山西省自然科学基金(2007011109)
- 作品数：10 被引量：22H指数：3
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- 食品添加剂亚硫酸钠对HL-7702肝细胞的毒性作用被引量：6
- 2008年
- 目的探讨亚硫酸钠(Na2SO3)对HL-7702正常人肝细胞的损伤作用。方法经不同浓度(分别为0.039,0.156,0.625,2.5mmol/L)的Na2SO3染毒24h后,采用MTT法观察Na2SO3对肝细胞活性的抑制作用和通过测定肝细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活性来反映其对肝细胞膜的损害。结果①随着Na2SO3染毒剂量的增加,OD值逐渐降低,肝细胞的活性抑制率逐渐升高;其中0.625mmol/L和2.5mmol/L染毒组与阴性对照组相比有统计学意义(P<0.05)。②肝细胞培养上清中的LDH随染毒剂量的增加而呈上升趋势,与对照组相比有显著性差异(P<0.05),并且有一定的剂量反应关系(r=0.841,P<0.01)。结论①Na2SO3对肝细胞的活性有一定的抑制作用;②Na2SO3染毒24h后使肝细胞培养上清中LDH活性增高,提示其对肝细胞膜可能有一定的损伤作用。
- 王明衡白剑英原福胜
- 关键词：亚硫酸钠MTT法乳酸脱氢酶
- 食品添加剂亚硫酸钠对肝细胞蛋白合成功能的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨食品添加剂亚硫酸钠对肝脏蛋白合成功能的可能影响。方法以不同浓度的亚硫酸钠(Na2SO3)作用于正常人二倍体肝细胞株HL-7702(简称L-02)细胞,终浓度分别为0.039、0.156、0.625和2.5 mmol/L,并设阴性对照组和阳性对照组(体积分数为0.3%的乙醇)。采用生化分析法检测不同接触时间后各染毒组肝细胞培养上清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总蛋白和白蛋白含量。结果①Na2SO3染毒24 h,随着染毒浓度的增加,各组肝细胞培养上清中AST活性逐渐升高,0.625和2.5 mmol/L组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。而在染毒48和72 h后,各染毒组与对照组比较,无统计学差异;当作用24和48 h后,随Na2 SO3浓度增加,各组肝细胞培养上清中ALT活性逐渐升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);染毒72 h后,各染毒组与对照组之间的ALT活性无差异。②Na2SO3染毒24、48和72 h后,各染毒组肝细胞培养上清中白蛋白和总蛋白的含量与阴性对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论亚硫酸钠染毒不同时间后可能对肝细胞膜结构造成一定影响使培养上清中转氨酶活性明显增加,但对肝细胞的蛋白合成功能无明显影响。
- 白剑英王明衡梁瑞峰站立涛李燕张志红
- 关键词：亚硫酸钠HL-7702ASTALT白蛋白总蛋白
- 亚硫酸钠对人胚肾293细胞炎性因子表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨亚硫酸钠(Na2SO3)对人胚肾293(HEK293)细胞炎性因子表达的影响。方法采用改进的单溶液噻唑兰(MTS)比色法观察0、0.0025、0.01、0.039、0.156、0.625、2.5、10mmol/L亚硫酸钠对人胚肾293细胞株(HEK293)的毒性作用,并观察0、0.039、0.156、0.625、2.5、10mmol/L亚硫酸钠染毒致HEK293细胞的形态学改变,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HEK293细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和白介素8(IL-8)的mRNA水平的改变。