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基于IRE1/GPR78信号通路研究三黄益胶囊抑制DKD大鼠组织细胞凋亡的作用机制
2024年
[目的]探讨三黄益胶囊对糖尿病病(DKD)模型大鼠的治疗作用,同时研究三黄益胶囊对DKD模型大鼠肌醇酶1(IRE1)/G蛋白偶联受体78(GPR78)信号通路的影响。[方法]将30只大鼠平均分为正常组、模型组、阳性药组、三黄益低剂量及三黄益高剂量组,每组6只。除正常组外,其余各组运用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)注射建立DKD模型,造模后正常组与模型组每天灌胃生理盐水,阳性药组每天灌胃厄贝沙坦11.51 mg/kg,三黄益低剂量及三黄益高剂量组每天分别灌胃三黄益胶囊0.81、1.62 g/kg,分别干预8周。通过观察给药期间各组大鼠血糖、体质量水平,检测造模给药后生化指标水平及组织病理学染色评估三黄益胶囊对DKD的治疗作用;其次,运用试剂盒及酶联免疫吸附(ELISA)法研究三黄益胶囊对DKD大鼠组织中氧化应激及炎症因子水平的影响;最后运用免疫荧光、Tunel染色、蛋白免疫印迹(Western blot)等方法研究三黄益胶囊对DKD大鼠组织细胞凋亡以及IRE1/GPR78信号通路的影响。[结果]经三黄益胶囊干预后,DKD大鼠体质量显著增加,血糖水平降低,血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白水平下降,同时也可改善DKD大鼠组织病理学变化,组织细胞浸润及纤维化减轻。此外,三黄益胶囊可显著升高DKD模型大鼠组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性、降低丙二醛(MDA)水平,并降低DKD大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。Western blot结果显示,三黄益胶囊显著降低了DKD模型大鼠组织中内质网应激标志性因子GRP78、IRE1蛋白表达水平,同时有效降低了模型大鼠组织中促凋亡蛋白BcL2关联X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)的表达,提高了抑制凋亡蛋白BcL2的表达。[结�
张辉吕树泉潘保朝
关键词:糖尿病肾病内质网应激细胞凋亡
miR-130a靶向磷酸酶-张力蛋白基因/磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B轴对糖尿病脏疾病大鼠组织细胞凋亡影响的研究
2024年
目的 探讨miR-130a靶向磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)/磷酸酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路对DKD大鼠组织细胞凋亡的影响。方法 通过高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射STZ构建DKD大鼠模型。将72只大鼠分为正常对照(NC)组、模型组(DKD组)、miR-130a激动剂阴性对照组(NC agomir组)、miR-130a激动剂组(miR-130a agomir组)、miR-130a激动剂+PTEN过表达物阴性对照组(miR-130a agomir+pcDNA组)、miR-130a激动剂+PTEN过表达物组(miR-130a agomir+pcDNA-PTEN组),每组各12只。尿微量白蛋白试剂盒检测各组24 h UAlb,全自动生化分析仪检测FPG、血清肌酐(Scr)、BUN,HE染色检测各组组织病理变化,ELISA法检测各组IL-6、TNF-α,TUNEL染色检测各组组织细胞凋亡,qRT-PCR检测各组miR-130a表达,Western blot法检测各组B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)及PTEN/PI3K/AKT通路相关蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-130a与PTEN靶向关系。结果 与DKD、NC agomir组比较,miR-130a agomir组24 h UAlb、FPG、Scr、BUN、IL-6、TNF-α、组织细胞凋亡率、Bax蛋白表达、PTEN蛋白表达降低(P<0.05),miR-130a、Bcl-2、p-AKT/AKT蛋白表达升高(P<0.05)。与miR-130a agomir组比较,miR-130a agomir+pcDNA-PTEN组24 h UAlb、FPG、Scr、BUN、IL-6、TNF-α、组织细胞凋亡率、Bax蛋白表达、PTEN蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2、p-AKT/AKT蛋白表达降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-130a与PTEN有结合位点。结论 过表达miR-130a可能通过下调PTEN激活PI3K/AKT通路抑制DKD大鼠细胞凋亡。
许春梅张秋霞吴勐章宇
关键词:糖尿病肾脏疾病细胞凋亡蛋白激酶B
活血方调控UUO大鼠组织细胞焦亡抗纤维化的作用机制研究
目的:脏纤维化(Renalfibrosis,RF)是几乎所有的慢性脏疾病(Chronickidneydisease,CKD)进展中重要的通路,但关于纤维化的具体作用机制尚未完全阐述明晰。本实验采用HE、Masson...
