公共文化服务平台

搜索到240篇“ 热休克蛋白A亚单位“的相关文章

幽门螺杆菌热休克蛋白B亚单位基因HspB转化烟草的研究: 2011年; 幽门螺杆菌被世界卫生组织认定为一类致癌因子,其热休克蛋白(HSP)具有较强的免疫原性,存在着发展为疫苗成分的可能性。四川省农科院生物技术核技术研究所构建了幽门螺杆菌热休克蛋白B亚单位基因HspB植物表达载体pYHWHRI并转化进入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,EHA105)。本文采用农杆菌介导的叶盘法对烟草(Nicotiana tabacum L.)叶片进行遗传转化。在含有卡那霉素(Kan)的MS筛选分化培养基上筛选,获抗性烟草植株。经PCR分子检测,其中6株已成功导入HspB基因。; 吴洁郑雪莲周晓洁张聪阎文昭; 关键词：根癌农杆菌烟草

人临床株幽门螺旋杆菌热休克蛋白A亚单位基因克隆及序列分析被引量：2: 2009年; 目的获取人临床株幽门螺旋杆菌（Hp）热休克蛋白A（HspA）亚单位基因。方法用聚合酶链反应（PCR）技术从Hp的染色体DNA扩增HspA基因，将其定向插入paMD18-T范隆载体中进行核苷酸序列分析。结果经酶切鉴定及基因序列证实HpHspA基因克隆成功。克隆载体pMD—HspA洲序结果显示HspADNA片段长度为357bp。利用生物软件Omiga2．0对临床分离的Hp和NCTC11637HspA基因序列进行同源性比较，发现有14个核苷酸差异，基因序列同源性96．08％；对编码氨基酸进行比较，发现有1个氨基酸差异，氨基酸同源性99．15％。同时将HpHspA序列与GenBank中公布的多株国外HpHspA序列进行比较，结果显示基因序列同源性在95．20％-96．36％之间，氨基酸序列同源性在98．31％一100％之间。结论成功地获得人临床株Hp保守的HspA基因，为HpHspA相关疫苗的研究奠定了实验基础。; 王明永王凡平郭庆合邢志广吴升伟吴承龙; 关键词：幽门螺杆菌克隆基因序列

幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位编码基因的克隆与序列分析被引量：2: 2004年; 目的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)热休克蛋白A亚单位的编码基因(hspA)克隆和序列分析,为H.pylori基因工程疫苗的研究奠定基础。方法应用PCR方法获得国内分离H.pylori菌株MEL-HP27和国际标准参考株H.pylori的hspA基因,通过定向克隆的方法分别插入克隆载体pNEB193中,用质粒酶切电泳和特异PCR方法鉴定重组质粒。克隆基因经测序后进行核苷酸和氨基酸的同源性比较。结果重组质粒经双酶切后得到0.35kb的hspA基因片段,特异PCR可扩增出hspA基因片段,证实H.pylorihspA基因的重组克隆质粒构建成功。经测序,国内分离HpMEL-HP27的hspA基因全长357bp(Genbank收录号:AY295084),编码由118个氨基酸残基组成的肽链,hspA基因序列与GenBank公布的H.pylori相应基因同源性高达95.20％-97.48％,氨基酸序列同源性在95.76％-97.46％之间。结论克隆了H.pylori菌株MEL-HP27的hspA基因,其核酸序列与国际参考株NCTC11637同源性为97.48％。; 代丽萍段广才郗园林范清堂; 关键词：热休克蛋白A亚单位克隆基因基因片段酶切核酸序列

幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位融合蛋白表达的研究被引量：2: 2003年; 目的　获得大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位 (LTB)与幽门螺杆菌保护性抗原热休克蛋白A亚单位 (HspA)的融合蛋白。方法　PCR扩增ltB和hspA基因 ,依次构建至表达载体pIM 1,转化大肠杆菌 ,SDS PAGE、免疫印迹分析目的蛋白表达情况。采用GM1 ELISA和D(+) 半乳糖亲和层析方法检测重组LTB HspA融合蛋白LTB组分与GM1 神经节苷脂结合活性。结果　重组LTB HspA融合蛋白表达量最高可达细菌总蛋白的 2 5 %。免疫印迹检测结果证实为重组LTB HspA融合蛋白。GM1ELISA和D(+) 半乳糖亲和层析方法检测结果证实重组LTB HspA融合蛋白具有与GM1 神经节苷脂结合的活性。结论　LTB HspA融合蛋白的表达研究。; 冉向阳邹全明毛旭虎王缚鲲; 关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位融合蛋白

