国家自然科学基金(30972883)
- 作品数：4 被引量：23H指数：3
- 相关作者：陈创奇蔡世荣马晋平吴晖何裕隆更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院南方医科大学附属南海医院广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Sonichedgehog信号通路中Shh蛋白及其下游转录因子Glil在胃癌组织中的表达及意义被引量：9
- 2011年
- 目的探讨Sonichedgehog（Shh）信号通路中Shh蛋白及其下游转录因子胶质母细胞瘤转录因子（Glil）在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者生存的相关性。方法选取胃癌病理标本100例，正常胃黏膜上皮标本10例。使用sP法对上述病理标本及正常胃黏膜切片后进行Shh及Glil抗体的免疫组织化学染色。结果所有胃癌标本Shh、Glil抗体染色阳性率为100％，正常胃黏膜标本Shh抗体染色阳性率30％，Glil抗体染色阳性率为0％。正常胃黏膜的Shh及Glil抗体染色强度明显低于胃癌组织标本（P〈0．01）。Shh及Gtil随恶性程度增高、TNM临床分期升高而表达强度升高，且伴有淋巴结转移及远处转移者表达强度升高。Shh与Glil表达强度呈线性正相关，Pear-son相关系数为0．747（P〈0．01）。胃癌患者生存期随着Shh及Glil表达强度的增强而下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Sonichedgehog信号通路参与胃癌的发生发展，其过度激活提示胃癌患者的预后不良。
- 祝芳杜国能陈剑辉蔡世荣陈创奇马晋平
- 关键词：胃癌HEDGEHOG预后
- 小干扰RNA抑制人端粒酶逆转录酶基因对胃癌细胞增殖的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 应用小干扰RNA（siRNA）技术特异性抑制人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因在胃癌SGC7901细胞中的表达,观察其对细胞增殖的影响.方法 hTERT基因的RNA干扰表达重组体用脂质体介导方法转染SGC7901细胞.荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测hTERT基因表达.TRAP-PCR法检测端粒酶活性、噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖.结果 SGC7901细胞转染前后hTERT基因的表达强度分别为：转染pU6组平均表达量为6.5×105拷贝/μg RNA;转染pU6-hTERT-siRNA Ⅰ组平均表达量为4.1 × 104拷贝/μg RNA;转染pU6-hTERT-siRNAⅡ组平均表达量为5.4×104拷贝/μg RNA.转染pU6组与其余两组P值〈0.01;转染pU6-hTERT-siRNA Ⅰ组和转染pU6-hTERT-siRNAⅡ组P值〉0.05.端粒酶活性下降,细胞生长速度明显减慢.结论 小干扰RNA能有效抑制SGC7901细胞中hTERT基因表达,hTERT基因表达下调影响SGC7901细胞增殖.
- 马晋平陈创奇赵刚蔡世荣何裕隆詹文华吴恺明吴晖王昭
- 关键词：小干扰RNAHTERT基因端粒酶
- siRNA特异性沉默hTERT基因对人结肠癌LoVo细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨靶向端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的siRNA抑制人结肠癌LoVo细胞生物学行为的影响和机制。方法:构建针对hTERT基因的siRNA(pU6-hTERT-siRNA),LipofectamineTM2000转染LoVo细胞,以同源性的pU6作阴性对照,以未转染的细胞作空白对照。MTT法检测细胞生长率。建立裸鼠结肠癌皮下移植瘤模型,瘤内注射法将pU6-hTERT-siRNAs、pU6转导,观察各组移植瘤生长情况。RT-PCR和荧光定量PCR检测细胞株和移植瘤细胞hTERTmRNA水平的变化。Western blotting检测hTERT蛋白水平的变化。结果:LoVo细胞转染pU6-hTERT-siRNA72 h后,细胞增殖抑制率达42.1%,显著高于阴性对照组(3.2%),P<0.01。裸鼠皮下移植瘤转染pU6-hTERT-siRNA14 d后,种植瘤体积为(85.9±18.7)mm3,显著小于阴性对照组[(157.4±55.6)mm3]和空白对照组[(155.2±54.2)mm3],P<0.01。荧光定量PCR和Western blotting结果显示转染pU6-hTERT-siRNA后,细胞株和移植瘤内的hTERT mRNA以及细胞株蛋白水平表达显著减少(P<0.01),阴性对照和空白对照间无显著差异。结论:pU6-hTERT-siRNA在体内外能有效抑制结肠癌LoVo细胞中hTERT基因表达,对裸鼠皮下结肠癌细胞移植瘤有明显的抑制生长作用。
- 马晋平陈创奇蔡世荣张信华杨东杰吴晖何裕隆詹文华
- 关键词：结直肠肿瘤端粒酶逆转录酶
- 抑制胃癌Hedgehog通路对转化生长因子β诱导的上皮间质化的影响被引量：7
- 2013年
- 目的探讨Hedgehog通路对胃癌转移方面的作用，特别是探讨其在胃癌上皮间质化（EMT）中起的作用。方法利用药物处理（环靶明）或小干扰RNA敲除基因的手段，抑制胃癌的Hedgehog通路，并通过显微镜下观察、Western印迹、Transwell侵袭及迁移实验，分别探讨与EMT相关的细胞形态、蛋白质水平及侵袭迁移等功能性改变。结果抑制Hedgehog通路后胃癌细胞的侵袭及迁移能力明显下降。胃癌细胞在转化生长因子（TGF）-β诱导下，细胞呈现梭形的外观、上皮化蛋白（E-钙黏蛋白）水平下调，间质化波形蛋白（Vimentim）水平上调，侵袭及转移能力分别提高3倍及4倍。TGF-β诱导后可上调Hedgehog通路的Sonic Hedgehog（SHH）及锌指转录因子（Gli）1蛋白的表达水平，提示可激活Hedgehog通路。在TGF—β的持续刺激下，抑制Hedgehog通路可逆转EMT，细胞恢复上皮化外观，E-钙黏蛋白表达上调，Vimentim表达下调，侵袭及迁移能力下调3倍及2倍。结论胃癌Hedgehog通路被抑制后，可逆转TGF-β引起的胃癌EMT化，提示Hedgehog通路在胃癌的转移方面发挥重要的作用。
- 陈剑辉吴晖马晋平陈创奇蔡世荣何裕隆
- 关键词：胃肿瘤HEDGEHOG转化生长因子Β
