海南省自然科学基金(809043)
- 作品数：8 被引量：35H指数：3
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- 相关机构：海南医学院附属医院苏州大学青岛大学医学院附属医院更多>>
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- Slug在胰腺癌中的表达及干扰Slug对胰腺癌转移的影响被引量：3
- 2011年
- 目的 探讨Slug和E-CADHERIN（E-cadherin）表达与胰腺癌转移的关系以及干扰Slug转录因子对胰腺癌转移的影响.方法 采用免疫组化和RT-PCR技术分别检测36例胰腺癌组织中Slug、E-cadherin和mRNA表达.将肝脏高转移潜能的胰腺癌细胞株SW1990H4,分为3组：对照组、空载体质粒（shRNA-1）和转染干扰S1ug质粒（Slug-shRNA-1）,观察Slug对E-cadherin mRNA表达的逆转作用,及对SW1990H4体外侵袭、运动的抑制作用.结果 胰腺癌组织中Slug高表达,而E-cadherin低表达.转移组胰腺癌组织中Slug蛋白和mRNA表达明显高于非转移组,差异分别有统计学意义（P＜0.05）,而E-cadherin在转移组胰腺癌中无表达.PCR产物凝胶电泳结果显示,Slug mRNA在空白对照组SW1990H4中表达为0.985±0.016,E-cadherin mRNA表达为0.120±0.001.shRNA-1时转染48 h时,Slug mRNA的表达水平为0.973±0.014,E-cadherin mRNA表达水平分别0.160±0.001,与对照组比差异分别无统计学意义（P＞0.05）.转染Slug-shRNA-1组瞬时转染48 h时,Slug mRNA的表达水平为0.554±0.011,E-cadherin mRNA表达水平为0.36±0.002,与对照组和shRNA-1组比差异分别有统计学意义（P＜0.05）.SW1990H4稳定转染后,shRNA-1和Slug-shRNA-1组Slug mRNA表达水平分别为0.968±0.015,0.206±0.017,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,而E-cadherin mRNA表达水平分别为0.18±0.002,0.727±0.006,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.体外细胞运动实验表明,对照组、转染shRNA-1和SlugshRNA-1组跨膜细胞数393±28、352±24、96±13,差异有统计学意义（P＜0.01）.重组细胞基底膜（Matrige1）侵袭实验显示,3组穿透基底膜细胞数分别为223±69、202±64、65±19,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 Slug高表达,E-cadherin低表达与胰腺癌的转移相关.胰腺癌细胞中存在Slug mRNA与E-cadherin mRNA表达的逆转关系,抑制Slug mRNA的表达对胰腺癌细胞的侵袭和运动有抑制作用,可能为胰腺癌转移的�
- 张克君余壮明王正文孙传东李德春张炳远卢云赵伟
- 关键词：胰腺肿瘤钙黏着糖蛋白类转染肿瘤转移
- RNA干扰Slug基因表达抑制胰腺癌侵袭转移的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨RNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移的抑制作用。方法用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入PANC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。观察siRNA-Slug对Slug表达的沉默及对胰腺癌细胞体外侵袭转移的抑制作用,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测不同处理组细胞中Slug mRNA的表达水平,Western-blot测定蛋白表达水平。建立不同组裸鼠原位胰腺癌模型,观察Slug沉默对裸鼠原位胰腺癌转移的抑制作用。结果pSlug-siRNA组细胞内Slug mRNA及Slug蛋白的表达被有效沉默。