教育部重点实验室开放基金(2005108)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：周克夫李鹰赵卿陈美李俊燕更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 免疫组化方法研究胸腺素α1在小鼠肉瘤S180细胞中的表达被引量：1
- 2005年
- 探讨了胸腺素α1在小鼠S180肉瘤中的表达及其临床意义,以小鼠肉瘤S180组织和正常小鼠组织为材料,福马林固定和石蜡包埋,运用兔抗胸腺素α1多克隆抗体,按常规免疫组织化学方法检测接种在小鼠皮下的小鼠肉瘤组织以及正常小鼠皮下肌肉组织细胞中胸腺素α1的表达状况.研究结果发现胸腺素α1定位表达在小鼠肉瘤组织细胞的胞浆和细胞核中,免疫组化呈现强阳性,而正常组织细胞内基本无显色,呈阴性.试验结果表明:胸腺素α1在恶性肿瘤细胞小鼠肉瘤组织细胞中高表达,而正常小鼠组织则低表达或不表达.细胞内胸腺素α1蛋白的高表达与肿瘤具有明显相关性,该研究成果可能使胸腺素α1作为一个新的和有价值的肿瘤标记物在临床诊断中得到应用,也为进一步探索胸腺素α1与肿瘤之间相互关系的分子机理研究奠定基础,并通过抑制胸腺素α1这条途径达到控制肿瘤生长的效果.
- 周克夫赵卿章军陈美李鹰徐虹刘仁海
- 关键词：胸腺素Α1小鼠肉瘤S180免疫组织化学肿瘤标记物
- 胸腺素α原基因的克隆及在大肠杆菌中的融合表达被引量：2
- 2006年
- 胸腺素α原(ProTα)作为一种免疫增强剂,对各种免疫缺陷疾病、病毒感染以及肿瘤都具有一定的作用.此外ProTα可以作为核蛋白参与细胞增殖,在肿瘤的预测、诊断及治疗中有一定应用.根据人胸腺素α原已发表的核苷酸序列,设计了一对特异性引物(P1/P2),应用RT-PCR法从中国人外周血中克隆到ProTα基因,将扩增产物连接到pMD18-T载体中并转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组质粒进行序列测定;同时用EcoRI和BamHI双酶切PCR产物,将该基因片断插入经同样双酶切的质粒pGEX 6P-1中,转化大肠杆菌BL21中进行表达.结果表明,克隆到的ProTα基因与参考的氨基酸同源性为99.70%;原核表达产物经过SDS-PAGE电泳分析,融合蛋白分子量为37 ku,主要以可溶形式存在.
- 李俊燕周克夫
- 关键词：胸腺素Α原克隆
- RH株弓形虫抗原及高效价多克隆抗体的制备被引量：3
- 2006年
- 通过制备和分析弓形虫抗原蛋白，并以此抗原制备高效价的兔抗弓形虫多克隆抗体，为弓形虫的免疫检测和诊断提供有效的方法和途径，同时也为基因工程产物的鉴定提供方便有效的检测手段．速殖子主要来源于感染后72～74h获得的腹水，通过常规方法制备和提纯弓形虫可溶性抗原，采用SDS-AGE方法分析抗原蛋白的分子量．以抗原和福氏佐剂制备成完全和不完全福氏佐剂通过脊柱两旁皮下多点免疫的途径免疫新西兰大白兔，制备兔抗弓形体多克隆抗体，间接ELISA法检测血清中抗体的效价．经过观察所获得的虫体阶段主要处在宿主细胞巨噬细胞内而尚未逸出阶段，通过对结果的分析，所制备的弓形体抗原的分子量主要集中在17～156ku之间，与文献报道有差异，兔抗弓形体抗体效价在60000以上．该研究结果将为弓形体的蛋白质研究，免疫诊断、预防及有效治疗奠定基础．
- 陈美周克夫赵卿李鹰林宇光洪凌仙
- 关键词：弓形虫抗原多克隆抗体SDS-PAGEELISA
- 应用SSR分子标记比较佳禾早占水稻组培苗与种植苗的性状差异被引量：1
- 2006年
- 株高是水稻重要的农艺形状之一,植株过高将导致倒伏和减产,目前,很多新的技术究被用来鉴定,图位克隆与水稻株高相关的基因及机理的研究,本实验选择优质早籼稻佳禾早占种植苗和经过组培获得的矮化突变水稻为材料,为研究比较它们间的遗传物质上差异,根据康耐尔大学的资料设计了311对SSR引物对佳禾早占种植材料和组培材料进行分析,对两种材料进行PCR多态性扩增,结果发现两者间存在多态性的引物有88对,多态性比例达到30.3%。在矮杆材料中不但验证了已报道的11个与调控株高性状基因相连锁的标记连锁群,同时在第3号染色体和第9号染色体上还获得了两个以前基本未有报道的标记集中分布区域。结果说明,该培养基培育出的佳禾早占水稻后代所表现出的矮杆性状与亲本在遗传物质上确有明显差别。该结果有助于挖掘和定位新的矮杆基因,并有利于今后在水稻育种中进行水稻株高性状的控制,同时也为开展矮化性状机理的研究提供有利的实验材料。
- 周克夫张凯戎文婷黄育明王侯聪
- 关键词：分子标记微卫星DNA矮化
- 接种S180肉瘤的小鼠肿瘤组织和器官中组蛋白与正常小鼠的比较研究被引量：1
- 2006年
- 采用酸抽提法分别提取接种S180肉瘤的小鼠肿瘤组织以及肝、脾、肾等器官的组蛋白和正常小鼠相应组织和器官的组蛋白,并采用SDS-PAGE方法进行检测.结果表明,正常小鼠的肝、脾、肾等器官提取的组蛋白在检测中可以看到组蛋白H1的亚带,而接种了S180肉瘤的小鼠的肿瘤组织以及肝、脾、肾等器官的组蛋白在检测中基本无明显的条带.这说明发生在小鼠身上的S180肿瘤组织对小鼠的肝、脾、肾组织中的组蛋白产生一定影响.
- 李俊燕周克夫何晶
- 关键词：S180肉瘤SDS-PAGE
