江苏省医学重点学科基金(135-10)
- 作品数：11 被引量：39H指数：4
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- CD80 CD86和CD137L基因联合表达对小鼠肝癌种植模型肿瘤免疫原性的影响被引量：4
- 2006年
- 目的探讨CD80、CD86和CD137L基因联合表达对肿瘤免疫原性的影响。方法按接种变异瘤株不同,将BAL B／c小鼠随机分成A组(H22-Wt细胞)、B组(H22-neo细胞)、C组(H22- CD80／CD86+细胞)、D组(H22-CD137L+细胞)、E组(H22-CD80／CD86／CD137L+细胞)5组,建立H22-BAL B／c小鼠荷肝癌模型,A、B组为对照组。观察小鼠成瘤率、成瘤潜伏期、荷瘤鼠存活率及肿瘤增殖情况。通过复种试验观察转基因对H22变异株免疫原性和机体免疫保护作用的影响。结果E组首次接种成瘤率仅有50．0％,显著低于其余4组(P<0．01)。首次接种后,C组荷瘤鼠肿瘤生长受到明显抑制,有2只荷瘤鼠肿瘤完全消退。E组肿瘤生长所受抑制较C组更为明显,肿瘤峰值体积显著小于C组,且有3只荷瘤鼠肿瘤完全消退。其余3组荷瘤鼠未见肿瘤完全消退。与A、B、D组相比,C、E组荷瘤鼠生存率显著改善(P<0．01),而C、E两组荷瘤鼠生存率差异无统计学意义(P> 0．05)。复种试验表明,C、E组荷瘤鼠再次成瘤率低于对照组,E组与C组差异也有统计学意义(P< 0．01);第3次接种后,E组成瘤率显著低于C组(P<0．01)。E组中5只首次接种未成瘤的小鼠,于第21天重复接种H22-Wt细胞,小鼠100％排斥肿瘤,于第56天第3次接种H22／Wt细胞,小鼠仍然100％排斥肿瘤。结论CD80+CD86和CD137L单独或者联合表达均可显著降低野生型H22细胞株致瘤性,CD80、CD86和CD137L基因联合表达显著改善了野生型H22细胞的免疫原性。
- 李国强印洁王学浩孙倍成俞悦
- 关键词：CD80CD86CD137L免疫原性
- 活体肝移植的临床研究被引量：6
- 2007年
- 目的总结活体肝移植的临床应用。方法回顾性临床分析75例活体肝移植的临床经验,对活体肝移植的外科技术改进、建立供体安全保障体系和受体预后等问题进行探讨。结果适应证为良性终末期肝病72例,恶性肿瘤3例。75例供体术后顺利康复,均未出现严重并发症;65例(65/75)受体健在,手术死亡5例(5/75),5例死于远期并发症(5/75)。供体右半肝(不包括肝中静脉)21例,扩大右半肝(包括肝中静脉)2例,扩大左半肝(包括肝中静脉)48例,左半肝或左外叶(不包括肝中静脉)4例。术后主要并发症以血管并发症、胆道并发症、细菌及病毒感染和肺部并发症为主。结论活体肝移植具有供肝来源广泛的优点,适合我国国情,有广阔的临床应用前景。改进活体肝移植技术,建立供体安全保障体系是改善受体预后的关键。
- 王学浩张峰李相成李国强成峰孔连宝孙倍成葛文刚
- 关键词：肝移植活体成人
- 亲属活体部分肝移植治疗肝豆状核变性的临床研究被引量：6
- 2006年
- 目的总结亲属活体部分肝移植治疗肝豆状核变性供体的选择和外科治疗经验。方法自2001年1月至2006年3月，共完成亲属活体部分肝移植治疗肝豆状变性32例，其中儿童29例，〉14岁者3例，急性肝功能衰竭3例，慢性肝功能不全29例，13例伴有不同程度的神经系统功能障碍。供肝者7例为患者的父亲，25例为母亲，铜蓝蛋白均基本正常，24h尿铜〈100μg。施行术式：31例为原位部分肝移植，1例为原位辅助部分肝移植。结果随访3～63个月，现存活28例，围手术期死亡2例，另外2例分别死于胆漏和难以控制的排斥反应合并感染。2例发生肝动脉栓塞，需再次肝移植。1例术后期8个月出现胆总管吻合口狭窄而行胆肠吻合。2例术后22个月和28个月发生排斥反应，改用普乐可复后逆转。伴有神经系统功能障碍的患者中11例获得长期存活，术后锥体外系症状及语言和运动障碍明显好转。结论亲属活体部分肝移植是治疗肝豆状变性的有效方法，伴有神经系统功能障碍的患者，术后绝大多数有不同程度的改善。
- 王学浩张峰李相成成峰李国强孙倍成孔连宝
- 关键词：肝豆状核变性活体供者肝移植
- 活体肝移植几种术式探讨(附50例报告)被引量：4
- 2006年
