天津市高等学校科技发展基金计划项目(20100619)
- 作品数:7 被引量:8H指数:2
- 相关作者:葛秀国李吉霞郭宏丁向彬王轶敏更多>>
- 相关机构:天津农学院西北农林科技大学山东省滨州畜牧兽医研究院更多>>
- 发文基金:天津市高等学校科技发展基金计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- hTERT永生化牛乳腺上皮细胞核移植胚胎的早期发育
- 2013年
- 为了研究供核细胞端粒酶基因的激活是否影响核移植胚胎的早期发育,试验采用转染端粒酶基因的牛乳腺上皮细胞与正常乳腺上皮细胞分别作为供核细胞进行核移植,检测重构胚卵裂率、囊胚发育率和孵化胚发育率及囊胚细胞数的差异。结果表明:2种细胞都可被牛卵母细胞重编程,各项指标差异均不显著。说明供核细胞人端粒酶催化亚基水平的高低对植入前阶段的核移植胚胎发育无显著影响,推测牛早期核移植胚胎可以调节端粒酶基因的表达和端粒的延伸,无需外源人端粒酶催化亚基活性。
- 李吉霞王勇胜葛秀国郭宏张涌
- 关键词:端粒酶乳腺上皮细胞核移植
- 小鼠乳腺脂肪组织体外培养
- 2013年
- 乳腺周围脂肪组织构成了乳腺生存和发育的微环境,对乳腺细胞的增殖和乳腺肿瘤/癌的生长、侵袭都具有重要影响,但目前尚未见特定关于乳腺脂肪细胞分离与培养的报道。本研究通过组织培养法培养小鼠乳腺周围脂肪组织,不但获得了成熟脂肪细胞,还获得了脂肪干细胞样细胞。该培养体系的建立简单易行,为研究脂肪组织对乳腺癌的发生、生长和侵袭的影响提供了材料,也为体外获得成熟脂肪细胞和脂肪干细胞提供了参考。
- 李吉霞王轶敏丁向彬葛秀国
- 关键词:乳腺脂肪细胞
- 绿色荧光蛋白标记牛乳腺上皮细胞生长特征和超微结构观察被引量:1
- 2013年
- 为了研究绿色荧光蛋白标记对牛乳腺上皮细胞超微结构和细胞体外生长的影响,试验分离、培养和鉴定了牛乳腺上皮细胞,对细胞进行绿色荧光蛋白标记,制作超薄切片,用透射电镜观察细胞超微结构,并进行核型分析。结果发现,牛乳腺上皮细胞呈典型的"铺路石样"单层生长,经绿色荧光蛋白标记后,细胞发出绿色荧光,且维持转染前的基本形态,可以表达广谱细胞角蛋白。在超微结构上,转染前后的牛乳腺上皮细胞均有大而明显的核仁,核膜清晰,核内聚集有异染色质,表明遗传物质稳定。细胞表面微绒毛发达,显示物质、能量或信息的交流活动较强;胞质内线粒体、内质网丰富,胞质内均含有大量的脂滴,显示细胞营养物质代谢旺盛。对GFP标记乳腺上皮细胞进行染色体核型分析显示细胞内含有60条染色体,形态正常,呈二倍体核型。试验结果表明,绿色荧光蛋白可以用于标记牛乳腺上皮细胞,不会对细胞体外生长活性和超微结构等造成明显影响。
- 李吉霞葛秀国王轶敏丁向彬郭宏
- 关键词:绿色荧光蛋白乳腺上皮细胞超微结构核型分析
- 牛乳腺干细胞的分离和生物学特征被引量:3
- 2013年
- 为获得牛乳腺干细胞并对其生物学特征进行研究,通过悬浮培养,从体外培养的乳腺上皮细胞分离得到乳腺干细胞球,并通过RT-PCR、Western-blot、免疫组化染色和流式细胞分析对其表面抗原标记特征和分化特征进行研究。结果表明,牛乳腺干细胞表达CD29和CD49f,可以分化为腺上皮细胞和肌上皮细胞。该分离方法增加了获得牛乳腺干细胞的途径,特异性标记物CD29和CD49f可用于其生物学特征研究。
- 李吉霞葛秀国郭宏张涌
- 关键词:乳腺干细胞
- 牛乳腺上皮细胞的分离培养被引量:1
- 2012年
- 为了对牛乳腺上皮细胞(MECs)进行分离、培养和鉴定,并研究细胞分泌功能,试验通过胶原酶消化法分离得到了牛乳腺上皮细胞,采用传代法对细胞进行纯化,对细胞标志蛋白进行免疫荧光染色鉴定,通过体外诱导和RT-PCR分析鉴定细胞的分泌功能。结果表明:分离到的牛乳腺上皮细胞具有典型乳腺上皮细胞的形态特征,表达广谱角蛋白,经诱导后可分泌β-酪蛋白。
- 李吉霞葛秀国王文秀张涌
- 关键词:牛乳腺上皮细胞
- 乳腺干细胞自我更新相关信号通路研究进展被引量:2
- 2013年
- 乳腺干细胞是来源于乳腺组织的一种成体干细胞,具有自我更新和定向分化潜能。乳腺干细胞对乳腺的发育和功能维持具有重要作用。近年来发现,乳腺干细胞与乳腺癌的发生也有密切联系。多条信号通路对乳腺干细胞的自我更新与分化起着重要作用,这些通路包括Wnt、Notch和Hedgehog通路等。了解这些信号通路的调控机制对乳腺干细胞、乳腺发育以及乳腺癌的研究均有重要意义。本文就近年来该方面的进展做一综述,以期为本领域相关研究提供参考。
- 李吉霞葛秀国刘新峰王轶敏丁向彬
- 关键词:乳腺干细胞WNTNOTCHHEDGEHOG信号通路
- 细胞因子对牛乳腺上皮细胞体外增殖作用评价被引量:2
- 2013年
- 分离纯化了乳腺上皮细胞,对细胞进行角蛋白免疫组化鉴定后,比较不同细胞因子对乳腺上皮细胞生长的影响。结果显示,生长因子EGF或HGF对牛乳腺上皮细胞的增殖具有重要作用,17β-E2不能促进牛乳腺上皮细胞的增殖,但可与EGF协同促进牛乳腺上皮细胞的增殖,表明17β-E2对EGF诱导的乳腺上皮细胞增殖具有重要作用。
- 李吉霞葛秀国王轶敏丁向彬郭宏
- 关键词:乳腺上皮细胞细胞因子