国家自然科学基金(30271380)
- 作品数:13 被引量:81H指数:5
- 相关作者:符州杨锡强王莉佳朱晓萍李欣更多>>
- 相关机构:重庆医科大学贵阳医学院附属医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 哮喘发作患儿CD_(30)分子表达及与Th2源细胞因子和血浆免疫球蛋白E水平的相关性研究被引量:5
- 2004年
- 目的 探讨CD3 0 在哮喘发病中的作用。方法 随机选择哮喘急性发作期患儿 2 7例 ,急性上呼吸道感染 (上感 )患儿 16例 ,对照组 19例。采用直接免疫荧光流式细胞术检测外周血单核细胞 (PBMC)中CD4+ 细胞表达CD3 0 百分率 ,采用ELISA法检测培养上清IL 4、IL 13及血浆IgE水平。 结果 1.哮喘患儿PBMC中CD4+细胞表达CD3 0 百分率较对照组和上感组明显增高 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 5) ;2 .哮喘患儿PBMC培养上清IL 4、IL 13和血浆总IgE水平均较对照组和上感组增高 ,上感组血浆IgE水平亦较对照组增高 ,差异均有显著性 ;3 .哮喘组CD4+ 细胞表达CD3 0 百分率与培养上清IL 4、IL 13和血浆IgE水平呈显著正相关。 结论 分泌IL 4和IL 13的Th2类细胞活化、增殖的克隆可能主要是由CD3 0 阳性细胞克隆组成 ,Th2细胞表面CD3 0 与CD3 0 L结合后导致Th2细胞分化成熟及释放Th2源细胞因子 ,IL 4和IL 13增加可诱导B细胞分泌较多的IgE。说明CD3 0
- 朱晓萍杨锡强符州俞海国廉国利李欣
- 关键词:CD30白细胞介素-13免疫球蛋白E
- 哮喘患儿外周血单个核细胞IL-13表达与血浆总IgE的相关性被引量:2
- 2003年
- 目的 了解IL 13在哮喘发作时水平及其与IgE的相互关系 ,从而探讨IL 13在哮喘发病中的作用。方法 分别用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)及ELISA法检测哮喘患儿外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)在PHA刺激下IL 13mRNA表达及培养上清中IL 13蛋白水平的变化 ,并分析IL 13蛋白水平与IgE的相关性。 结果 哮喘发作患儿IL 13mRNA表达相对强度和蛋白质水平显著高于正常对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;哮喘发作患儿PBMC培养上清IL 13与血浆总IgE水平呈显著正相关 ,相关系数 (r)为 0 .5 93。结论 在哮喘发作期IL 13的产生明显增高 ,将IL 13水平的变化作为观察病情活动状态的一个免疫学指标具有一定的临床意义。是否能将IL
- 朱晓萍杨锡强符州于海国廉国利李欣
- 关键词:哮喘患儿外周血单个核细胞IL-13血浆总IGE
- IL-13和IL-4在哮喘发病中的作用及相互关系被引量:24
- 2004年
- 目的 探讨IL 13在哮喘发病中的作用及其与IL 4的相互关系。方法 哮喘组 2 4例 ,男 17例 ,女 7例 ;健康对照组 2 4例 ,男 12例 ,女 12例。用ELISA法检测不同时段PBMC培养上清IL 13和IL 4水平及加IL 13单克隆抗体 (McAb)和IL 4McAb干预后PBMC培养上清IL 4、IL 12、IL 13和IFN γ水平。结果 (1)IL 13动态变化 :①对照组PBMC培养 3d、5d、7d水平均较培养 1d水平高 ,差异有显著性 ,培养 3d的水平较培养 5d、7d的高 ,差异有显著性 ;②哮喘组PBMC培养 3d、5d、7d的水平均较培养 1d的水平高 ,差异有显著性 ,培养 5d的水平均较培养 3d、7d的水平高 ,但之间差异无显著性 ;③哮喘组PBMC培养 3d、5d、7d的IL 13水平均较对照组高 ,差异有显著性。 (2 )IL 4动态变化 :①对照组和哮喘组PBMC培养 1d后 ,IL 4水平明显上升 ,第 3天仍保持较高水平 ,第 5、7天明显下降 ;②哮喘组 1d、3d、5d和 7d水平均较对照组高 ,差异有显著性。 (3)IL 4McAb干预后 ,哮喘组和正常组IL 13水平与对应小鼠IgG组相比有显著性降低 ,哮喘组IFN γ水平与对应小鼠IgG组相比有显著性增高。 (4)IL 13McAb干预后IL 12水平在哮喘组和正常组均提高 ,与对应小鼠IgG组相比差异有显著性。 (5 )IL 13McAb和IL
- 朱晓萍杨锡强符州蒋利萍王莉佳李欣
- 关键词:IL-13IL-4哮喘单克隆抗体外周血单个核细胞PBMC
- 哮喘患儿外周血单个核细胞表面CD86分子的表达被引量:3
- 2003年
- 朱晓萍杨锡强符州蒋莉萍王莉佳李欣
- 关键词:哮喘外周血单个核细胞CD86免疫球蛋白E
- 卡介苗和尘螨对哮喘儿童外周血单个核细胞表达CD_(80)的影响被引量:2
- 2004年
- 目的 研究卡介苗(BCG)和尘螨(Dp)对哮喘儿童外周血单个核细胞(PBMC)表达CD19、CD80的影响,探讨CD80在哮喘发病中的作用。方法 收集哮喘儿童15例PBMC,在BCG和Dp刺激后用流式细胞术双标法检测CD19+CD80+细胞百分率结果 BCG组CD19+CD80+细胞降低(27.06±14.40)%,Dp组CD19+CD80+细胞增加(50.29±9.95)%,与对照组(34.83±16.56)%比较有显著差异。结论 CD80在哮喘发病中起重要作用,BCG抑制其表达,Dp促进其表达。 实用儿科临床杂志,2004,19(12)