- 目的探讨活体肝移植不同术式的临床应用。方法对1995年1月至2006年3月我科完成的50例活体肝移植的临床资料进行回顾性分析,探讨活体肝移植不同术式的临床应用和保障供体安全的策略等问题。结果本组资料中,所有供体术后均顺利康复,均未出现严重并发症。适应证:良性终末期肝硬化47例,恶性肿瘤3例。44例受体健在,手术死亡3例,3例死于远期并发症。本组供体右半肝(不包括肝中静脉)9例,右半肝(包括肝中静脉)1例,左半肝(包括肝中静脉)36例,左半肝或左外叶(不包括肝中静脉)4例。结论活体肝移植是解决目前全球供肝短缺问题的重要途径之一。活体肝移植手术过程复杂,根据临床实际选择合理手术方式是保证供体安全和提高手术成功率的关键。
- 王学浩张峰李相成李国强成峰孙倍成孔连宝葛文刚
- 关键词：肝移植活体供者手术方式
- CD80 D86和CD17L基因联合表达增强细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性的机制被引量：2
- 2008年
- 目的探讨CD80、CD86和CD137L基因联合表达增强宿主细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀伤活性的机制。方法BALB／c小鼠随机分为5组，A组接种H22-Wt细胞，B组接种14_22．neo细胞，C组接种H22-CDS0／CD86细胞，D组接种H22-CD137L细胞，E组接种H22-CDS0／CD86／CD137L细胞。分别于第14、35、56和84天，每组每次随机选取2只小鼠处死取材。原位末端标记法（TUNEL）和DNA ladder法检测脾淋巴细胞凋亡。电泳迁移率法（EMSA）检测T细胞核因子KB（NF-KB）活性。结果TUNEL检测结果显示，接种后第14天，A、B组脾淋巴细胞即出现大量凋亡，D组凋亡虽然较A、B组明显减少，但仍远高于C、E组。随接种时间推移，C组脾淋巴细胞凋亡逐渐增多，而E组这一趋势不明显，至第84天，C组和E组的脾淋巴细胞凋亡指数分别为30．84-9．2和14．4±4．5。DNA ladder检测结果显示，接种后第14、35、56和84天，C组和E组均检测出典型阳性结果，其中以C组第35、56和84天凋亡最明显。EMSA检测结果显示，A、B组T细胞NF．KB活性很低，D组显著高于A、B组，C、E组则显著高于A、B和D组。随着接种时间推移，E组NF-KB活性一直维持较高水平，而C组呈现逐渐下降趋势，至第84天，C组和E组的T细胞NF-KB活性分别为14．01±1．04和41．16±5．78。结论1／22-CD80／CD86／CD137L^＋变异株接种荷瘤鼠后，CD28信号和CD137信号的协同作用可显著增强活化T细胞NF-KB活性，这可能是CD80、CD86和CD137L基因联合表达显著增强宿主CTL杀伤活性的机制之一。
- 印洁李国强俞悦施毅孙倍成成峰葛文刚王学浩
- 关键词：CD80CD86CD137L肝细胞癌核因子ΚB凋亡
- 亲属活体部分肝移植治疗肝豆状核变性手术适应证的探讨被引量：3
- 2009年
- 目的探讨亲属活体部分肝移植治疗肝豆状核变性手术适应证。方法回顾性分析2001年1月至2007年2月37例接受亲属活体部分肝移植治疗的肝豆状核变性患者的临床资料。其中男性16例，女性21例，年龄7～21岁，中位年龄11岁。临床诊断包括：急性肝功能衰竭3例，慢性肝功能衰竭失代偿32例（其中伴有神经系统功能障碍13例），慢性肝功能衰竭代偿但伴有严重神经系统功能障碍2例。术前15例神经系统功能障碍患者的评分为（15．9±4．3）分。随访20—93个月，平均（48．1±27．6）个月。结果本组37例患者获得随访，随访率100％。患者及移植物的1、3、5年存活率分别为91．9％、83．8％、75．7％和86．5％、78．4％、75．7％。供受者外科并发症包括：2例供者术后发生肝断面胆漏，经引流后治愈；3例受者发生血管并发症，其中2例为肝动脉栓塞，再次急诊行尸体肝移植后治愈；另1例为肝静脉吻合口狭窄，行介入球囊扩张治疗后治愈。神经系统功能障碍患者移植术后症状明显缓解，术后6、12、18、24和30个月评分分别为：[（17．5±3．7）分，n=13]、[（21．0±4．3）分，n=12]、[（23．9±3．9）分，n=10]、[（26．6±2．2）分，n=10]和[（28．1±1．9）分，n=7]。结论急性肝功能衰竭、慢性肝功能衰竭失代偿伴有（或不伴有）神经系统功能障碍均是亲属活体部分肝移植的手术适应证。对伴有严重神经系统功能障碍但肝功能相对稳定的患者，如内科治疗无效，仍可考虑行亲属活体部分肝移植。
- 成峰王学浩张峰李相成李国强孙倍成孔连宝
