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广东省科技攻关计划([2003]292)
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
相关作者:
詹国英
江经纬
廖明
林海波
张桂红
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相关机构:
华南农业大学
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猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究
被引量:2
2006年
用DNA重组技术,将已克隆的猪IL-6基因阅读框片段插入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置,获得重组质粒pBVpIL-6,转化大肠杆菌DH5α后,42℃诱导阳性表达菌。经SDS-PAGE检测发现目的蛋白获得了高效表达,表达量约占总蛋白的20%。表达的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经过变性溶解和复性后用酶联免疫吸附试验(ELISA)做定性定量检测。ELISA结果证实了所表达的蛋白为猪IL-6,复性后具有一定活性,并测出了复性后活性蛋白的浓度。
张桂红
林海波
詹国英
廖明
任涛
罗开健
曹伟胜
徐成刚
江经纬
辛朝安
关键词:
SDS-PAGE
ELISA
猪(杜长大三元杂)白细胞介素-6基因的克隆及序列分析
被引量:1
2006年
分离猪(杜长大三元杂)外周血单核细胞(PBMC)进行体外培乔,经诱导刑LPS或ConA的诱导培养48h后,提取细胞总RNA,应用RT-PCR扩增猪IL-基因,并克隆到pMDl8-T载体后测序。结果成功获得猪IL-6基因重组质粒pMDpIL-6,序列分析发现所获得的猪IL-6cDNA长度为716bp.开放阅读框为636bp,编码211个氨基酸,相对分子质量约24ku,等电点5.5。所获得的猪IL-6与GenBank上已报道的不同来源猪的IL-6有单个氨基酸存在差异;与人和其他动物IL-6氨基酸序列的同源性为78.1%-90.1%,同时反映出IL-6基因具有种的多样性,不同种动物的IL-6基因亲缘关系越近,进化关系也越近。
张桂红
林海波
江经纬
詹国英
廖明
关键词:
白细胞介素-6
基因克隆
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