国家自然科学基金(30972162)
- 作品数：19 被引量：26H指数：3
- 相关作者：郑世民吕晓萍高雪丽刘超男隋欣更多>>
- 相关机构：东北农业大学黑龙江中医药大学辽宁省动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡Bcl-2 SYBR GREEN实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
- 2013年
- Bcl-2是与细胞凋亡相关因素的重要成员之一,是目前研究细胞凋亡的热点。本研究根据GenBank中已发表的鸡β-actin和Bcl-2基因序列设计引物,成功建立了检测鸡Bcl-2 mRNA表达的荧光定量PCR方法,并成功应用于检测益生菌对传染性法氏囊病(IBD)疫苗免疫后的雏鸡免疫器官中Bcl-2 mRNA表达量的变化,结果显示益生菌联合IBD疫苗免疫雏鸡后,其免疫器官中Bcl-2 mRNA表达量高于IBD疫苗单独免疫组。此方法具有快速、高通量、线性范围广、特异性强、灵敏度高等特点,为进一步定量研究鸡Bcl-2 mRNA表达及其与相关疾病的关系奠定了技术基础。
- 李岩刘畅刘超男高雪丽吕晓萍胡丽君郑世民
- 关键词：BCL-2基因实时定量PCR
- 益生菌对新城疫疫苗免疫雏鸡淋巴细胞增殖能力的影响被引量：3
- 2012年
- 本试验以1日龄雏鸡为研究对象,采用细胞培养和MTT检测技术,通过T、B淋巴细胞增殖能力的测定,研究了益生菌对新城疫疫苗免疫雏鸡外周血液和免疫器官T、B淋巴细胞对ConA或PMA增殖能力的影响。结果表明,雏鸡ND疫苗免疫后,益生菌应用雏鸡和ND疫苗免疫雏鸡外周血液和免疫器官中淋巴细胞增殖能力均不同程度高于对照雏鸡,且益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡较ND疫苗单独免疫雏鸡,其淋巴细胞增殖能力显著增强。NDV强毒攻击后,无论是益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡还是ND疫苗单独免疫雏鸡外周血液和免疫器官T、B淋巴细胞增殖能力均不同程度高于对照雏鸡,而益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡淋巴细胞增殖能力又强于ND疫苗单独免疫雏鸡。且益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡保护率为100%,ND疫苗单独免疫雏鸡为80%,对照雏鸡发生典型新城疫病全部死亡,表明益生菌可增强ND疫苗的免疫效应,提高ND疫苗免疫雏鸡对NDV强毒攻击的免疫保护力。
- 王兴赫刘超男郑世民
- 关键词：益生菌新城疫疫苗
- 鸡β-防御素-1 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3
- 2014年
- 以鸡β-防御素-1(Gallinacin-1,Gal-1)为研究对象,据GenBank中已发表的鸡β-actin和Gal-1序列设计引物,构建重组质粒作为标准品,成功建立了检测鸡免疫器官组织中Gal-1mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,并进行灵敏度、重复性、特异性试验。结果显示,此方法具有快速、高通量、线性范围广、特异性强、灵敏度高等特点,为进一步定量研究Gal-1mRNA表达及其与机体免疫机能的关系奠定了技术基础。
- 李岩王元心隋欣郑世民
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 益生素雏鸡新城疫疫苗免疫后局部黏膜组织T淋巴细胞数量变化被引量：2
- 2011年
- 100只艾维因雏鸡随机分成益生素组、新城疫(ND)疫苗免疫组、益生素ND疫苗组和对照组,采用组织石蜡切片及酸性α-醋酸萘酯酶(acid nonspecifica-naphthyl acetate esterase,ANAE)染色法分别测定ND疫苗首次免疫后第0、7、14、28天和第42天各组雏鸡盲肠扁桃体、哈德尔氏腺、十二指肠和回肠派伊尔结T淋巴细胞数量的动态变化,结果发现:益生素ND疫苗免疫雏鸡,ND疫苗单独免疫雏鸡上述免疫组织T淋巴细胞数量于ND疫苗免疫后14 d明显高于未免疫的对照雏鸡和益生素雏鸡;益生素ND疫苗免疫雏鸡又不同程度高于ND疫苗单独免疫雏鸡;益生素单独应用雏鸡上述被检指标高于对照雏鸡。表明益生素可增强雏鸡消化道和呼吸道局部黏膜组织的细胞免疫及对ND疫苗的免疫应答。
- 吕晓萍赵良友于学武郑世民
- 关键词：益生素雏鸡黏膜免疫
- 鸡钙敏感受体实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：2
- 2014年
