国家自然科学基金(81160478)
- 作品数：11 被引量：89H指数：6
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- 当归红芪多糖对辐射损伤心肌细胞线粒体凋亡通路的影响被引量：16
- 2015年
- 目的探讨当归红芪多糖对辐射损伤氧化应激诱导的心肌细胞线粒体凋亡通路异常的影响。方法原代培养Wistar大鼠乳鼠心肌细胞,X线照射心肌细胞建立辐射损伤模型,用不同浓度的当归红芪多糖进行干预。实验分正常对照组、辐射损伤模型组(照射剂量为6 Gy)、当归红芪多糖低剂量组(终浓度为25 mg/L)、当归红芪多糖中剂量组(终浓度为50 mg/L)、当归红芪多糖高剂量组(终浓度为100 mg/L)。MTT法检测各组心肌细胞生长抑制率;DCFH-DA荧光探针检测各组心肌细胞活性氧自由基(ROS)表达水平;激光共聚焦技术检测各组心肌细胞线粒体膜电位水平;蛋白印迹法检测各组心肌细胞内细胞色素C(Cyt C)、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达量。结果与正常对照组相比,辐射损伤组心肌细胞生长抑制率明显升高、线粒体膜电位降低、ROS表达及Cyt C、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达量明显升高,差异具有显著性(P<0.05)。与辐射损伤组相比,当归红芪多糖各干预组心肌细胞生长抑制率均不同程度下降、线粒体膜电位有所升高、ROS表达及Cyt C、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达量均不同程度降低(P<0.05)。结论辐射致心肌细胞凋亡的机制之一是线粒体凋亡通路的激活,当归红芪多糖通过调控该通路发挥心肌细胞保护作用。
- 朱贝贝畅艳娜李应东孙少伯刘凯
- 关键词：心肌细胞线粒体
- 当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢致PC12细胞氧化损伤的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢(H2O2)致PC12细胞氧化损伤的影响。方法 H2O2诱导PC12细胞构建氧化应激损伤模型;不同剂量当归红芪超滤膜提取物(0.38、0.75、1.5 g/L)干预;MTT法测定细胞存活率;生化法检测细胞内MDA、LDH、SOD含量;双氯荧光黄乙酸乙酯(DCF-DA)染色,检测细胞内ROS含量。结果 200μmol/L H2O2作用6 h成功诱导PC12细胞氧化应激损伤;与空白对照组比较,H2O2模型组细胞存活率下降,细胞内LDH、MDA、ROS含量增多,SOD含量下降(P<0.05);与H2O2模型组相比,当归红芪超滤膜提取物各剂量组细胞存活率明显上升,细胞内LDH、MDA、ROS含量降低,SOD含量增加(P<0.05)。结论当归红芪超滤膜提取物可修复H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤。
- 朱贝贝刘斌李淑玲刘萍萍李应东刘凯
- 关键词：过氧化氢PC12细胞
- 当归红芪超滤膜提取物对12C6＋重离子束辐射致H22荷瘤小鼠免疫功能损伤的影响被引量：9
- 2017年
- 目的观察当归红芪超滤膜提取物抗^(12)C^(6+)重离子束辐射致H22荷瘤小鼠免疫功能损伤的作用。方法 H22细胞皮下注射法构建H22荷瘤小鼠模型,以检测血液白细胞数目为评价标准确定^(12)C^(6+)重离子束辐射致H22荷瘤小鼠免疫损伤最佳辐射剂量及当归红芪超滤膜提取物药物干预最佳剂量。实验分正常对照组、肿瘤模型组、单纯药物组(给予当归红芪超滤膜提取物6.72 g/kg)、单纯放射组(照射剂量为4Gy)、药物(给予当归红芪超滤膜提取物6.72 g/kg)+放射(照射剂量为4Gy)组。