携带幽门螺杆菌热休克蛋白B亚单位基因重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌的构建和鉴定: 2003年; 背景:幽门螺杆菌(H.pylori)是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的重要致病菌,以减毒鼠伤寒沙门菌为载体构建活疫苗已成为探索新型H.pylori疫苗的重要途径。目的:构建携带H.pylori热休克蛋白B亚单位(hspB)基因的重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌。方法:应用基因工程技术将1640 bp的hspB基因克隆入原核表达质粒pTrc99A。对重组质粒进行序列测定,并将测序结果与基因文库中H.pylori-hspB的基因和蛋白序列进行BLAST分析,再将重组质粒导入活减毒鼠伤寒沙门菌SL3261。结果:重组质粒经聚合酶链反应(PCR)和双酶切,证实构建了携带hspB基因的重组原核表达质粒pTrc99A.hspB,后者成功转化活减毒鼠伤寒沙门菌SL3261。所构建的重组质粒pTrc99A-hspB中所含的H.pylori-spB与基因文库中H.pylori-hspB基因和蛋白的同源性均为97％。结论:成功构建并鉴定了携带H.pylori-hspB基因的重组活减毒鼠伤寒沙门疫苗菌,为研制H.pylori口服疫苗奠定了基础。; 李国庆焦志勇陈旻湖朱森林陈洁胡品津; 关键词：幽门螺杆菌基因重组慢性活动性胃炎鼠伤寒沙门菌

重组幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位的高效表达及其初步纯化被引量：1: 2002年; 目的　在大肠杆菌中高效表达幽门螺杆菌的热休克蛋白A基因 (hspA) ,并对其初步纯化。方法　用巢式PCR扩增hspA基因。经测序证实后 ,克隆于表达载体 pIM 1中 ,转化大肠杆菌。以SDS PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达 ,并测定N 端氨基酸的序列。采用固相镍离子亲和层析 ,对重组hspA进行初步纯化。结果　扩增的hspA基因为 35 7bp ,并在大肠杆菌中得到高效可溶性表达。重组蛋白的表达量最高可达细菌总蛋白的 6 0 .5 %。免疫印迹及氨基酸测序结果证实 ,表达产物为幽门螺杆菌hspA亚单位。固相镍离子亲和层析初步纯化的重组HspA的纯度为 87.8%。结论　hspA亚单位的高效表达与初步纯化。; 冉向阳邹全明毛旭虎田文标王缚鲲; 关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位纯化 SDS-PAGE 免疫印迹

从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位被引量：4: 2002年; 目的　建立一种有效的从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位HspA的方法。方法　重组基因工程大肠杆菌发酵后 ,表达的Hp的HspA包涵体经洗涤、变性、复性 ,采用QSepharoseHighPerformance阴离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析分离纯化。使用SDS PAGE和HPLC检测纯度 ,选用ELISA和动物实验对纯化蛋白的免疫学活性和生物学活性进行鉴定。结果　Hp的HspA包涵体经洗涤和溶解后 ,Hp的HspA的纯度 >60 %。包涵体溶解液经阴离子交换层析和凝胶过滤层析后纯度超过 95 %。Hp的HspA纯品经检测具有良好的免疫学活性和生物学活性。结论　本研究建立的分离纯化方法可从包涵体中获得高纯度的重组HspA蛋白。; 王缚鲲邹全明张卫军田文标杨王君郭学青郭红; 关键词：包涵体蛋白纯化热休克蛋白

幽门螺杆菌热休克蛋白B亚单位的克隆和序列分析被引量：2: 2002年; 幽门螺杆菌是消化道疾病的主要致病菌。其有效抗原成份热休克蛋白B亚单位 (HspB)可刺激机体产生保护性的免疫反应。用高保真PCR扩增系统扩增出HspB基因片段 ,将其克隆至质粒PUC19中 ,对其全序列进行了测定。克隆的HSpB基因序列与报道的序列完全一致。这一研究获得了序列正确的HspB基因。; 董勇前陈翠萍谢贵林王秉瑞马清钧; 关键词：幽门螺杆菌克隆

人幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位的基因克隆及序列分析被引量：2: 2001年; 目的获取人幽门螺杆菌 (helicobacter pylori,Hp)热休克蛋白 A基因 (hsp A )进行核苷酸序列分析。方法利用 PCR技术扩增 Hsp A的 DNA,并将其定向插入 Pin Point TMXa- 3载体中进行核苷酸序列分析。结果所克隆的 Hsp A DNA序列与 Gene Bank公布的序列有 15个碱基存在差异 ,同源 95 .8%。结论所克隆的 Hsp A基因可用于重组表达及相关研究。; 郭红邹全明赵晓晏毛旭虎吴超; 关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白A 亚单位基因克隆

幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位基因工程菌的发酵被引量：5: 2001年; 目的研究幽门螺杆菌热休克蛋白Ａ亚单位（ＨｓｐＡ）基因工程菌的发酵工艺。方法通过不同培养基、不同葡萄糖浓度、不同溶氧条件、补料与非补料对幽门螺杆菌热休克蛋白Ａ亚单位基因工程菌的菌体生长与外源蛋白表达量的影响的比较，确定其较为合适的培养条件。结果多批实验证明，菌体单产可达４２ｇ／Ｌ，目的蛋白的表达率为３８．５％。结论此发酵工艺可以提高ＨｓｐＡ基因工程菌菌体的得率和目的蛋白的表达。; 王缚鲲张卫军邹全明郭学青于长青曾浩; 关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位大肠杆菌发酵工艺

加载更多 ∨

相关作者

用户反馈

相关作者

用户登录

用户反馈