- 为建立检测鸡钙敏感受体的实时荧光定量PCR检测方法,通过对鸡钙敏感受体保守区的PCR扩增后,连入pMD18-T载体,制备阳性标准品,进行实时荧光定量PCR。通过对扩增曲线、熔解曲线等试验数据进行分析,得出该检测方法具有良好的稳定性和较高的精确度。本研究成功建立了检测鸡心肌组织钙敏感受体mRNA表达的荧光定量PCR方法,为定量研究鸡钙敏感受体mRNA表达及其与相关疾病的关系奠定基础。
- 于志强高雪丽刘超男吕晓萍胡丽君郑世民
- 关键词：钙敏感受体RT-PCR
- NDV感染的鸡胚成纤维细胞TLR7 mRNA表达的动态变化被引量：3
- 2012年
- 为研究新城疫病毒(NDV)感染过程中,鸡Toll样受体7(chTLR7)表达的变化情况,采用Trizol法抽提NDV感染组和正常对照组鸡胚成纤维细胞(CEF)的总RNA,反转录成cDNA。以β-actin基因为内参,应用实时荧光定量PCR法检测细胞中chTLR7基因表达的动态变化。结果显示,CEF被NDV感染后第12、24、36、48小时,感染组chTLR7mRNA表达量分别是正常对照组的18.63、0.05、1.37、10.62倍,组间差异均极显著(P<0.01)。结果提示,chTLR7可能参与了NDV感染CEF的早期过程。
- 孟巍刘新雷王杲强李广兴张瑞莉郑世民
- 关键词：实时荧光定量PCR新城疫病毒鸡胚成纤维细胞
- 益生菌对新城疫疫苗免疫雏鸡免疫器官T细胞增殖能力和IL-2mRNA表达影响
- 2016年
- 为探索益生菌对新城疫（ND）疫苗免疫雏鸡的免疫效果影响。将100只1日龄AA肉鸡随机分为益生菌组、ND疫苗单独免疫组、益生菌联合ND疫苗应用组和空白对照组。采用MTT法和实时荧光定量PCR法检测各试验雏鸡于ND疫苗两次应用后0、7、14、28、42 d胸腺、脾脏中细胞免疫功能及IL-2 mRNA的表达。结果发现,益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡后,其胸腺和脾脏中T细胞增殖能力和IL-2 mRNA表达,分别于ND疫苗免疫后7～28 d明显（P〈0.05或P〈0.01）高于ND疫苗或益生菌单独应用雏鸡。表明益生菌可通过提高雏鸡免疫器官中T细胞增殖功能和IL-2 mRNA表达,发挥增强ND疫苗免疫效应作用。
- 白玉李琰高雪丽刘超男吕晓萍郑世民
- 关键词：益生菌新城疫疫苗白细胞介素-2
- 益生素对雏鸡局部体液免疫球蛋白相对含量的影响被引量：3
- 2010年
- 80只1日龄艾维因雏鸡随机分为益生素应用组和对照组,用间接酶联免疫吸附试验(IELISA)法分别测定了2组雏鸡泪液、气管液、胆汁和肠液的IgA、IgM、IgG相对含量的动态变化。结果发现,雏鸡服用益生素后1～49d,上述4种体液的3种免疫球蛋白含量均不同程度地高于未服用益生素的对照组雏鸡,表明益生素可在一定程度上增强雏鸡呼吸道和消化道局部的体液免疫功能。
- 邵悦滕素玲张建李立辉郑世民
- 关键词：益生素雏鸡局部体液免疫球蛋白
- 益生菌及其联合新城疫疫苗免疫雏鸡局部黏膜组织IL-2mRNA表达的变化被引量：1
- 2014年
- 以艾维因肉雏鸡为研究对象,应用实时荧光定量PCR方法,通过Ⅱ-2mRNA表达的检测,较全面系统的研究了益生菌及其联合新城疫（ND）疫苗免疫雏鸡后,其十二指肠、回肠、哈德尔氏腺和盲肠扁桃体IL-2 mRNA表达的动态变化.结果发现,雏鸡应用益生菌后,其上述局部黏膜免疫组织IL-2 mRNA表达均不同程度高于对照雏鸡,并于4～7 d差异显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）;益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡,上述被检组织的IL-2 mRNA表达虽然高于ND疫苗单独免疫雏鸡,但未见统计学差异（P＞0.05）.表明益生菌不但能够增强机体的免疫功能,而且与疫苗联合应用后,能够提高疫苗的免疫应答.
- 于志强吕晓萍高雪丽刘超男郑世民
- 关键词：益生菌新城疫疫苗白细胞介素-2MRNA表达
- 乳酸杆菌LA-LA-5对雏鸡肠道黏蛋白MUCMUC2含量的影响被引量：2
- 2015年
- 为了研究乳酸杆菌LA-5对雏鸡肠道黏蛋白MUC2含量变化的影响，应用实时荧光定量PCR技术和间接酶联免疫吸附试验对饲喂乳酸杆菌雏鸡回肠、盲肠、直肠MUC2mRNA及相应肠液MUC2蛋白含量进行检测。结果发现：饲喂乳酸杆菌雏鸡肠道MUC2mRNA表达及肠道MUC2含量在饲喂后1～18d均不同程度高于对照雏鸡，其中直肠MUC2mRNA表达水平在饲喂后1—7d极显著高于对照组（P〈0．01）；回肠肠液MUC2含量于饲喂后1～4d显著高于对照组（P〈0．05）。表明乳酸杆菌对雏鸡肠道组织黏蛋白MUC2基因表达和分泌均有影响，能促进肠道黏液分泌，提高雏鸡肠道黏膜免疫功能。
- 崔宏伟隋欣吕晓萍周英赵靓郑世民高雪丽
- 关键词：乳酸杆菌雏鸡MUC2