测定各组脾脏指数、胸腺指数;流式细胞仪技术分析各组小鼠血液T淋巴细胞亚群变化;ELISA法检测各组小鼠血清补体C3、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)含量;光镜下观察脾脏病理形态学改变。结果与肿瘤模型组比较,单纯放射组血液白细胞数目、脾脏指数、胸腺指数、血液CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量、血清补体C3、IFN-γ、IL-4含量明显下降(P<0.05),CD4+/CD8+比值、IFN-γ/IL-4比值明显下降(P<0.05)。病理形态学显示:肿瘤模型组小鼠脾脏形态结构如常,多数脾窦扩张淤血,脾小体清晰,可见动脉周围淋巴鞘,巨核细胞多见,与正常对照组小鼠脾脏形态无明显差异;单纯放射组脾脏脾小体及红髓脾索萎缩,淋巴细胞明显减少,巨核细胞数量减少,纤维组织增生。与单纯放射组比较,药物+放射组血液白细胞数目、脾脏指数、胸腺指数、血液CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量、血清补体C3、IFN-γ含量明显上升(P<0.05),CD4+/CD8+比值、IFN-γ/IL-4比值有明显上升(P<0.05),病理形态学损伤改变明显减轻。结论当归红芪超滤膜提取物有减轻^(12)C^(6+)重离子束辐射引起H22的荷瘤小鼠免疫功能损伤的作用。
- 刘凯柴辉孙少伯李应东王伟
- 关键词：当归红芪H22荷瘤小鼠免疫功能
- 黄芪超滤物对H22腹水瘤小鼠重离子放疗的增敏作用及机制探讨被引量：6
- 2015年
- 观察黄芪超滤物(UEMAM)对H22腹水瘤小鼠重离子放疗的增敏作用,并探讨其相关的机制。小鼠腹腔内注射H22腹水瘤细胞悬液0.2 mL制备腹水瘤小鼠模型。成模小鼠随机分为4组,分别给予生理盐水(对照组)、UEMAM(中药组)、6Gy^(12)C^(6+)离子束外照射(放疗组)及UEMAM联合6Gy^(12)C^(6+)离子束外照射(中药+放疗组)处理。每天测量小鼠的体重、腹围,并观察其日常生活状态;统计各组小鼠的生存期,流式细胞仪检测细胞的凋亡率及周期分布;Western blot检测p53、Bax、Bcl-2及cleaved Caspase-3的表达;单细胞凝胶电泳技术观察H22细胞DNA的损伤情况。实验结果表明治疗组(中药组、放疗组及中药加放疗组)小鼠平均生存时间较对照组明显延长,体重与腹围较对照组明显减小;与对照组相比,治疗干预后促进了H22细胞凋亡、周期阻滞及DNA损伤;中药加放疗组的平均生存时间较放疗组明显延长,体重与腹围较放疗组明显减小;此外,中药加放疗组还促进了H22细胞凋亡、周期阻滞及DNA损伤;蛋白表达结果分析治疗组(中药组、放疗组及中药加放疗组)明显激活了p53凋亡信号通路。通过该实验发现UEMAM对H22腹水瘤小鼠具有放射增敏作用,其增敏作用机制与激活p53介导的细胞凋亡信号途径有关。
- 汪彬彬王小虎刘凯孙少伯宋鹏李应东
- 关键词：放射增敏P53
- 细胞自噬对肿瘤发展影响的研究进展被引量：2
- 2012年
- 细胞自噬是普遍存在于真核细胞的一种自我消化过程，指细胞对自身结构的吞噬降解，是将细胞内变形、损伤、衰老或非功能性蛋白质及细胞器运送到溶酶体中形成自噬溶酶体，消化降解其包裹的内容物，实现细胞自身代谢需要和细胞器再度更新的过程，也称为Ⅱ型程序性死亡。细胞自噬不仅是细胞程序性死亡的重要过程，而且在先天性免疫、发育、细胞分化等方面也起着重要作用，
- 郭晓蓥李应东
- 关键词：细胞自噬肿瘤发展细胞程序性死亡先天性免疫真核细胞
- 红芪超滤物对人肝癌HepG2细胞辐射敏感性的影响被引量：4
- 2013年
