-491-5p逆转了circFADS2质粒对WEEC处理的RA-FLS活力与凋亡的影响。结论:杜仲皮水提取物通过调节circFADS2/miR-491-5p抑制类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长并促进其凋亡。; 郑国洪孙斌王晶晶杨正明; 关键词：细胞活力

类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞自噬相关长链非编码RNA筛选和分析被引量：4: 2021年; 目的:长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)已成为调控基因表达和影响多种生物学过程的关键表观遗传调控因子。在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的发生发展中,lncRNA发挥着重要作用,有关lncRNA在RA患者外周血细胞中的研究已有报道。然而,目前尚无lncRNA在RA患者中对于自噬调控的研究。本研究通过筛选RA滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLSs)自噬前后差异表达的lncRNAs,寻找调节RA-FLSs自噬的关键lncRNAs,旨在为RA的诊断和治疗提供新方向。方法:获取6例RA患者膝关节或髋关节术后的滑膜组织,原代培养(组织块法)RA-FLSs至第5代,用mTOR抑制剂PP242处理后,通过蛋白质印迹法检测细胞自噬水平标记蛋白LC3-II表达水平的变化。其中3例采用TRIzol提取PP242处理前后RA-FLSs总RNA,应用Agilent Human ceRNA Microarray 2019(4×180 K,Design ID:086188)芯片检测,发现表达量显著改变的lncRNAs(差异倍数≥2.0,P<0.05)。利用生物信息学技术,对获得的差异表达的lncRNAs进行基因本体(gene ontology,GO)分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析,以发现差异表达的lncRNAs可能参与的生物学通路,探索差异表达的lncRNAs在RA发病机制中的作用。在前期芯片筛选出的lncRNAs差异表达的基础上,结合GO富集分析和KEGG分析,筛选出ENST00000584721.1、ENST00000615939.1,对全部6例RA-FLSs进行real-time RT-PCR验证。结果:从患者膝关节或髋关节滑膜组织中成功分离、培养出RAFLSs。6例RA-FLSs经过PP242处理后,自噬水平标记蛋白LC3-II表达水平升高(P<0.05),PP242诱导RA-FLSs发生自噬。芯片筛选共有591个差异表达的lncRNAs,其中表达上调的有428个,表达下调的有163个。GO分析显示这些差异表达的lncRNAs与Th17功能、T细胞相关细胞因子生成及TGF-β受体信号通路的负性调节,以及I型TGF-β受体结合和IL-6受体复�; 尚华尚华刘佳君刘焱龙丽; 关键词：类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞长链非编码RNA 自噬芯片

低氧条件下成年牦牛肾间质成纤维样细胞中EPO的适应性调控研究: 哺乳动物长期暴露于高原环境中,习服不良,易在低氧刺激下产生以红细胞增多症为代表的高原病,这也是常驻高原人群中最为常见的慢性疾病。世居高原的牦牛(Bos grunniens)是高海拔低氧环境中的特有牛种,主要生活于海拔30...; 李慧; 关键词：低氧诱导因子热休克蛋白90; 文献传递

根尖周囊肿囊壁成纤维样细胞异质性与破骨细胞诱导功能的关系: 目的:分析在根尖周囊肿囊壁内,成纤维样细胞的异质性分化,分析与破骨细胞诱导功能相关的目标分子。材料和方法:从20例根尖周囊肿患者的病变中,分离培养囊壁成纤维样细胞的单个集落形成单位。取各集落细胞培养上清制备条件培养基,诱...; 王海丞章燕; 关键词：根尖周囊肿成纤维样细胞纤维粘连蛋白; 文献传递

甘草附子汤对佐剂性关节炎小鼠滑膜成纤维样细胞增殖的影响被引量：11: 2019年; 目的:观察佐剂性关节炎(AA)小鼠滑膜组织成纤维样细胞(FLS)增殖的变化及甘草附子汤对其的影响。方法:将48只雄性Balb/c小鼠随机分为正常组,模型组,甘草附子汤组(7.8 g·kg^(-1)),雷公藤多苷组(10 mg·kg^(-1))。采用AA小鼠模型,模型成功后,治疗组小鼠给予相应给药灌胃18 d,1次/d,正常组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水。采用足肿胀法评价药物治疗作用;苏木素-伊红(HE)染色观察各组踝关节组织病理变化;Vimentin免疫组化法检测滑膜组织成纤维样增殖;免疫荧光法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平以及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜组织中细胞周期蛋白D_1(Cyclin D_1),增殖细胞核抗原(PCNA),p53和p21蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组足肿胀度增加,滑膜增生和骨侵蚀明显,滑膜组织成纤维样细胞增殖率升高(P<0.05),滑膜组织中TNF-α,Cyclin D_1,PCNA蛋白表达明显升高(P<0.05),p53和p21蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,甘草附子汤组小鼠足肿胀,滑膜增生和骨侵蚀有所改善,滑膜组织成纤维样细胞增殖率降低(P<0.05),滑膜组织中TNF-α水平,Cyclin D_1,PCNA蛋白表达显著降低,而p53和p21蛋白表达升高(P<0.05)。结论:甘草附子汤对AA小鼠关节和滑膜损伤具有明显改善作用,可能与降低局部慢性炎症,调节AA小鼠滑膜Cyclin D_1,PCNA,p53和p21的蛋白异常表达,抑制FLS增殖有关。; 蔡悦张博郭静; 关键词：甘草附子汤佐剂性关节炎类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞增殖

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