罗芳
关键词:益肾活血方肾纤维化肾小管上皮细胞
复方蛇龙胶囊抑制Bax/Caspase-3信号通路减轻膜性病大鼠组织细胞凋亡的研究被引量:5
2023年
目的 探讨复方蛇龙胶囊抑制Bax/Caspase-3信号通路减轻膜性病大鼠组织细胞凋亡的影响。方法 抽取10只6周龄SPF级雄性SD大鼠作为正常组,其余40只采用注射阳离子化牛血清白蛋白(Alb)构建膜性病大鼠模型,采用随机数字表法将其分为模型组,雷公藤多苷片组,复方蛇龙胶囊低、高剂量组,每组10只。除正常组和模型组灌服等量生理盐水外,其余各组灌胃给予相应药物,连续4周。HE染色、Masson染色、透射电镜及扫描电镜观察各组组织病理学变化;比较各组大鼠尿微量白蛋白(mAlb)和血肌酐(SCr)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、Alb、总蛋白(TP)含量;比较各组大鼠组织细胞凋亡率;比较各组大鼠组织Nephrin、Podocin、Bcl-2、Bax和Caspase-3 m RNA表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠尿m Alb含量升高(P<0.05);血清Alb、TP含量降低,TC、TG和SCr含量升高(P<0.05)。与模型组比较,复方蛇龙胶囊低、高剂量组大鼠尿m Alb含量降低(P<0.05);血清Alb、TP含量升高,TC、TG和SCr含量降低(P<0.05)。与复方蛇龙胶囊低剂量组比较,复方蛇龙胶囊高剂量组尿m Alb降低(P<0.05);血清Alb、TP含量升高,SCr含量降低(P<0.05)。正常组大鼠HE染色可见小球结构完整;Masson染色未见组织纤维化。模型组大鼠HE染色可见小球体积增大,小管可见空泡变性,并伴有蛋白管型;Masson染色可见组织纤维化,蓝色胶原纤维组织出现。与模型组比较,复方蛇龙胶囊低、高剂量组大鼠小球体积增大、小管空泡变性及组织纤维化有所减轻。正常组基底膜结构完整,足细胞结构正常;模型组小球大面积水肿,基底膜增厚,足突融合变宽,足细胞结构严重损伤,细胞骨架蛋白裸露;与模型组比较,复方蛇龙胶囊低、高剂量组大鼠基底膜增厚程度减轻,足细胞形态结构趋于正常。与正常组比较,模型组大鼠组织细胞凋亡率升高(P<0.05);与模型
贾世艳仲启明司瑞花范晓阳严文允刘光珍
关键词:膜性肾病
利拉鲁肽联合吡格列酮对糖尿病病大鼠组织细胞凋亡的影响及机制被引量:1
2022年
目的探究利拉鲁肽联合吡格列酮对糖尿病病大鼠组织细胞内质网应激及细胞凋亡的作用及机制。方法50只SPF级SD大鼠随机分为对照组(Control组)、糖尿病病组(DN组)、利拉鲁肽组(Liraglutide组)、吡格列酮组(Pioglitazone组)和利拉鲁肽联合吡格列酮组(Liraglutide+Pioglitazone组),每组10只;全自动生化分析仪检测大鼠24h尿蛋白及血清BUN和SCr水平;HE染色观察大鼠组织病理学改变;TUNEL检测大鼠组织细胞凋亡水平;Western blot检测大鼠组织细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2、内质网应激相关蛋白GRP78、ATF6、CHOP、p-PERK和p-EIF2α及NRF2/HO-1信号通路相关蛋白NRF2和HO-1表达水平。结果利拉鲁肽联合吡格列酮降低糖尿病病大鼠24h尿蛋白及血清BUN和SCr水平,改善大鼠组织病理学损伤,降低组织细胞凋亡水平,降低组织Bax、GRP78、ATF6和CHOP蛋白表达水平及PERK和EIF2α蛋白磷酸化水平,增加Bcl-2、NRF2和HO-1蛋白表达水平。结论利拉鲁肽联合吡格列酮治疗通过激活NRF2/HO-1信号通路抑制糖尿病病大鼠组织细胞内质网应激及细胞凋亡。
张德鱼刘艾芹于磊
关键词:利拉鲁肽吡格列酮糖尿病肾病
高原低氧对大鼠组织细胞形态、脏尿酸转运蛋白表达的影响被引量:1
2022年
