浙江省自然科学基金(Y2090538)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 相关作者：陈钢朱智沈文状杨筱嵬杨志芳更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第一医院华中科技大学同济医学院附属同济医院华中科技大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金温州市科技局科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重症急性胰腺炎大鼠肺组织Occludin的表达变化被引量：1
- 2012年
- 重症急性胰腺炎（SAP）引发局部和全身性过度炎性反应，导致远隔器官损害及多器官功能障碍是其死亡的主要原因。SAP多器官功能障碍最易累及肺脏，并且是其死亡的重要原因。目前认为多种因素参与其发展过程，可能与微循环、细胞凋亡、炎性介质以及免疫失衡等有关。
- 吴芳陈钢孟庆彬彭晶晶沈文状朱智余正平
- 关键词：重症急性胰腺炎OCCLUDIN大鼠肺组织多器官功能障碍器官损害细胞凋亡
- EphA1/EphrinA反馈环调控内皮祖细胞促肝细胞癌血管生成潜能被引量：1
- 2019年
- 目的:研究体内外调控内皮祖细胞系EPCsEphA1/SiRNA-Tet中EphA1/EphrinA1信号通路对其细胞生物学行为及活体内促肝细胞癌血管生成潜能的影响。方法:体内外用不同浓度强力霉素调控EPCsEphA1/SiRNA-Tet中EphA1基因的表达,分为调控组Dox(+)(培养液中分别含强力霉素1、10和100μg/mL)和非调控组Dox(-);用Western blot法检测对EphA1/EphrinA1信号通路的影响;CCK8法、细胞划痕实验及细胞侵袭实验检测对细胞增殖、运动及侵袭能力的影响;绘制肝癌裸鼠移植瘤生长曲线结合瘤体免疫组织化学染色分析调控EPCsEphA1/SiRNA-Tet中EphA1基因的表达对其促血管生成潜能的影响。结果:体外实验中用10μg/mL强力霉素能最大程度抑制EphA1/EphrinA1信号通路活性,EphA1及其配体EphrinA1蛋白表达分别为0.293±0.029、0.603±0.038,与Dox(-)组的0.943±0.041、0.960±0.062比,差异均有统计学意义(t=12.940,4.864;P<0.001,0.008)。细胞生物学行为分析显示调控EphA1基因表达对EPCsEphA1/SiRNA-Tet增殖能力并无影响;10μg/mL强力霉素调控时能最有效地抑制EPCsEphA1/SiRNA-Tet运动及侵袭能力,与Dox(-)组比差异均有统计学意义(t=4.435,2.467;P=0.002,0.039)。体外100μg/mL强力霉素可最大程度诱导活体内EPCsEphA1/SiRNA-Tet中EphA1基因表达下调,在第6周移植瘤体积为(543.8±24.6)mm3,比Dox(-)组体积(924.5±81.8)mm3明显减少(t=4.909,P=0.001)。免疫组织化学染色显示100μg/mL强力霉素调控组微血管为(21.6±3.6)个,明显少于Dox(-)组的(37.0±4.1)个(t=2.823,P=0.024)。结论:不同浓度强力霉素可在体内外精确调控内皮祖细胞中EphA1/EphrinA1信号轴的活性,进而达到调控内皮祖细胞促肝癌血管生成潜能的目的。
- 俞海涛郭鹏毅谢孝宰陈钢
- 关键词：肝细胞癌内皮祖细胞血管生成
- EphrinA1在肝细胞癌患者内皮祖细胞中的表达及其临床意义被引量：1
- 2011年
- 目的了解肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）患者外周血中手术前后内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）的数量及其内包含的EphrinA1 mRNA的表达变化情况和临床意义。方法应用流式细胞术（FCM）检测手术前组、手术后组和健康对照组外周血中EPCs的含量，同时分离培养三组研究对象外周血中的EPCs，用RT—PCR检测EPCs上EphrinAl的表达情况，进行统计学分析。结果肝癌患者手术前组外周血中EPCs的数量明显高于手术后组和健康对照组（P〈0．05），EphrinA1在肝癌患者手术前组外周血EPCs中存在表达，明显高于手术后组和健康埘照组（P〈0．05），而在手术后组和健康组问差异无统计学意义。结论肝癌患者外周血中的EPCs明显增加，同时其内的EphfinA1表达增高，提示EphrinA1可能在EPCs的增殖动员中起到重要作用．
- 朱智易继林陈钢李兴睿杨志芳沈文状杨筱嵬
- 关键词：内皮祖细胞肝细胞癌EPHRINA1
- 内皮祖细胞在肝细胞癌患者外周血中的生物学行为被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)患者外周血中的内皮祖细胞(endothelial progeni-tor cells,EPCs)的生物学行为,以了解其在HCC侵袭和转移中所起的作用。方法:以40例肝癌患者和28例健康对照组为研究对象,流式计量外周血CD133+/CD34+双阳性细胞。并同时分离培养EPCs,7天后通过MTT法检测其增殖能力,Transwell法检测细胞迁移能力(即侵袭能力),细胞体外小管形成实验检测细胞血管形成能力。结果:HCC患者外周血中EPCs增加,并且他们外周血中的EPCs的增殖能力、侵袭能力及体外血管生成能力均高于健康对照组(P<0.05)。结论:内皮祖细胞可能在肝癌的生长和侵袭过程中起到了重要作用。
- 朱智易继林陈钢李兴睿杨志芳沈文状杨筱嵬
- 关键词：内皮祖细胞肝细胞癌
- 野生型Parkin基因对肝癌细胞生长的影响
- 2010年
- 目的 探讨野生型及突变型Parkin基因表达对人肝癌细胞株Huh-7在体内外生长情况的影响.方法 利用脂质体介导的基因转染法将野生型及突变型Parkin基因真核表达载体转染肝癌细胞株Huh-7,筛选稳定表达细胞株,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）进行鉴定并送测序分析.细胞增殖实验和裸鼠致瘤性实验检测各稳定表达株的体内外生长情况.结果 成功建立了稳定表达野生型和突变型Parkin基因的Huh-7细胞株.以转染空载体的Huh-7细胞作为对照,野生型Parkin基因的表达可明显抑制肝癌细胞在体外的生长（t=3.875,P=0.031）,可显著减缓裸鼠皮下瘤的生长速度并减小其体积（t=8.228,P=0.003）.突变型Parkin基因的表达对肝癌细胞的生长影响不大（P＞0.05）.结论 野生型Parkin的重表达有助于肝癌细胞恶性表型的逆转.野生型Parkin基因是一个肝癌相关的抑癌基因.
- 陈钢施红旗单云峰沈文状朱智刘顺芳
- 关键词：肝细胞PARKIN野生型基因转染
