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斜纹夜蛾Cyp10基因的克隆及表达载体构建: 2017年; 亲环蛋白10(Cyclophilin 10,Cyp10)是亲环蛋白家族成员之一,这是一类广泛存在于真核及原核生物内的蛋白家族,其共性是都具有肽基脯氨酰顺反异构酶(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerases,PPIase)活性。有研究表明,Cyp10可能参与了肿瘤细胞凋亡蛋白胞质分布的调控,但在昆虫先天免疫中的作用没有见到报道。本研究以斜纹夜蛾Spodoptera litura为研究对象,以寄生后斜纹夜蛾血细胞转录组数据中发现的特异cyp10序列为基础,通过RT-PCR克隆出了cyp10基因,通过生物信息学方法对此序列进行开放阅读框分析(Open Reading Frame,ORF)和序列同源性比对,发现cyp10基因ORF全长486 bp,编码161个氨基酸,具有肽基脯氨酰顺反异构酶家族标签序列:YNGSLFHRNIKGFIVQTG,因此确定为亲环蛋白基因家族成员。构建了包括ORF全长编码区的原核表达载体p ET32a-Cyp10及真核表达载体p IZT/V5-His-Cyp10,经Western blot证明,p ET32a-Cyp10和p IZT/V5-His-Cyp10可分别在大肠杆菌和鳞翅目昆虫细胞系(Hi5,Sf9和Spli221)中表达,蛋白分子量分别是26 k Da和22 k Da。之后以细胞免疫荧光定位法探索Cyp10在家蚕细胞Bm N内的分布,发现Cyp10主要分布于细胞质内。这些结果为进一步探索Cyp10在昆虫先天免疫中的作用奠定了一定基础。; 田航宇俞丹邢文溪李明; 关键词：斜纹夜蛾克隆免疫荧光

斜纹夜蛾inx1,inx4基因的克隆及表达载体构建被引量：1: 2015年; 无脊椎动物innexin(inx)基因是生物进化上高度保守的基因,区别于脊椎动物的connexin。Inx基因可在细胞膜表面形成功能性的半通道蛋白hemichannel和间隙连接蛋白gap junction,这两种蛋白都与信号传导,胚胎发育,神经系统分化等功能相关。本研究在斜纹夜蛾Spodoptera litura血细胞转录组数据中发现特异的inx1,inx4序列,通过RT-PCR克隆出了Spli-inx1,Spli-inx4,经过比对,确定它们都属于保守的inx基因家族,具有四个保守的跨膜结构域,两个胞外环,一个胞内环,一个位于第二个跨膜结构域前端的YYQWV基序及在胞外环上各有2个半胱氨酸残基。其中,Spli-inx1开放阅读框全长1086 bp,编码361个氨基酸;Spli-inx4开放阅读框全长1116 bp,编码371个氨基酸。构建了包含ORF全长编码区的原核表达载体及真核表达载体,经Western blot证明Spli-inx1和Spli-inx4均可在大肠杆菌及鳞翅目昆虫High Five,Sf9和Spli221细胞系中的表达,初步探索了它们在细胞中的结构和功能。为深入研究Spli Inx1和Spli Inx4的功能奠定基础。; 刘信毅罗开珺; 关键词：斜纹夜蛾 INNEXIN HEMICHANNEL 原核表达真核表达

双斑侧沟茧蜂病毒调控真核翻译起始因子eIF4A及eIF4E: 茧蜂病毒在茧蜂的寄生过程中抑制寄主免疫反应的机理已经有初步的研究,已有报道双斑侧沟茧蜂病毒（Mb BV）可以诱导寄主斜纹夜蛾血细胞的凋亡抑制寄主的免疫反应,然而其中的调控机理仍不清楚。本研究旨在探究Mb BV通过调控寄主...; 董树美; 关键词：EIF4E 细胞凋亡; 文献传递

茧蜂病毒和Innexins调控凋亡小体的形成与CRISPR/Cas9对innexins编辑的研究: 双斑侧沟茧蜂病毒（Microplitis bicoloratus bracovirus,MbBV）是寄生蜂的共生病毒,Hemichannel在细胞与细胞外环境之间进行信号传导。前期研究表明MbBV能通过诱导粒细胞凋亡来抑...; 尤珊; 关键词：凋亡小体

双斑侧沟茧蜂寄生斜纹夜蛾促进CypD与p53互作诱导寄主血细胞凋亡的研究: 双斑侧沟茧蜂（Microplitisbicoloratus）是农业害虫斜纹夜蛾（Spodoptera litura）的天敌,通过寄生斜纹夜蛾幼虫而抑制寄主血细胞的免疫反应及寄主的生长发育。亲环素D（Cyclophilin...; 张潘; 关键词：斜纹夜蛾 P53 细胞凋亡; 文献传递

泛素-蛋白酶体系统在昆虫先天免疫中的调控作用: 2015年; 完善的先天免疫系统使得昆虫成为分布最广、适应性最强、物种多样性最丰富的动物类群。在长期的进化过程中,昆虫建立了一套安全有效的先天免疫系统,一方面在面对外界微生物攻击的时候及时有效的发生免疫应答反应;另一方面通过免疫抑制来调控适度免疫应答,避免对自身发动攻击和控制环境共生菌刺激引起的免疫应答信号通路的持续激活。泛素-蛋白酶体系统在昆虫先天免疫中具有重要的调控作用,在Toll和IMD信号通路中,通过对免疫应答通路中信号分子的泛素化修饰加工,促进或抑制抗菌肽的表达,从而使免疫反应达到一个平衡。本文通过对泛素-蛋白酶体系统在Toll和IMD信号通路中的免疫应答和免疫抑制方面的研究进行综述,阐明了该系统在昆虫先天免疫中的调控作用,将有助于开展农业害虫与其天敌之间相互关系的深入研究,揭示其免疫调控机理,为开发生物农药,进行生物防控提供理论依据。; 杨洋李明罗开珺叶辉; 关键词：泛素-蛋白酶体系统免疫应答免疫抑制

茧蜂病毒调控CypA与AIF相互作用诱导昆虫细胞凋亡的研究: 双斑侧沟茧蜂（Microplitis bicoloratus,Mbicoloratus）可以寄生斜纹夜蛾（（Spodopteralitura,S.litura））,并将茧蜂所携带的病毒释放入斜纹夜蛾幼虫体内,茧蜂病毒（M...; 胡艳; 关键词：斜纹夜蛾 CYPA AIF; 文献传递

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国家自然科学基金(31260448)