目的:探讨高原低氧对大鼠组织细胞形态、脏尿酸转运蛋白(URAT1)表达的影响。方法:将104只雄性SD大鼠随机分为对照组与低氧组,各52只。低氧组大鼠放置于海拔7 000 m的大型多因素复合高原实验环境中饲养,对照组于常氧常压环境中饲养。根据低氧时间将低氧组分为3 d、1周、2周、4周组及与各低氧组条件相应的对照组,每组13只。检测体质量、活动情况、动脉血氧饱和度变化,生化指标。用Western blot检测小管上皮细胞URAT1蛋白表达及用HE染色观察组织细胞形态。结果:对照组3 d后、1周后、2周后、4周后体质量均高于低氧组(P<0.05);4周后低氧组动脉血氧饱和度低于3 d后、1周后、2周后(P<0.05);低氧组大鼠进仓后活动情况明显少于对照组,近期活动减少。低氧组3 d后、1周后、2周后、4周后SUA、Scr、UUA、Ucr、FEUA水平均高于对照组(P<0.05)。低氧组55只大鼠组织整体结构较完整,但有充血出血表现及不同程度的小球肿胀,球囊狭窄,球囊间隙消失;小管上皮细胞高度肿胀变性,管腔狭窄病变。与对照组比较,低氧组3 d、1周、2周、4周后组织URAT1蛋白表达上调(P<0.05)。结论:高原低氧低压环境下会明显抑制大鼠体质量及功能、减少近期活动及动脉血氧饱和度;损伤组织细胞,出现不同程度的小球肿胀,球囊狭窄,小管上皮细胞高度肿胀变性,管腔狭窄等病理变化;上调组织URAT1蛋白表达。
杜艺杜艺棋梅马文洁
关键词:高原低氧
大蒜素对糖尿病病大鼠组织细胞焦亡的影响被引量:12
2022年
【目的】探讨大蒜素对糖尿病病大鼠的干预机制。【方法】将50只大鼠随机分为假手术组,模型组,大蒜素低、中、高剂量组,每组10只。除假手术组外,其余各组大鼠采用高脂饲料喂养结合一次性腹腔注射链脲佐菌素法制备糖尿病病模型,假手术组给予普通饲料喂养结合一次性腹腔注射等体积枸橼酸缓冲液。造模成功后,大蒜素高、中、低剂量组分别给予10、20、40 mg·kg^(-1)·d^(-1)大蒜素灌胃,假手术组与模型组给予等体积生理盐水灌胃,每日1次,连续8周。采用苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)染色法观察大鼠组织病理变化;二氢乙啶(DHE)荧光探针检测组织活性氧簇(ROS)水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测组织含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达;免疫组织化学法检测组织细胞介素(IL)-1β、IL-18阳性表达。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白定量水平升高,组织ROS水平及NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达水平升高(均P<0.05),可见组织病理损伤。与模型组比较,大蒜素高、中、低剂量组大鼠24 h尿蛋白定量水平下降,组织ROS水平及NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18蛋白表达水平下降,且呈剂量依赖性(均P<0.05),可见组织病理损伤减轻。【结论】大蒜素可能通过抑制ROS/NLRP3/Caspase-1通路活化减轻糖尿病病大鼠组织细胞焦亡,从而有效改善糖尿病病。
沈金峰朱慧萍胡芳晏子友李云生钟森
关键词:大蒜素糖尿病肾病CASPASE-1
益气养阴活血通络方抑制JAK2/STAT3信号通路减轻糖尿病病大鼠组织细胞凋亡被引量:18
2021年
