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大麻二酚对创伤性脑损伤大鼠脑皮质Occludin、ZO-1表达水平及血脑屏障通透性的影响: 2024年; 目的观察创伤性脑损伤(TBI)大鼠血脑屏障(BBB)中紧密连接蛋白闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)的表达及变化趋势,探讨大麻二酚(CBD)对BBB的干预作用。方法采用改良Feeney自由落体法制备大鼠TBI模型,将大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、模型组(TBI+vehicle组)和CBD干预组(TBI+CBD组),每组24只;每个组又分为损伤后8 h、1、2、3、5和7 d共6个时间点,通过免疫组化和免疫荧光染色,Western blot检测与BBB通透性密切相关的Occludin和ZO-1在不同时间点的表达情况;通过荧光素钠实验检测BBB通透性。结果免疫组化实验结果表明,与假手术组相比,TBI后随着时间推移Occludin和ZO-1蛋白阳性表达减少(P<0.05),2 d达到最低;CBD干预1 d后Occludin和ZO-1蛋白表达水平均上调(P<0.05);免疫荧光染色实验与Western blot结果趋势近似,与假手术组相比,TBI后Occludin和ZO-1荧光表达强度及蛋白表达量减少(P<0.05),CBD干预2 d后Occludin和ZO-1表达水平上调(P<0.05);荧光素钠实验结果表明,TBI后脑组织BBB完整性遭到破坏,通透性升高(P<0.01),CBD干预后BBB通透性下降(P<0.05)。结论TBI后紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达下降,BBB通透性升高,CBD干预可逆转TBI对BBB的破坏。; 李佳丽曹艳凌腾晗尹爱平李恒希李经辉张瑞林吴海鹰李坪; 关键词：大麻二酚血脑屏障

探讨益气温阳方抑制变应性鼻炎小鼠鼻黏膜细胞自噬及保护ZO-1及occludin的作用被引量：1: 2024年; 目的观察益气温阳方(黄芪、党参、干姜、桂枝、麻黄、辛夷、五味子、地龙、甘草)对变应性鼻炎小鼠模型的治疗效果和对鼻黏膜细胞抑制自噬、保护紧密连接关键蛋白——闭锁连接蛋白1(ZO-1)及闭合蛋白(occludin)的影响。方法将30只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为6组:空白组,模型组,益气温阳方低、中、高剂量组(7、14、28 g/kg)及西替利嗪组(1.667 mg/kg),每组5只。卵清蛋白腹腔注射加鼻部激发致敏造模,鼻部激发致敏前1 h灌胃给药,共7 d。对小鼠行为进行评分。采集小鼠鼻黏膜组织,HE染色观察鼻黏膜炎症反应,过碘酸希夫染色观察鼻黏膜杯状细胞增生情况,酶联免疫吸附测定法检测鼻腔灌洗液IgE含量,免疫组化法检测空白组、模型组、益气温阳方高剂量组鼻黏膜中ZO-1及occludin蛋白表达,蛋白质印迹法检测鼻黏膜中自噬微管相关蛋白轻链β3(LC3B)、P62及Beclin1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠行为学总分升高(P<0.01),挠鼻、喷嚏、流涕各项评分增加。鼻黏膜上皮中断、被破坏,大量炎性细胞浸润,杯状细胞增生,黏液分泌增多,黏膜肿胀明显,鼻腔灌洗液中IgE含量增加(P<0.01)。鼻黏膜中ZO-1、occludin蛋白表达减少(P<0.05)。LC3BⅡ/Ⅰ、Beclin1蛋白表达增加(P<0.05),P62蛋白表达减少(P<0.05)。给药干预后,与模型组比较,益气温阳方高剂量组和西替利嗪组小鼠行为学总分降低(P<0.01),鼻黏膜肿胀减轻,炎性细胞浸润和杯状细胞数量减少,鼻腔灌洗液中IgE含量减少(P<0.01),鼻黏膜中ZO-1、occludin蛋白表达增加(P<0.05)。益气温阳方高剂量组小鼠LC3BⅡ/Ⅰ、Beclin1蛋白表达减少(P<0.05),P62蛋白表达增加(P<0.05)。结论益气温阳方对变应性鼻炎小鼠具有良好的治疗效果,该作用机制可能与其抑制鼻黏膜细胞自噬从而促进鼻黏膜修复相关。; 顾文哲史军严道南沈政洁; 关键词：益气温阳方变应性鼻炎小鼠