- 关键词：肝豆状核变性活体供者肝移植神经系统症状
- 活体肝移植治疗终末期肝病被引量：3
- 2008年
- 目的探讨活体肝移植（living donor liver transplantation，LDLT）供、受者术前评估和手术方式的选择。方法回顾性分析1995年1月至2007年10月我中心95例LDLT患者的临床资料。良性终末期肝病92例，其中Wilson病45例；肝脏恶性肿瘤3例。结果供肝切取不带肝中静脉右半肝31例，带肝中静脉右半肝3例，带肝中静脉左半肝51例，不带肝中静脉左半肝或左外叶10例。所有供者术后顺利恢复，均未出现严重并发症。受者随访1～86个月，良性终末期肝病受者1、3、5年累积生存率分别为89％（82例）、78％（71例）和73％（67例），其中Wilson病受者1、3、5年累积生存率分别为92％（42例）、89％（40例）和76％（34例）。3例肝脏恶性肿瘤患者死亡2例，1例长期生存。供、受者铜代谢均恢复正常。结论建立供者安全保障体系是LDLT开展的先决条件，选择合理的手术方式是提高受者生存率的关键。亲体肝移植是治疗Wilson病的有效手段。
- 王学浩张峰李相成孔连宝孙倍成李国强成峰吕凌
- 关键词：肝移植活体终末期肝病WILSON病
- 同时表达4-1BBL B7.1及B7.2三个共刺激分子基因小鼠肝癌细胞系的建立和意义被引量：3
- 2006年
- 目的:建立同时表达4-1BBL、B7.1及B7.2三个共刺激分子基因小鼠原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)细胞系。方法:将B7.1和B7.2全长cDNA的质粒酶切,构建pcDNA3.1-B7.1-IRES-B7.2重组子,酶切法鉴定。用阳离子脂质体(LipofectamineReagent)将重组子转染H22,经均霉素(Hygromycin,300!g/ml)筛选,阳性克隆命名为H22-CD80/CD86+细胞。逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测目的基因在H22-CD80/CD86+变异株的表达。采用同样方法将pCI-neo-4-1BBL质粒转入H22-CD80/CD86+细胞,G418筛选,阳性克隆命名为H22-CD80/CD86/CD137L+细胞。流式细胞仪检测三种基因在细胞克隆中的表达。结果:pcDNA3.1-B7.1-IRES-B7.2重组子经酶切鉴定,同时获得B7.1(862bp)和B7.2(984bp)目的基因片段和5.6kbp线性化pcDNA3.1载体片段;重组子测序结果与Genebank中B7.1和B7.2序列相符,证实构建成功。RT-PCR及FCM检测结果显示B7.1、B7.2及4-1BBL基因分别在H22-CD80/CD86+细胞及H22-CD80/CD86/CD137L+细胞中获得稳定、高效联合表达。结论:pcDNA3.1-B7.1-IRES-B7.2重组子构建正确,H22-CD80/CD86/CD137L+变异株可同时稳定表达B7.1、B7.2和4-1BBL三个共刺激分子基因。
- 李国强王学浩印洁俞悦
- 关键词：B7.1B7.24-1BBL
- 儿童活体肝移植术后肺部感染的预防及护理
- 2007年
- 目的探讨活体肝移植术后患儿肺部感染状况及预防措施的要点。方法2001年3月-2006年3月，对25例行活体肝移植术后患儿肺部感染状况及预防措施进行回顾分析。结果活体肝移植术后患儿并发肺部感染率较成人高，其与患儿不会咳痰或排痰不力，手术时间长，呼吸机使用时间和气管插管及气管切开时间长等因素有关。以条件致病菌为主，在术后2周内发生肺部感染例次占总肺部感染例次的60％。结论加强手术前示教及术后2周内肺部感染的预防与护理，加强术后病房的管理，重视物理性预防护理及使用呼吸治疗装置的护理，严格遵守吸痰注意事项及无菌技术操作．可有效降低活体肝移植术后患儿的肺部感染。
- 王红霞薛彩云殷蓉
- 关键词：活体肝移植肺部感染
- 肝癌微波治疗后引起肝脓肿一例被引量：2
- 2011年
- 患者女，因8d前感右上腹疼痛，呈阵发性疼痛，无肩背部放射痛，无恶心呕吐，无巩膜、皮肤黏膜黄染，在当地医院行CT检查示：肝右叶小片状低密度影。门诊拟“肝占位”收住入院。患者既往有“胆囊切除、肝管探查引流取石术”等病史，有高血压、糖尿病病史。
- 袁逸枫王兆京庄海文张峰
- 关键词：微波治疗肝脓肿右上腹疼痛肝癌肩背部放射痛低密度影