- 周娟符州王成秀李欣杨锡强陈坤华
- 关键词:哮喘卡介苗尘螨
- IL-13和CD86对9HTE细胞株和哮喘患儿PBMC表达CD86水平的影响被引量:1
- 2005年
- 目的 了解IL -13和CD86在哮喘发病中的作用及anti CD86McAb治疗哮喘的机理。方法 随机选择门诊哮喘急性发作期患儿30例,正常健康儿童30例作为健康对照组。分别用rhIL -13、TNF- α和rhIL- 13+TNF -α干预9HTE人气道上皮细胞株和哮喘患儿外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC) ,用直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测9HTE人气道上皮细胞株表达CD86的百分率、PBMC中CD14 + 细胞表达CD86的平均荧光强度(MFI)及脂多糖(LPS)刺激后PBMC中CD19+ CD86 + 双阳性细胞百分率。结果 (1)分别用TNF- α、rhIL- 13和TNF- α+rhIL -13干预9HTE细胞株后CD86的表达,三组之间表达的百分率差异无统计学意义;rhIL- 13+anti- CD86McAb干预9HTE细胞株后,9HTE细胞表达CD86水平较其他组降低,差异有统计学意义。(2 )哮喘组中的空白组、IL- 13组、TNF -α组、TNF- α+IL -13组及anti CD86组的CD14 + CD86 + 的平均荧光强度和CD19+ CD86 + 百分率均较相应的对照组高,差异有统计学意义。(3)TNF -α+IL -13干预后,CD14 + CD86 + 的平均荧光强度和CD19+ CD86 + 百分率较对应的空白组、IL -13组和TNF -α组明显增高,差异有统计学意义;(4)anti CD86McAb干预后,CD14 + CD86 + 的平均荧光强度和CD19+ CD86 + 百分率较对应?
- 杨洁朱晓萍550004王莉佳符州杨锡强
- 关键词:CD86哮喘患儿平均荧光强度CD19^+上皮细胞株直接免疫荧光
- 抗白细胞介素-4在哮喘中的研究进展被引量:2
- 2005年
- 白细胞介素4(IL-4)在哮喘等变应性炎症反应中起着关键作用,IL-4受体是其结构功能的重要单位,阻断IL-4受体可能将在哮喘的防治中发挥重要作用。该文就可溶性IL-4受体、IL-4受体拮抗体和IL-4单克隆抗体三种阻断IL-4生物学活性的方法及可能的应用前景作一简要综述。
- 王晓芳符州
- 关键词:白细胞介素4哮喘
- IL-13中和抗体对哮喘小鼠恢复期气道炎症及Th1/Th2功能的影响被引量:5
- 2006年
- 目的探讨白细胞介素13(IL-13)中和抗体对哮喘小鼠恢复期气道炎症及Th1/Th2功能的影响。方法Balb/c小鼠24只,随机分为3组,即对照组、模型组、治疗组。模型组和治疗组用鸡卵清蛋白(OVA)致敏和激发,建立哮喘小鼠模型,对照组用生理盐水代替OVA。治疗组自最后一次激发后24 h起,每48 h注射IL-13中和抗体1次,连续14 d,对照组和模型组则用生理盐水替代。结果治疗组肺组织病理切片较模型组相比,炎症细胞明显减少,肺气肿程度明显减轻。血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中,治疗组较模型组IL-4、OVA特异性IgE明显下降,IFN-γ明显增加,基本接近正常对照组。结论IL-13中和抗体对哮喘小鼠恢复期有明显的治疗作用,除能明显减轻气道炎症和肺气肿外,还能纠正哮喘小鼠体内存在的Th1/Th2细胞因子失调。
- 田代印符州王莉佳何云锋王成秀周娟罗晓菊
- 关键词:IL-13抗体哮喘
- Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达鼠IL-4受体拮抗体蛋白的研究被引量:3
- 2008年
- 目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达鼠IL-4受体拮抗体(mIL-4RA)蛋白。方法PCR方法扩增小鼠IL-4C118截断型基因,定向克隆入转移质粒pFastBacHTB中,转化感受态DH10Bac细胞,在DH10Bac细胞内重组pFastBacHTB与杆粒发生转座。筛选阳性克隆,提取重组杆粒,转染sf9昆虫细胞株,获取完整重组杆状病毒。反复感染sf9细胞,扩增病毒同时表达目的蛋白;用ELISA方法进行蛋白鉴定并初步定量。结果经核苷酸序列测定及PCR方法,鉴定成功获得含mIL-4RA基因的重组杆粒;通过杆粒转染后sf9细胞所表现出来的细胞病变,推断成功转染并获得重组杆状病毒;最后ELISA方法初步定量sf9细胞培养上清中mIL-4RA蛋白表达量为(1.15±0.12)ng/mL。结论本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达mIL-4RA蛋白,为进一步研究其生物学活性及功能奠定了实验基础,同时亦为其他蛋白质的真核表达提供了方法学的参考。
- 田代印符州王晓芳王莉佳
- 关键词:白细胞介素4杆状病毒真核表达
- 哮喘患儿外周血单个核细胞中CD86和CD30分子表达的初步研究被引量:1
- 2004年
- 王莉佳朱晓萍符州杨锡强
- 关键词:哮喘CD86CD30流式细胞术