结果细胞毒性实验显示,当亚硫酸钠浓度为0.625、2.5、10mmol/L时,OD值分别为(0.35475±0.02124),(0.60050±0.01277),(0.78475±0.00985),均低于对照组(2.5145±0.202265),差异有统计学意义(P<0.05);当亚硫酸钠浓度≤0.156mmol/L时,OD值范围为(2.47375±0.06999)～(2.62500±0.12029),与对照组比较,差异无统计学意义。形态学观察发现,当接触亚硫酸钠浓度≥0.625mmol/L时,细胞数量明显降低,细胞比较细长,突起较少;当亚硫酸钠浓度≤0.156mmol/L时,细胞数量和形态基本无变化。RT-PCR检测结果显示,0.039～10mmol/L的亚硫酸钠对TNF-α、MCP-1和IL-8的mRNA表达无明显诱导作用。结论亚硫酸钠对人胚肾细胞具有一定的抑制损伤作用,但对TNF-α、MCP-1和IL-8基因表达水平无影响,二者之间无明显关联。
- 白剑英王明衡王慧宇
- 关键词：亚硫酸钠人胚肾细胞炎性因子
- 致肝损伤毒物四氯化碳体外染毒剂量的选择被引量：1
- 2013年
- 目的探讨四氯化碳(CCl4)致肝脏损伤体外实验模型的染毒剂量。方法以不同浓度CCl4作用于正常人二倍体肝细胞HL-7702细胞,使其终浓度分别为0(阴性对照),5,10,20,30 mmol/L和40 mmol/L。采用CCK8法检测不同浓度CCl4对肝细胞活性的影响,采用生化分析法检测染毒后肝细胞培养上清中谷草转氨酶(AST),谷丙转氨酶(ALT),乳酸脱氢酶(LDH),碱性磷酸酶(AKP)的水平。结果①染毒24 h后,肝细胞活性呈剂量依赖性降低,其中20-40 mmol/L CCl4对肝细胞活性有明显抑制作用,与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。②染毒24 h后,随着CCl4染毒剂量的增加,各染毒组肝细胞培养上清中AST的活性有逐渐升高的趋势,其中40 mmol/L CCl4染毒组与阴性对照组比较有统计学差异(P<0.05);各染毒组肝细胞培养上清中ALT的活性逐渐增加,其中10-30 mmol/L CCl4染毒组与阴性对照组相比显著升高(P<0.05);各染毒组肝细胞培养上清中AKP和LDH的活性与阴性对照组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 10 mmol/L CCl4在对HL-7702肝细胞活性无明显影响的情况即可引起肝细胞培养上清中ALT的活性升高,对肝细胞膜造成一定的损伤,可作为其肝损伤机制研究的体外染毒剂量。
- 张继东张健新王幼萍白剑英
- 亚硫酸钠对人胚肾293细胞的毒性作用与胞内蛋白水平变化的关系被引量：3
- 2010年
- 目的研究食品添加剂亚硫酸钠(Na2SO3)对人胚肾293细胞(HEK293)的毒性作用与胞内重要蛋白质p53、增殖细胞核抗原(PCNA)和三磷酸腺苷(ATP)结合转运子G2(ABCG2)含量改变之间的关系。方法采用细胞毒性试验(MTS)法观察Na2SO3对HEK293细胞的毒性作用,用蛋白印记法检测HEK293细胞中p53、PCNA和ABCG2蛋白水平。结果0.625～10mmol/L NaSO3处理组的细胞活性与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),说明NaSO3对HEK293细胞有明显的毒性作用;蛋白印记分析发现最高剂量组10mmol/L Na2SO3可同时降低细胞内p53、PCNA和ABCG2蛋白水平,而其余剂量组0.039～2.5mmol/L Na2SO3对HEK293细胞内p53、PCNA和ABCG2蛋白的水平无明显影响。结论在本试验条件下,当Na2SO3的接触浓度达到一定水平时对人胚肾293细胞具有明显的毒性作用,这种毒性作用很可能与其降低肾细胞内的蛋白水平,干扰肾细胞的正常功能相关。
- 白剑英雷佩玉邢锦王静
- 关键词：亚硫酸钠增殖细胞核抗原人胚肾293细胞
- 亚硫酸钠引起肝细胞内活性氧增高对p53蛋白表达的影响
- 2012年