高压氧联合阿替普酶静脉溶栓对急性缺血性脑卒中患者脑组织血流灌注状态及血清IMA、NFL、Occludin水平的影响: 2024年; 目的:探讨高压氧联合阿替普酶静脉溶栓对急性缺血性脑卒中(AIS)患者脑组织血流灌注状态及血清缺血修饰白蛋白(IMA)、神经丝轻链蛋白(NFL)、闭合蛋白(Occludin)水平的影响。方法:选取我院2022年6月~2023年6月124例AIS患者为研究对象,随机抽签法分为对照组和观察组,各62例,对照组给予阿替普酶静脉溶栓治疗,观察组在对照组基础上给予高压氧治疗。比较两组临床疗效、卒中量表(NHISS)与改良型Rankin(m RS)评分、脑组织血流灌注状态[脑血流量(CBF)、脑血容量(CBV)、平均通过时间(MTT)、达峰反应时间(TMax)]、血清IMA、NFL、Occludin水平及不良反应发生率。结果:相较于对照组,观察组总有效率较高,治疗2周后NHISS、m RS评分降低(P<0.05);相较于对照组,观察组治疗2周后CBF、CBV升高,MTT、TMax缩短(P<0.05);相较于对照组,观察组治疗2周后血清IMA、Occludin、NFL水平降低(P<0.05);两组不良反应发生率无显著差异(P>0.05)。结论:高压氧联合阿替普酶静脉溶栓治疗AIS患者,可改善脑组织血流灌注状态,降低血清IMA、Occludin、NFL水平,减轻神经功能损伤,疗效显著,且安全性高。; 钱晓林耿文丽马莉莉乔妍李焕; 关键词：高压氧阿替普酶 NFL OCCLUDIN

血清Occludin、Axl水平与急性缺血性脑卒中溶栓后出血转化的关系被引量：1: 2024年; 目的探讨血清闭合蛋白(Occludin)、Axl水平与急性缺血性脑卒中(AIS)溶栓治疗后出血转化(HT)的关系。方法选取2019年1月至2022年1月该院AIS患者126例为研究对象,根据是否发生HT分为HT组(43例)和非HT组(83例)。比较两组一般资料及血清Occludin、Axl水平,采用多因素Logistic回归分析AIS患者发生HT的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Occludin、Axl对AIS患者发生HT的预测价值,并分析血清Occludin、Axl预测HT发生的交互作用。结果两组心房颤动、入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及血清Occludin、Axl水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,心房颤动、入院时NIHSS评分高、血清Occludin高水平、Axl低水平均为AIS患者发生HT的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清Occludin、Axl预测AIS患者溶栓治疗后HT风险均有较高价值,二者联合预测的曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度分别为0.742、70.73%、66.93%。Occludin和Axl对HT发生存在负向交互作用。结论AIS患者血清Occludin、Axl均异常表达,可作为HT的预测指标,且二者对HT发生存在负向交互作用。; 张立娜王海虹王适达; 关键词：AXL 急性缺血性脑卒中出血转化