重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pSlug-siRNA组、空白对照组、pNeg-siRNA组穿透基底膜细胞数分别为(35±10)、(228±71)、(219±72)个/高倍镜(×200),pSlug-siRNA组明显低于空白对照组和pNeg-siRNA组,差异分别有统计学意义(P<0.05)。裸鼠体内实验表明,pSlug-siRNA组的肿瘤转移结节、肝脏转移结节、腹水明显减少。结论RNA干扰Slug基因表达对胰腺癌细胞侵袭转移有抑制作用,Slug可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点。
- 柳湘洁宋彩霞张群声王启全
- 关键词：胰腺肿瘤SLUGRNA干扰转染肿瘤转移
- p53、Bcl-2、Bax、Bcl-xL和Bcl-xS蛋白在胰腺癌中的表达被引量：7
- 2010年
- 目的探讨胰腺癌组织中p53和Bcl-2家族(Bcl-2、Bax、Bcl-xL、Bcl-xS)蛋白的表达及其与细胞凋亡的关系。方法免疫组化法检测35例胰腺癌组织中p53蛋白表达,分为p53阴性表达组(18例)和p53阳性表达组(17例);Westernblot法检测胰腺癌组织中p53、Bcl-2、Bax、Bcl-xL和Bcl-xS蛋白表达;TUNEL法检测35例胰腺癌组织中凋亡指数(AI)。结果Bcl-2蛋白在p53阳性表达组上调,而在p53阴性表达组下调(P=0.047);Bax和Bcl-xL蛋白在p53不同表达两组中都明显上调(P=0.274,P=0.334);Bcl-xS在p53阳性表达组明显下调,在p53阴性表达组明显上调(P=0.01);在p53不同表达两组中,AI分别为12.1±2.47和9.1±1.48(P=0.023);上述Bcl-2家族各成员表达与AI无相关性(P>0.05),而p53不同表达Bcl-2/Bax比值与AI有明显的相关性(P<0.01)。结论Bcl-2是依赖p53调节的抗凋亡蛋白,Bcl-xS是依赖p53调节的促凋亡蛋白,而p53主要通过调节Bcl-2/Bax比值发挥凋亡调节作用。
- 沈仕兴张克君
- 关键词：胰腺癌P53BCL-XS
- 早期干预双胎试管婴儿防治脑瘫疗效观察被引量：2
- 2010年
- 目的研究早期干预高危出生试管婴儿防治脑瘫的有效康复措施。方法通过对2007年1月-2009年1月我院收治经抢救存活的试管儿双胎88例高危出生儿，自出生后新生儿期起病情稳定后，经对新生儿NBNA评分不足37分、Vojta七种姿势反射判断存在中枢性协调障碍（ZKS）、及0～1岁定期检查发现神经运动系统发现异常者开始新生儿抚触、高压氧及营养脑细胞药等早期干预康复方法，并根据神经运动系统有异常者作相应的康复运动训练疗法．结合家庭早期干预健康教育指导进行家庭康复训练。结果经评估神经发育均有异常的88例高危双胎试管婴儿。经早期干预后97．7％恢复正常发育，脑瘫发生率为2．3％。结论及时有效地早期干预措施可以降低试管婴儿脑瘫发生率，且试管婴儿较自然受孕的早产儿脑瘫防治疗效无明显差别。
- 王红怡
- 关键词：试管婴儿双胎VOJTA姿势反射早期干预
- 不同学历新护士评判性思维能力的培养被引量：13
- 2011年
- 目的探讨培养不同学历新护士评判性思维能力的方法,为培养新护士评判性思维能力寻找教育策略,为护理教育提供参考依据。方法首先用"评判性思维能力量表"调查174名不同学历新护士的评判性思维得分。然后将174名新护士按学历分层后随机分为实验组和对照组。观察培训时间为24个月,每8个月为一个培训阶段,分别轮转内科、外科和门诊等临床科室。在第一阶段2组均进行常规培训,第二、三阶段中实验组学员除进行常规培训外分别给予了特殊培训课程和反思日记书写训练,对照组则进行常规培训。在研究期初、期中、期末采用"评判性思维能力量表"进行测评。结果除高职学历护士外,其他学历护士的评判性思维总分均达到280分;评判性思维总分及7个特质的得分按照高职、中专、大专、本科顺序增加。实验组期初与期末比较结果显示,"评判性思维能力量表"总分和7个维度均有显著性增长;对照组初期与期末比较,只有"求知欲"项有显著性差异(p<0.05),其余各维度及总分无显著性差异(均p>0.05)。结论教育可以促进护士的评判性思维能力;有目的的评判性思维培训课程和反思日记法训练,有助于提高新护士的评判性思维能力,评判性思维能力不会在临床环境中自然增强,必须重视对新护士评判性思维能力的专门训练。
- 沈丽刘志娟李林超王春婷宋彩霞
