上海市科学技术发展基金(024319105)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 相关作者：刘煜沈子龙奚涛成国祥钱旻更多>>
- 相关机构：中国人民解放军第二军医大学南京军医学院中国药科大学同济大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- 产生人抗体的转基因和转染色体动物研究进展被引量：1
- 2004年
- 鼠单克隆抗体应用于临床的弊端是它具有免疫原性 ,可行的办法是将鼠单克隆抗体人源化。抗体人源化的过程已由鼠嵌合抗体发展到了转基因动物表达完全人抗体阶段 ,表达完全人抗体的转基因动物有鼠、牛等。
- 孙剑华钱旻李润生 成国祥
- 关键词：单克隆抗体转基因技术微基因
- EGFR单抗与肿瘤治疗进展被引量：4
- 2003年
- 表皮生长因子受体 (EGFR)是原癌基因c erb B1的表达产物。通过与其配体结合而表现出生物学效应 ,其过表达和突变体借助于信号转导使细胞生长失控和恶性化 ,从而导致肿瘤的发生。基于此优点成为目前肿瘤治疗的新靶点。制备出针对对其的特异性抗体将给肿瘤治疗带来新的希望。
- 范建华赵建阳成国祥
- 关键词：单克隆抗体肿瘤治疗
- 利用PCR筛选噬菌体文库人免疫球蛋白重链Cγ基因的一种新方法被引量：1
- 2009年
- 扩增噬菌体人基因组文库以形成多个亚文库并富集稀有目的克隆。利用人免疫球蛋白Cγ基因启动子、编码区设计的多对探针引物,PCR筛选已扩增的亚文库,获得共阳性亚文库;利用多条同位素标记的探针筛选上述共阳性亚文库,经相应探针引物PCR鉴定,获得共阳性多克隆噬菌斑;2000倍稀释共阳性多克隆噬菌斑稀释液,PCR筛选出阳性单克隆噬菌斑。基因转换到pBSK(+)载体测序,筛到长12 kb的人免疫球蛋白重链Cγ基因,含有启动子、编码外显子、穿膜外显子及polyA序列。与传统的单条探针筛库相比,新策略利用多条探针一次同位素标记,就筛到完整的稀有Cγ基因;利用PCR在亚文库、多克隆噬菌斑稀释液、单克隆噬菌斑稀释液三个层面上筛选,逐步缩减的筛选范围是一次同位素标记筛到完整稀有基因的前提。新策略不仅提高一倍工作效率,降低几倍的耗材,同时为需要长片段基因的功能基因组领域提供筛选捷径。
- 孙剑华王宏王宏成国祥
- 关键词：PCR同位素
- 重组人VEGF_(165)工程菌的发酵及表达产物的纯化与活性测定被引量：4
- 2004年
- 目的 :优化重组人VEGF1 65(rhVEGF1 65)工程菌的发酵条件 ,分离纯化目的蛋白并检查活性。方法 :考察了甲醇诱导浓度和诱导时间对目的蛋白表达量的影响 ;发酵液经离心、透析后 ,经肝素亲和柱层析、超滤制得纯品 ;采用CAM实验和血管内皮细胞MTT法测定生物活性 ,比较了与人VEGF1 65标准品的免疫原性。结果 :最佳表达条件为 :甲醇诱导浓度为 1% ,诱导时间为 5～ 6d ;采用Heparin SepharoseCL6B亲和层析后 ,产物纯度可达 90 %以上 ;活性测定结果显示 ,目的蛋白具有促血管生成作用 ;与人VEGF1 65具有相似的免疫原性。结论 :经发酵纯化后获得了有活性的重组人VEGF1
- 刘煜吴国祥赵建阳颜天华奚涛沈子龙成国祥
- 关键词：巴氏毕赤酵母纯化免疫原性
- 重组人血管内皮生长因子165在Pichia酵母中的表达被引量：2
- 2003年
- 目的 :采用基因工程方法构建基因工程菌制备人VEGF1 65蛋白。方法 :自人肿瘤组织中获取人VEGF1 65cDNA ,构建pPIC9K酵母表达载体 ,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白。结果 :SDS PAGE及Western blot结果显示目的蛋白已成功表达。结论 :在Pichia酵母中成功表达人VEGF1 65。
- 刘煜吴国祥赵建阳颜天华奚涛沈子龙成国祥
- 关键词：血管内皮生长因子165巴氏毕赤酵母SDS-PAGEWESTERN-BLOT