目的:观察益气养阴活血通络方对糖尿病病(DN)大鼠Janus酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)信号通路及细胞凋亡的影响,探讨其干预DN的作用机制。方法:SD大鼠100只随机分为造模组80只,正常组20只,高糖高脂饮食联合一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病病大鼠模型。造模结束后每组随机处死3只大鼠,光镜和电镜下观察组织病理学变化确认造模成功。将造模成功的大鼠随机分为模型组(生理盐水,等体积)、益气养阴活血通络方低中高剂量组(益气养阴活血通络方,5.775,11.550,23.100 g·kg^(-1))和厄贝沙坦组(厄贝沙坦片,0.016 g·kg^(-1)),各组分别给予相应剂量药物灌胃,每日1次,连续干预16周。给药结束后检测大鼠24 h尿蛋白(UTP)水平,血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),肌酐(SCr),尿素氮(BUN)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2/STAT3信号通路关键蛋白的表达水平;免疫组化法(IHC)检测大鼠组织中B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),紧密连接相关蛋白-1(ZO-1),肌动蛋白4(actinin-4)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠UTP,血清中TC,TG,BUN,SCr水平均有明显升高(P<0.05);大鼠组织病理损伤严重;磷酸化JAK2(p-JAK2),磷酸化STAT3(p-STAT3),Bax蛋白表达水平明显上调;组织细胞凋亡明显增多;Bcl-2,ZO-1,actinin-4蛋白表达水平下调(P<0.05)。与模型组比较,益气养阴活血通络方和厄贝沙坦组大鼠UTP,血清中TC,TG,BUN,SCr水平均有不同程度的下降(P<0.05);大鼠组织病理损伤有所减轻;p-JAK2,p-STAT3,Bax蛋白表达水平不同程度的下降;组织细胞凋亡减轻;Bcl-2,ZO-1,actinin-4蛋白表达水平不同程度的升高(P<0.05)。结论:益气养阴活血通络方药可通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活,减轻细胞凋亡,改善DN的预后。
杨凤文高飞高飞陈素枝袁国栋檀金川
关键词:细胞凋亡
黄芪汤对延缓^(12)C^(6+)离子辐射致大鼠组织细胞凋亡的影响及相关机制
2021年
目的:探讨黄芪汤抑制^(12)C^(6+)离子辐射脑模型鼠组织细胞凋亡的分子保护机制。方法:50只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组,单纯辐射模型组,黄芪汤(高、中、低剂量)组。正常对照组和单纯辐射模型组给予等体积生理盐水灌胃10 ml/(kg·d),黄芪汤治疗组分别灌胃给予黄芪汤18、9、4.5 g/(kg·d),连续给药2周。7 d后除正常对照组外,其余各组大鼠脑组织给予4Gy ^(12)C^(6+)离子束单次照射,辐射后第7日处死各组大鼠。HE染色法观察大鼠脏的病理形态变化,ELISA法检测大鼠血清IL-6的含量,实时荧光定量PCR法测定大鼠脏Bcl-2、Bax和Caspase-3的基因表达,免疫组化法检测大鼠脏Bcl-2、Bax、Caspase-3和NF-κB的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,单纯辐射模型组体重和脏指数均显著降低,血清IL-6的含量显著升高,脏Bcl-2的基因表达和蛋白表达均显著降低,Bax和Caspase-3的基因表达和蛋白表达均显著升高,NF-κB的蛋白表达也显著升高(P<0.01),单纯辐射组小球系膜细胞明显增生,小管间质血管明显扩张充血,小管管腔狭窄、不规则。与单纯辐射模型组相比,黄芪汤高剂量组体重和脏指数均明显升高,黄芪汤各干预组脏Bcl-2的基因表达和蛋白表达均显著升高(P<0.05或P<0.01);而黄芪汤中、高剂量组Bax和Caspase-3的蛋白表达均显著降低,各干预组血清IL-6的含量显著降低,脏Bax和Caspase-3的基因表达均显著降低,脏NF-κB的蛋白表达显著下降(P<0.05或P<0.01),黄芪汤高剂量组可见小球系膜细胞增生情况明显改善,小管轮廓清晰。结论:黄芪汤对^(12)C^(6+)离子辐射脑模型鼠的损伤具有一定的防护作用,其作用机制可能与调控Bcl-2/NF-κB信号通路有关。