通腑理肺汤对脓毒症肠屏障损伤大鼠肠黏膜组织闭锁小带蛋白-1、闭合蛋白mRNA及蛋白表达的影响被引量：3: 2024年; 目的:探讨通腑理肺汤(TFL)对脓毒症肠屏障损伤大鼠肠黏膜组织闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)mRNA及蛋白表达影响的实验研究。方法:随机抽取纯种SD大鼠40只,依次分为假手术组、模型组、TFL低剂量组和TFL高剂量组,共四组,每组10只。应用盲肠结扎穿孔(CLP)的造模方式制作脓毒症肠屏障损伤大鼠模型;假手术组只暴露盲肠,不做穿孔处理。TFL低剂量组造模成功后给予3.6 g/kg体重TFL灌胃;TFL高剂量组采用相同方法造模后,按7.2 g/kg体重TFL进行灌胃处理;模型组和假手术组按蒸馏水10 ml/kg体重灌胃,以上各组均每天干预1次,共7 d。7 d后处死各组大鼠,分离肠黏膜组织,采用RT-qPCR法检测肠黏膜组织ZO-1、Occludin mRNA基因,Western blot检测ZO-1、Occludin蛋白表达;同时取出各组相同部位的肠黏膜组织,光镜及透射电镜下观察肠黏膜组织病理及超微结构变化。结果:模型组大鼠肠黏膜组织中ZO-1、Occludin mRNA基因及蛋白表达对比假手术组均显著降低(P<0.05)。TFL低剂量组、高剂量组大鼠肠黏膜组织中ZO-1、Occludin mRNA基因及蛋白表达对比模型组均显著升高(P<0.05)。光镜下观察肠黏膜组织病理显示TFL低剂量组及高剂量组肠黏膜上皮细胞水肿、肠黏膜绒毛受损以及基底层、固有层水肿、淋巴细胞及中性粒细胞浸润明显减轻。透射电镜下肠黏膜组织超微结构亦显示TFL低剂量组及高剂量组微绒毛密集且规则,肠细胞间呈锯齿状和互锁模式,线粒体清晰,紧密连接轻微受损。结论:脓毒症肠屏障损伤大鼠模型病理损害的减轻,可能是TFL上调了肠黏膜组织紧密连接ZO-1、Occludin mRNA基因及蛋白的表达,改善肠上皮细胞间的紧密连接作用来实现的。; 柳蔓吕波李兰陈立; 关键词：紧密连接蛋白

加味逍遥散对2,4-DNCB诱导的特应性皮炎小鼠模型claudin-1、occludin、ZO-1的影响: 2024年; 目的观察加味逍遥散对特异性皮炎(AD)模型的疗效,对皮肤组织、表皮屏障影响及其可能的机制。方法将48只小鼠分为6组,即空白组,模型组,加味逍遥散低、中、高剂量组,西替利嗪组。通过2-二硝基氯苯诱导复制特应性皮炎模型,给予加味逍遥散低、中、高剂量及阳性对照药干预,比较记录治疗前后皮损评分、耳廓厚度、搔抓次数、皮肤含水量;苏木精和伊红染色(HE)观察皮肤组织病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IgE、IL-33、5-HT,皮损TLSP、5-HT,蛋白免疫印迹法Western blotting检测皮损中claudin-1、occludin、ZO-1蛋白的表达;采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测皮损中claudin-1、occludin、ZO-1的mRNA表达。结果与空白组比较,2,4-DNCB诱导小鼠背部皮肤出现红斑、鳞屑、水肿/丘疹,皮损组织可见淋巴细胞、中性粒细胞浸润,皮损厚度增加,血清IgE、IL-33升高,皮损中claduin-1、occludin,ZO-1水平降低。加味逍遥散可改善皮损症状、减少抓挠次数和皮损厚度,降低血清IgE、IL-33、5-HT和皮损5-HT、TSLP水平,减轻炎症反应。治疗后,AD皮损中紧密连接蛋白ZO-1、claudin-1和occludin的表达降低得到恢复。皮损中ZO-1、claudin-1和occludin的转录水平上升,加味逍遥散增加了小鼠皮损中ZO-1、claudin-1、occludin mRNA的表达。结论加味逍遥散可减轻AD模型的皮肤过敏反应,抑制皮肤组织炎症反应。它可能通过降低IL-33和TSLP的水平来减少搔抓行为达到保护小鼠的皮肤完整性和皮肤屏障作用;通过调节组织中紧密连接蛋白的表达从而达到保护表皮紧密连接结构,增加紧密连接结构的完整性,也可能是其治疗特应性皮炎的作用机制之一,加味逍遥散可能作为治疗AD的潜在效药。; 王志敏秦成王芳孔祥一赵永东杨雪松叶建州; 关键词：特应性皮炎加味逍遥散

补阳还五汤对糖尿病脑病小鼠肠道紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的影响及机制探讨: 糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是由胰岛素释放不足或胰岛素不敏感引起的代谢紊乱综合征,我国20-79岁的糖尿病患者人数高居世界首位。因此,研究如何用药控制糖尿病的发生发展极为重要。糖尿病是一种进展性疾病...; 田晓燕; 关键词：补阳还五汤糖尿病脑病肠屏障