- 目的：探讨亚硫酸钠引起肝细胞内活性氧水平变化与p53蛋白表达之间的关系。方法：将人正常二倍体肝细胞株HL-7702培养于含10％小牛血清的DMEM培养基中，待生长至适宜密度时用不同浓度亚硫酸钠染毒4h。采用Fluo-3AM钙离子荧光指示剂法测定肝细胞内Ca^2＋。水平变化，二氯荧光黄双乙酸酯荧光标记法测定肝细胞内活性氧水平，蛋白杂交法和免疫细胞化学法检测肝细胞内p53蛋白表达情况，RT-PCR法检测肝细胞内p53基因mRNA表达水平的变化。结果：一定浓度的亚硫酸钠可引起肝细胞内Ca^2＋水平增加，并伴随着活性氧水平增加和肝细胞内p53蛋白表达水平明显增加，但p53基因mRNA表达水平无明显变化。结论：亚硫酸钠可通过增加肝细胞内Ca^2＋水平引起肝细胞内活性氧水平和p53蛋白水平增加，这种影响可能发生在蛋白质翻译或翻译后水平。
- 雷佩玉刘鑫赵春燕仪慧兰王幼萍梁瑞峰白剑英
- 关键词：亚硫酸钠钙离子浓度活性氧P53
- 亚硫酸钠对HepG2细胞毒性的实验研究被引量：9
- 2012年
- 目的观察食品添加剂亚硫酸钠对人肝肿瘤细胞(HepG2)的细胞毒性作用和脂肪变作用。方法向HepG2细胞悬液中分别加入终浓度为0(阴性对照)～10 mmol/L亚硫酸钠溶液染毒24、48和72 h,并设空白对照(无细胞)组和阳性对照组(含1%Tritonx-100的DMEM),每组6个复孔。采用乳酸脱氢酶(LDH)活力测定法检测肝细胞膜的通透性变化,采用CCK-8法检测肝细胞的活性改变,采用油红O染色法观察肝细胞内脂肪沉积情况。结果与阴性对照组相比,仅10 mmol/L亚硫酸钠染毒24 h后HepG2细胞培养上清中LDH活力的释放率增加(P<0.05);而各剂量亚硫酸钠染毒48和72 h后HepG2细胞培养上清中LDH活力的释放率无显著变化。与阴性对照组相比,各剂量亚硫酸钠染毒24、48、72 h后(除0.039 mmol/L染毒72 h外)HepG2细胞的存活率均显著下降(P<0.05),且细胞存活率随着亚硫酸钠染毒剂量的升高而降低。染毒24、48 h后,部分亚硫酸钠染毒组HepG2细胞内出现了极少量的脂滴,而阴性对照组却未发现;染毒72 h后,10 mmol/L亚硫酸钠染毒组出现明显脂滴。结论一定剂量的亚硫酸钠染毒可增加HepG2细胞膜的通透性,对肝细胞活性有明显的抑制作用,并且可引起肝细胞内甘油三酯的蓄积。
- 赵春燕原福胜白剑英雷佩玉任玉龙
- 关键词：亚硫酸钠乳酸脱氢酶甘油三酯
- 亚硫酸钠和甲醛联合染毒对人正常二倍体肝细胞活力及p53蛋白表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究亚硫酸钠与甲醛联合染毒对人正常二倍体肝细胞株(HL-7702细胞)的毒性作用及对肝细胞内抑癌基因p53蛋白表达的影响。方法分别加入终浓度为0(阴性对照),0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠,0.02、0.1、0.5、2.5、12.5 mmol/L甲醛以及0.1 mmol/L甲醛+0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠进行染毒24 h,采用MTT试验检测肝细胞的活性。分别加入终浓度为0(阴性对照)、0.039、0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠,0.02、0.1、0.5、2.5、12.5mmol/L甲醛,10 mmol/L甲醛+0.039、0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠以及0.1 mmol/L甲醛+0.039、0.156、0.625、2.5mmol/L亚硫酸钠进行染毒24 h,采用蛋白杂交法(Western blot)检测肝细胞内p53蛋白的表达水平。结果与阴性对照组比较,2.5 mmol/L亚硫酸钠及0.1～12.5 mmol/L甲醛单独染毒肝细胞的活性均明显降低(P<0.05),且肝细胞活性均随着染毒浓度的升高而下降;0.1 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞的活性均高于0.1 mmol/L甲醛单独染毒组(P<0.05),且0.1 mmol/L甲醛+2.5 mmol/L亚硫酸钠联合染毒组肝细胞活性也明显高于2.5 mmol/L亚硫酸钠单独染毒组(P<0.05)。