- 目的观察红芪超滤物(UEMHP)对人肝癌HepG2细胞辐射增敏的作用,并探讨其可能机制。方法用CCK-8法检测UEMHP对HepG2细胞生长抑制的影响;克隆形成实验检测UEMHP对HepG2的辐射增敏作用;通过流式细胞仪检测HepG2细胞周期分布的变化和凋亡率;采用RT-PCR法检测Survivin mRNA表达。结果在5～50mg/L浓度范围内,UEMHP对HepG2细胞的生长抑制作用呈时间和剂量依赖性(P<0.05);加药辐射组与单纯辐射组比较,克隆存活曲线显示加药辐射组各剂量点的存活分数均低于单纯辐射组(P<0.05),UEMHP能抑制HepG2细胞克隆形成,对HepG2有辐射增敏作用;流式细胞仪检测显示UEMHP具有去G2/M周期阻滞效应,加药辐射组细胞凋亡率(21.42%±3.74%)高于对照组(5.35%±0.41%)、单纯药物组(10.36%±1.75%)和单纯辐射组(10.58%±2.01%,P<0.01);RT-PCR显示加药辐射组Survivin mRNA(0.31±0.02)表达低于对照组(0.82±0.06)和单纯辐射组(0.58±0.04),差异有统计学意义(P<0.01)。结论 UEMHP对人肝癌HepG2细胞具有辐射增敏作用,其辐射增敏机制可能通过下调SurvivinmRNA的表达与促进细胞凋亡有关。
- 寇炜李应东刘凯郭晓蓥董玉梅
- 关键词：HEPG2细胞辐射增敏
- 红芪多糖联合X线对HepG-2细胞DNA损伤的影响被引量：8
- 2012年
- 目的研究红芪多糖联合X线对人肝癌体外培养的HepG-2细胞DNA损伤的影响,并初步探讨其抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法 体外培养HepG-2细胞,加不同浓度的红芪多糖处理12、24、36、48小时后,CCK-8法测定细胞的生长抑制率;用单细胞凝胶电泳技术观察红芪多糖联合直线加速器发射的6MV X线辐照HepG-2细胞后,其DNA的损伤情况。结果 HPS(5～100 mg/L)可抑制HepG-2细胞的增殖,具有时间和浓度依赖性;单细胞凝胶电泳法显示浓度为25 mg/L HPS作用12小时后可见明显的彗星状拖尾,而对照组细胞呈明显的圆形;HPS作用12小时后,进行2 Gy的X线照射后可见更加明显的彗星状拖尾,而对照组细胞呈明显的圆形;而2 Gy的X线照射后,再给予浓度为25 mg/L的HPS作用,亦见更加明显的彗星状拖尾,而对照组细胞呈明显的圆形;经HPS联合X线处理后的HepG-2细胞,其DNA损伤程度与单用HPS处理的细胞的DNA损伤程度相当,但优于单用X线处理;X线辐照后,立即给予HPS处理,HepG-2细胞的DNA损伤程度优于单用X线、单用HPS及HPS联合X线处理。结论 HPS可抑制HepG-2细胞的增殖;HPS和(或)X线可对HepG-2细胞的DNA造成显著的损伤;HPS可增敏X线损伤HepG-2细胞;HPS抑制HepG-2细胞损伤的DNA双链的修复可能是其增敏X线治疗肿瘤的机制之一。
- 董玉梅王小虎寇炜刘凯孙少伯李应东
- 关键词：彗星试验
- 当归红芪多糖对急性心肌缺血大鼠的保护作用被引量：10
- 2016年
- 目的:观察当归红芪多糖对急性心肌缺血大鼠的保护作用,并探讨其相关的作用机制。方法:将80只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(SH),缺血组(MI),当归红芪多糖3 g·kg-1组(LD),当归红芪多糖6 g·kg-1组(MD),当归红芪多糖12 g·kg-1组(HD),每组16只。通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型;缺血+当归红芪多糖干预组分别于缺血24 h时用当归红芪多糖3,6,12 g·kg-1ig,各组动物分别于治疗后36 h及14 d时取材。应用生化分析仪测定大鼠血清肌酸激酶(CK),肌酸激酶同工酶(CK-MB),乳酸盐脱氢酶(LDH),乳酸盐脱氢酶同工酶(LDHI)含量;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测大鼠心肌组织热休克蛋白70(Hsp70),Hsp32,血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达变化情况。