安方玉安方玉刘永琦颜春鲁苏韫刘永琦杨双红郭丹蒋国凤
关键词:黄芪汤重离子辐射肾细胞凋亡
抑制p38MAPK信号通路对尿源性脓毒血症兔组织细胞凋亡的影响及其作用机制被引量:7
2021年
目的探讨抑制p38MAPK信号通路对尿源性脓毒血症兔组织细胞凋亡的影响及其作用机制。方法将60只新西兰兔按随机数字表法分为4组:假手术组(sham)、模型组(Model)、p38MAPK抑制剂SB203580组(SB203580)、SB203580+p53激活剂Nutlin-3组(SB203580+Nutlin-3),每组15只。采用输尿管近端注入大肠埃希菌菌液法制作尿源性脓毒血症模型,术前30 min静脉注射30μg/kg SB203580或腹腔注射128 mg/kg Nutlin-3进行干预,1次/d,共3 d。记录术后24、48、72 h时各组兔肛温、呼吸频率和心率;全自动分析仪检测白细胞计数以及血清肌酐、尿素氮含量;ELISA检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;TUNEL染色观察组织细胞凋亡情况;qRT-PCR法检测组织MDM2和p53 mRNA表达水平;Western blot法检测组织Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p-p38MAPK、MDM2、p53和PUMA等蛋白表达水平。结果与Model组比较,SB203580组兔肛温、呼吸频率、心率、白细胞计数、血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平以及血清肌酐和尿素氮含量降低(P<0.05),同时组织细胞凋亡率、p53 mRNA以及p53、Cleaved caspase-3、Bax、PUMA、p-p38MAPK等蛋白水平降低(P<0.05),而MDM2 mRNA以及MDM2、Bcl-2等蛋白水平增加(P<0.05)。与SB203580组比较,SB203580+Nutlin-3组兔肛温、呼吸频率、心率、白细胞计数、血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平以及血清肌酐和尿素氮含量升高(P<0.05),同时组织细胞凋亡率、p53 mRNA以及p53、Cleaved caspase-3、Bax、PUMA等蛋白水平增加(P<0.05),Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),而MDM2 mRNA以及MDM2、p-p38MAPK等蛋白水平无显著变化(P>0.05)。结论抑制p38 MAPK信号通路通过促进MDM2表达而抑制p53介导的细胞凋亡途径,从而减少尿源性脓毒血症兔组织细胞凋亡。
唐亚纯许武军陈仙吴孝斌符浩
关键词:P38MAPK信号通路P53细胞凋亡

相关作者

李宁
作品数:36被引量:191H指数:9
供职机构:湖北省疾病预防控制中心
研究主题:甲醛 时间序列分析 大气污染 呼吸系统疾病 DNA-蛋白质交联
任文英
作品数:20被引量:133H指数:7
供职机构:福建省人民医院
研究主题:补肾清热毒方 狼疮性肾炎 慢性移植物抗宿主病 肾功能衰竭 中医药疗法
张本延
作品数:55被引量:272H指数:9
供职机构:武汉科技大学医学院公共卫生学院
研究主题:锰 甲醛 仔鼠 DNA-蛋白质交联 新生鼠
陈香美
作品数:1,355被引量:8,333H指数:46
供职机构:中国人民解放军总医院
研究主题:IGA肾病 肾脏 衰老 慢性肾脏病 急性肾损伤
王新高
作品数:59被引量:300H指数:12
供职机构:首都医科大学附属北京天坛医院
研究主题:补阳还五汤 脑缺血 脑缺血再灌注损伤 神经病学 脑静脉窦血栓形成