Occludin基因在猪肠道屏障中的研究进展被引量：1: 2023年; 紧密连接蛋白与肠道疾病密切相关,由Occludin基因编码的蛋白质是紧密连接蛋白中具有代表性的蛋白之一,在维持肠道屏障功能完整中发挥重要作用。在猪肠道中,Occludin基因表达的下降会导致细胞膜通透性增加,使肠道屏障功能受损,从而引发多种肠道疾病。文章综述了肠道屏障的构成、紧密连接蛋白的分类及Occludin基因编码蛋白质的结构和生物学功能,介绍了Occludin基因在猪肠道中的表达情况和营养调控的研究进展,为预防猪腹泻、肠道炎症等疾病提供参考。; 段继娇谢宇潇朱俊红关轩承黄英杨明华许宏赵素梅; 关键词：紧密连接蛋白肠道疾病营养调控

脂多糖对绵羊输卵管上皮Claudin-1和Occludin表达的影响: 2023年; 绵羊等反刍动物瘤胃的异常代谢及炎症会造成脂多糖(LPS)异位诱发集体其他部位炎症风险,然而LPS对绵羊输卵管上皮屏障关键蛋白紧密连接蛋白封闭蛋白-1(Claudin-1)和闭合蛋白(Occludin)的影响尚不清楚。为阐明LPS对绵羊输卵管上皮Claudin-1和Occludin的影响,本研究采集成年绵羊输卵管通过苏木精-伊红染色、免疫荧光、蛋白免疫印迹法(WB)检测,并体外培养原代输卵管上皮细胞通过免疫荧光、蛋白免疫印迹法及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行试验。结果表明,Claudin-1和Occludin表达于绵羊输卵管伞部、壶腹部和峡部上皮,Claudin-1和Occludin在伞部的表达量显著高于壶腹部和峡部。采用浓度为0、10、50和100 ng·mL^(-1)的LPS诱导原代壶腹部上皮细胞,发现LPS可促进TLR4、NFκB及TNFα的mRNA表达,并影响Claudin-1和Occludin的蛋白表达水平。表明LPS在短时间内可诱导输卵管炎症反应,并导致上皮细胞Claudin-1和Occludin表达紊乱。进一步提示反刍动物瘤胃异常代谢及炎症导致的LPS易位,可能会诱发输卵管炎症反应,造成输卵管上皮屏障损伤及生理功能障碍,严重影响绵羊的经济价值。本研究结果为反刍动物瘤胃异常代谢及炎症疾病期间LPS易位造成全身性炎症的相关研究提供了理论基础。; 曾建林吕建树段宏伟杨帅张榕张勇胡俊杰; 关键词：绵羊输卵管脂多糖 CLAUDIN-1 OCCLUDIN

血清sortilin、occludin水平与急性冠状动脉综合征患者PCI术后支架内再狭窄的关系: 2023年; 目的探讨血清分拣蛋白(sortilin)、闭合蛋白(occludin)与急性冠状动脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入术(PCI)后支架内再狭窄的关系。方法选取2019年5月至2021年5月在安阳市中医院行PCI术治疗的126例ACS患者为研究对象,采用酶联免疫吸附法检测患者血清sortilin、occludin水平。根据术后连续随访12个月是否发生支架内再狭窄分为狭窄组(n=34)与未狭窄组(n=92)。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sortilin、occludin对ACS患者PCI术后支架内再狭窄的预测价值,多因素Logistic回归分析探讨影响ACS患者PCI术后支架内再狭窄的相关因素。结果两组糖尿病史、冠状动脉病变支数、冠状动脉病变长度、术前Gensini评分、支架置入个数、LDL-C比较,差异有统计学意义(P<0.05)。狭窄组血清sortilin、occludin水平高于未狭窄组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清sortilin、occludin预测再狭窄的AUC(95%CI)为0.791(0.741~0.841)、0.857(0.807~0.907),截点值分别为1.61 ng/ml、4.51 ng/ml,特异度分别为52.15%、67.96%,灵敏度分别为92.16%、92.16%;两者联合预测的AUC(95%CI)为0.903(0.853~0.953),特异度为86.24%,灵敏度为87.96%。糖尿病史、冠状动脉多支病变、LDL-C≥1.8 mmoL/L、sortilin≥1.61 ng/ml、occludin≥4.51 ng/ml是ACS患者PCI术后支架内再狭窄的相关因素(P<0.05)。结论血清sortilin、occludin水平升高与ACS患者经皮冠状动脉介入术后支架内再狭窄有关,二者有望作为预测再狭窄的生物学指标。; 王新献郭玉凡; 关键词：经皮冠状动脉介入术再狭窄

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