- 关键词：新护士评判性思维问卷调查
- 海南省院前急救护士多元文化护理认知状况调查被引量：7
- 2011年
- 目的了解海南省院前急救护士多元文化护理的认知水平及相关因素,为院前急救护士多元文化护理培训课程的设置提供依据及管理建议。方法自行设计急诊护士多元文化护理认知状况调查问卷,对海南省6家综合性医院院前急救的96名护士在同一时间内进行调查。结果院前急救护士多元文化护理认知总体得分为(126.56±18.73)分,其中知识理论维度认知得分最低[(31.24±5.12)分];中专及大专护士的总体认知水平及其知识理论维度显著低于本科护士(P<0.01、P<0.05),护士的文化程度、每日学习时间与总体认知水平之间呈正相关(P<0.05、P<0.01)。结论海南省院前急救护士多元文化护理知识的认知水平有待提高,必须加强培训及管理。
- 莫冬绵刘世琴郭小泉张晓溪魏红晓林静
- 关键词：急救医疗服务数据收集多元文化护理
- 半边旗中二萜类化合物5F诱导胰腺癌细胞凋亡机制的探讨
- 2009年
- 目的:观察研究半边旗中二萜类化合物5F(1la-羟基-15-氧-16-烯-ent贝壳杉烷-19酸)诱导人胰腺癌细胞株AsPC-1凋亡的效果及其机制。方法:用脂质体转染法将PUMA/siRNA导入AsPC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。将转染载体的AsPC-1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC-1细胞分别暴露于浓度为8.875μmol·L^(-1)、37.5μmol·L^(-1)、142μmol·L^(-1)的5F中作用72h。RT-PCR检测不同组细胞经5F作用24h后的PUMA表达;MTT检测细胞生长抑制,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,Hoechst33258和PI双染色染色了解细胞凋亡的变化。结果:5F促进AsPC-1细胞凋亡,抑制细胞生长,并有明显的剂量依赖性,在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上调;当PUMA表达抑制后,受5F作用的细胞出现PUMA表达的降低,同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞的明显增殖。结论:5F促进体外AsPC-1细胞凋亡,并抑制其生长,其诱导凋亡与上调PUMA有关。
- 沈仕兴张科郡刘群声谷水基许海博
- 关键词：胰腺癌二萜类PUMA基因转染凋亡
- Slug基因表达抑制对体外胰腺癌细胞生物行为的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨siRNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移、血管生成和生长的影响。方法用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入AS-PC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。采用RT-PCR技术检测不同处理组细胞中Slug mRNA表达水平,Western-blot测定Slug蛋白表达水平。观察Slug沉默后及对体外胰腺癌细胞侵袭作用的影响;鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验及CAM移植瘤实验检测Slug沉默对血管生成的影响,MTT比色法检测细胞存活率。结果pSlug-siRNA组细胞内Slug表达被有效沉默。重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pSlug-siRNA组、对照组、pNeg-siRNA组穿透基底膜细胞数分别为(38±6.56)、(164±15.39)、(159.67±8.96)个/高倍镜(×200),差异分别有统计学意义(P<0.05)。体外实验表明,AsPC-1细胞内Slug表达沉默后,血管密度明显降低,血管生成被抑制,细胞存活率明显降低。结论RNA干扰Slug基因抑制胰腺癌细胞生长、侵袭转移和血管生成,Slug可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点。
- 陈彦福宋彩霞王全欧树安严明总
- 关键词：胰腺癌SLUG血管生成
