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国家自然科学基金(31171822): 作品数：6 被引量：24H指数：3; 相关作者：沈文涛黎小瑛周鹏言普杨国峰更多>>; 相关机构：中国热带农业科学院海南大学海南师范大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项海南省重点科技计划项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因嵌合hpRNA载体一步快速构建及沉默效果的研究被引量：2: 2016年; 番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)严重威胁番木瓜种植业的发展,且目前没有十分有效的防治办法。病毒侵染植物依赖寄主因子的协助,真核翻译起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)是多种RNA病毒侵染植物的必需因子。以番木瓜eIF4E家族基因为研究对象,构建同时干扰其eIF4E和eIFiso4E基因的发卡RNA(hairpin RNA,hpRNA)载体,并将其导入到番木瓜叶肉原生质中。通过荧光实时定量检测发现,番木瓜中eIF4E和eIFiso4E基因的表达量分别下降了49.8%和67.6%,这为进一步研究番木瓜eIF4E家族基因对PRSV侵染的影响以及利用RNA干扰技术靶向植物基因的病毒防治新策略提供理论和实践依据。; 霍鹏言普沈文涛黎小瑛周鹏; 关键词：番木瓜原生质体 EIF4E

番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因嵌合hpRNA载体一步快速构建及沉默效果的研究: 番木瓜环斑病毒(PRSV)严重威胁番木瓜种植业的发展,且目前没有十分有效的防治办法。病毒侵染植物依赖寄主因子的协助,真核翻译起始因子4E(eIF4E)是多种RNA病毒侵染植物的必需因子。本研究以番木瓜eIF4E家族基因为...; 霍鹏言普沈文涛黎小瑛周鹏; 关键词：番木瓜 HPRNA 原生质体 EIF4E; 文献传递

植物hpRNA干扰载体构建的研究进展被引量：9: 2013年; RNAi技术在基因功能鉴定和功能基因表达调控中发挥着重要作用。hpRNA干扰载体被广泛用于植物的RNAi研究。对植物hpRNA干扰载体的构建方法进行综述,并分析其优缺点,为植物hpRNA干扰载体构建方法的选择提供参考。; 言普沈文涛黎小瑛周鹏; 关键词：RNAI HPRNA GOLDEN

我国番木瓜抗环斑病毒种质资源创新研究及应用被引量：8: 2013年; 针对我国具有自主知识产权的番木瓜环斑病毒抗病资源匮乏,制约我国番木瓜育种产业发展的关键问题及现有育种发展研究基础,指出利用现代生物技术开展番木瓜种质资源创新研究是我国番木瓜创新育种的必由之路,为我国番木瓜育种产业的健康和可持续发展提供理论依据。; 周鹏王树昌沈文涛言普黎小瑛; 关键词：番木瓜种质资源现代生物技术

番木瓜蛋氨酸亚砜还原酶B1(PaMsrB1)的真核表达及其活性检测: 在生物和非生物逆境下,植物蛋氨酸亚砜还原酶B1(methionine sulfoxide reductase B1,MsrB1)具有修复叶绿体中被氧化蛋白的功能。本研究首次利用毕赤酵母真核表达系统,胞外分泌表达了番木瓜M...; 张列沈文涛庹德财黎小瑛周鹏; 关键词：表达纯化薄层层析; 文献传递

原核表达的PRSV HC-Pro基因同源dsRNA诱导番木瓜抗性的研究被引量：3: 2013年; 利用番木瓜环斑病毒(PRSV)HC-Pro基因3′端824bp区段,通过OZ-LIC法构建了含有PDK内含子的发夹RNA编码结构,并选用pSP73和M-Jm109LacY分别作为宿主载体和宿主菌,构建了高效的同源dsRNA原核表达工程菌M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-H824,经IPTG诱导表达的dsRNA不被DNaseI和RNaseA降解,稳定性较好。采用喷洒dsRNA粗制品的方式对番木瓜植株进行保护性处理和治疗性处理,症状观察及ELISA、Real-time RT-PCR分析结果表明,保护性处理能有效诱发对番木瓜环斑病毒的抗性(发病率低,发病时间晚);治疗性处理(植株已接种PRSV 25d)能在处理初期引起番木瓜环斑病毒积累量发生短暂降低。; 杨国峰沈文涛言普黎小瑛周鹏; 关键词：番木瓜环斑病毒 HC-PRO DSRNA 原核表达 RNA沉默

Complete genome sequence of an isolate of Papaya leaf distortion mosaic virus from commercialized PRSV-resistant transgenic papaya in China: SUMMARY Papaya leaf distortion mosaic virus is highly destructive to commercial papaya production. Here,the co...; Decai TuoWentao ShenPu YanChongqi LiLe GaoXiaoying LiHuaping LiPeng Zhou; 文献传递

原核表达dsRNA抗番木瓜畸形花叶病毒的研究被引量：2: 2014年; 番木瓜畸形花叶病毒（Papaya leaf distortion mosaic virus,PLDMV）是一种已对番木瓜种植业构成潜在威胁的新型病害,在转基因植物备受争议的背景下,利用原核表达的dsRNA来防控病毒的策略不失为一种新的选择.本文选取PLDMV CP基因全长（879 bp）,运用OZ-LIC法构建了含有pdk内含子的ihpRNA结构,将其嵌入原核表达载体pSP73中,并转化RNaseⅢ缺陷型大肠杆菌M-Jm109LacY,构建了1种能高表达dsRNA的原核表达菌株M-Jm109LacY-CP879,以终浓度为0.4 mmol/LIPTG诱导后能够稳定高效的表达CP879-dsRNA.研究共设2个处理：保护性处理与治疗性处理.分别用含有CP879-dsRNA的粗提液对这2个处理的番木瓜植株进行喷施处理,通过统计发病率、观察病症变化以及ELISA分析结果表明,保护性处理能有效抑制番木瓜畸形花叶病毒的侵染,主要表现为发病时间推迟和相对较低的发病率;治疗性处理植株的病毒积累量会在喷施后第3～12天内出现暂时性的降低.结果表明,保护效果优于治疗效果,若每月喷施2～3次dsRNA粗提液,有望能够有效地预防PLDMV的侵染.; 张涛沈文涛言普黎小瑛周鹏; 关键词：原核表达 DSRNA RNA沉默

Agroinoculation of Carica papaya with infectious clones of Papaya mosaic virus: Papaya(Carica papaya L.)production in China is threatened most by two known viral diseases,caused by Papaya ri...; Wentao SHENYongchen WANGDECAI TuoPu YanyoNG YANGXiaoying LiPeng Zhou; 关键词：AGROINOCULATION POTEXVIRUS; 文献传递

Resistance of non-transgenic papayas to papaya ringspot virus(PRSV) mediated by intron-containing hairpin dsRNAs expressed in bacteria: RNA-mediated virus resistance based on natural antiviral RNA silencing has been exploited as a powerful tool f...; Wentao ShenGuofeng YangYao ChenPu YanDecai TuoXiaoying LiPeng Zhou; 关键词：PRSV; 文献传递

国家自然科学基金(31171822)