各浓度亚硫酸钠单独染毒对肝细胞内p53表达水平无明显影响,而0.5～12.5 mmol/L甲醛单独染毒可引起肝细胞内p53表达水平明显下降(P<0.05);10 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞内p53蛋白表达水平均低于阴性对照组和10 mmol/L甲醛单独染毒组及相同剂量亚硫酸钠单独染毒组(P<0.05);而0.1 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞内p53蛋白的表达水平与阴性对照组比较,均无明显变化。结论亚硫酸钠和甲醛联合染毒对肝细胞活性的抑制作用有所减弱。较高浓度(10 mmol/L)甲醛可抑制肝细胞内p53蛋白的表达水平,亚硫酸钠可加强这种抑制作用。
- 雷佩玉王晓君白剑英王静邢锦梁瑞峰王婕
- 关键词：亚硫酸钠甲醛P53蛋白
- 亚硫酸钠对人胚肾293细胞APP蛋白表达影响
- 2010年
- 目的研究食品添加剂亚硫酸钠（Na2SO3）对β-淀粉样物质（Aβ）前体蛋白（APP）表达的影响。方法用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测人胚肾293（HEK293）中APP基因的mRNA表达水平,用蛋白印迹法（W est-ern-b lotting）检测HEK293中APP蛋白水平。结果RT-PCR检测显示,HEK293接触0.039-10 mmol/L Na2SO324 h后细胞内APP基因的3个亚型APP695、APP751、APP770的mRNA水平均未见明显改变。蛋白印迹分析发现,10mmol/L Na2SO3可明显降低细胞内APP蛋白水平,为阴性对照组的0.908倍 而较低剂量组0.039-2.5 mmol/LNa2SO3却可以明显增加细胞内APP蛋白的水平,分别达到阴性对照组的1.596,1.630,1.556和1.446倍。结论亚硫酸钠在一定剂量范围内影响HEK293细胞内APP蛋白水平,可能对老年性痴呆的发生有一定影响,但是细胞内APP蛋白水平的增加不是由该基因转录水平增加所致。
- 白剑英王明衡王慧宇梁瑞峰
- 关键词：亚硫酸钠人胚肾293细胞
- 亚硫酸钠对章氏肝细胞TG含量和VLDL分泌的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察食品添加剂亚硫酸钠(Na2SO3)对章氏肝(Chang's liver)细胞甘油三酯(TG)含量和极低密度脂蛋白(VLDL)分泌的影响,进一步探讨其致肝损伤作用的机制。方法经不同浓度的Na2SO3染毒24 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性;油红O染色法观察肝细胞脂肪变性;甘油三酯GPO-POD酶法测定试剂盒检测染毒24 h后细胞内甘油三酯(TG)含量;Western Blotting检测细胞外培养上清中VLDL的分泌。结果 (1)Na2SO3染毒组能够降低细胞存活率,与阴性对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)油红O染色结果显示,染毒24 h后,10、2.5和0.5 mmol/LNa2SO3处理组细胞内均未出现红色脂滴,即未见细胞出现脂肪变性;(3)染毒24 h后,10 mmol/L Na2SO3处理组细胞内TG含量明显增加,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);(4)染毒24 h后,Na2SO3各处理组胞外培养上清中VLDL水平与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Na2SO3染毒24 h虽不能诱导肝细胞出现脂肪变性,但高浓度可引起肝细胞中TG含量增加。
- 雷佩玉白剑英赵春燕王幼萍梁瑞峰
- 关键词：亚硫酸钠