结果:与SH组比较,MI组ST段均抬高(P<0.05);与SH组比较,MI组CK,CK-MB,LDH,LDHI含量在36 h时有显著升高,Hsp70,Hsp32,VEGF mRNA表达量增加(P<0.05,P<0.01);与MI组比较,当归红芪多糖各剂量组CK,CK-MB,LDH,LDHI含量在36 h时明显升高,Hsp70,Hsp32,VEGF mRNA表达增高(P<0.05,P<0.01)。结论:当归红芪超滤物对急性心肌缺血大鼠具有明显的保护作用。
- 李淑玲刘凯赵信科朱贝贝李应东
- 关键词：急性心肌缺血肌酸激酶热休克蛋白
- 当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢致PC12细胞凋亡的影响被引量：4
- 2016年
- 目的观察当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢(H2O2)致PC12细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法 H2O2诱导PC12细胞凋亡,构建氧化损伤神经细胞凋亡模型。实验分为正常对照组、模型组及中药低、中、高剂量组,中药各组给予不同剂量当归红芪超滤膜提取物。流式细胞术检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位变化,Western blot检测Bax、Bcl-2和cleaved Caspase-3的蛋白表达。结果与模型组比较,中药各剂量组细胞凋亡率明显降低,线粒体膜电位升高,Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达均减弱,Bcl-2表达增强,Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05)。结论当归红芪超滤膜提取物具有抗H2O2诱导的PC12细胞凋亡的作用。
- 朱贝贝刘萍萍李淑玲刘凯李应东
- 关键词：过氧化氢PC12细胞凋亡
- 当归多糖对环磷酰胺致骨髓抑制小鼠外周血细胞、免疫功能的影响被引量：25
- 2016年
- 目的探讨当归多糖对环磷酰胺致骨髓抑制小鼠外周血细胞、免疫功能的影响,为临床进一步开发应用当归多糖提供理论依据。方法采用环磷酰胺腹腔给药建立小鼠骨髓抑制模型。将SPF级Wistar雄性小鼠72只按随机对照原则分为6组,即正常组、模型组、当归多糖高剂量组、当归多糖中剂量组、当归多糖低剂量组及对照组。造模成功后各组分别给予蒸馏水、高剂量当归多糖(400μg/g)、中剂量当归多糖(200μg/g)、低剂量当归多糖(100μg/g)及利血生(20μg/g)干预。应用常规法测外周血细胞计数、流式细胞术检测T细胞亚群、酶联免疫吸附法检测IgM、放射免疫法检测IgG。结果与B组比较,C组、D组及F组可升高WBC(P<0.05),C组可升高RBC(P<0.05),D组、E组可升高PLT(P<0.05)。与B组比较,C组、D组、E组和F组的IgG、IgM含量出现不同程度的增高(P<0.01或P<0.05);C组IgG水平相比F组高(P<0.05),比A组低(P<0.01);A组与B组IgG、IgM含量比较,有显著性差异(P<0.05)。当归多糖高剂量组(C组)T细胞亚群接近正常水平,与B组比较,C组、D组、E组和F组除CD8+显著降低外(P<0.05),其他亚群水平均升高(P<0.05)。结论当归多糖可以改善小鼠不同程度的骨髓抑制,且能增强化疗后小鼠的免疫功能,还可升高骨髓抑制小鼠血清中的IgG、IgM含量,以调节体液免疫,进而调控骨髓造血。
- 丁学兰赵信科邱勇玉陈开兵李应东
- 关键词：当归多糖环磷酰胺骨髓抑制外周血细胞免疫功能
