上海交通大学医学院医学遗传研究所
- 作品数：71 被引量：195H指数：7
- 相关作者：朱怡文贾春平周大文欧海龙陈海漩更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学历史地理更多>>
- 可用于基因表达研究的转基因小鼠乳腺上皮细胞模型的构建被引量：1
- 2012年
- 目的建立转基因小鼠乳腺上皮细胞模型,为研究乳腺内环境因素调控外源基因的表达和制备高效表达外源基因的乳腺生物反应器提供研究平台。方法通过机械破碎和胶原酶消化的方法获取人转铁蛋白(hTF)转基因小鼠的乳腺上皮细胞,并进行体外原代培养。经胰蛋白酶纯化后,绘制乳腺上皮细胞生长曲线;免疫组织化学方法检测角蛋白18的表达;透射电子显微镜(透射电镜)观察乳腺上皮细胞超微结构;流式细胞仪检测细胞周期分布;显微镜下分析乳腺上皮细胞核型。将牛催乳素真核表达载体(pCMV-bPRL)转染至转基因乳腺上皮细胞中,检测外源bPRL的表达。结果乳腺上皮细胞生长曲线呈"S"形;免疫荧光组织化学分析结果显示hTF转基因小鼠乳腺上皮细胞角蛋白18呈阳性表达;透射电镜观察发现乳腺上皮细胞胞核较大、偏位,有双核或多核,胞质丰富,空泡、粗面内质网、高尔基体丰富;流式细胞仪检测结果显示:乳腺上皮细胞增殖活跃,G2/M期+S期细胞占15%;细胞核型分析结果显示处于分裂期的细胞具有正常的二倍体,染色体完整。pCMV-bPRL转染乳腺上皮细胞24 h后,上清液中检测到bPRL的表达。结论体外培养的转基因乳腺上皮细胞具有类似体内细胞的生物学特征,并可表达真核表达载体,为研究环境因素对乳腺功能的影响及制备乳腺生物反应器提供了一种细胞模型。
- 蒋世忠闫亚彬谢飞王娟黄英任兆瑞
- 关键词：转基因小鼠乳腺上皮细胞真核表达载体
- 多重连接探针扩增技术及其应用被引量：15
- 2009年
- 多重连接探针扩增是一种建立在PCR技术上的新型相对定量检测技术，该技术具有高效率、高分辨率、操作简便、设备要求低等诸多优势，目前已被广泛应用于基因片段缺失与重复、点突变及甲基化检测等相关疾病的分子生物学研究。其与基因芯片结合而建立的多重连接探针扩增微阵列芯片技术不但真正具备了高通量的检测能力，还使该技术的可靠性获得了很大的提高。本文就多重连接探针扩增的技术方法、应用进展及目前还存在的局限性作一综述。
- 周大文任兆瑞
- 关键词：毛细管电泳芯片
- 红系特异的GFP基因在转基因小鼠中的整合和表达被引量：6
- 2004年
- 应用荧光定量PCR技术对由位点控制区LCR的HS2元件和 β 珠蛋白基因启动子指导的红系特异表达绿色荧光蛋白 (GFP)基因的转基因小鼠中外源基因拷贝数进行测定 ,使用荧光显微镜和流式细胞仪检测小鼠外周血中GFP的表达水平 ,并运用荧光原位杂交技术 (FISH)确定了其中两只转基因小鼠中外源基因的整合位点 ,结果表明 :在转基因小鼠中外源基因的拷贝数各不相同且相差较大 ,而且拷贝数与GFP基因的表达量之间未呈现出相关性 ;FISH分析确定出两只转基因小鼠的外源基因整合于不同的染色体上 ;
- 颜景斌肖艳萍陈美珏黄淑帧曾溢滔
- 关键词：荧光原位杂交转基因小鼠拷贝数外源基因
- 人凝血因子IX突变型研究现状被引量：5
- 2005年
- 血友病B是一种性连锁隐性遗传病,其发病机制是位于X染色体上的人凝血因子IX(hFIX)基因发生了突变,导致血浆中hFIX含量或活性大幅下降,从而使得内源性凝血途径受到阻碍,无法进行正常的凝血。文章综述了hFIX基因及其编码蛋白质的结构和功能,并分类详细论述了血友病B中发现的几种主要突变类型。其中包括奠基者效应造成的突变、调控区的突变、编码区的突变、内含子剪切位点的突变及另外两种较为特殊的突变,同时介绍了这些突变所造成的生物学效应。最后还简要介绍了一种能提高hFIX蛋白凝血活性的突变类型(第338位Arg→Ala),并对其应用作了展望。
- 颜景斌
- 关键词：血友病B突变凝血活性
- 卵母细胞体外成熟与体细胞核移植被引量：2
- 2006年
- 赵磊文
- 关键词：卵母细胞体外成熟体细胞核移植早期发育原生殖细胞编程过程
- 中国遗传学的春天——纪念中国遗传学会成立40周年被引量：2
- 2019年
- 中国遗传学会是1978年10月在南京成立的,40年后的今天我们又回到南京举行中国遗传学会第十次全国会员代表大会,回顾历史,缅怀先辈的丰功伟绩。值此机会,想谈谈中国遗传学。要谈论遗传学,还得从经典遗传学说起,如同经典力学有牛顿三大定律一样,经典遗传学也有三大定律,即分离定律、自由组合定律和连锁互换定律[1]。
- 曾凡一曾溢滔
- 关键词：经典遗传学
- 供体细胞-受体细胞线粒体DNA相容性对牛异亚种体细胞核移植效率的影响
- 体细胞核移植或称克隆技术已经广泛应用于生物医药的各个领域。在通常情况下,克隆是采用来源于同一物种或亚种的供体细胞与受体卵母细胞进行的,以不同物种或同一物种内不同亚种间来源的供体细胞和卵母细胞所进行的异种或异亚种克隆效率依...
- 颜昊严忠海马晴雯焦飞黄淑帧曾凡一曾溢滔
- MicroRNA对基因表达调控的研究进展被引量：3
- 2007年
- MicroRNA（miRNA）是一类长约21～25nt的内源性单链小分子RNA（small RNA），可调节与其序列互补mRNA的表达，普遍存在于高等生物界，在不同物种间具有高度的保守性，表达具有细胞特异性或组织特异性。通过与mRNAs特异性的碱基配对，引导靶序列进入降解或（和）翻译抑制，以此参与个体发育、细胞分化、细胞增殖、物种进化以及疾病发生过程中的基因表达调控。该文简述了近年对miRNA的形成、功能、作用机制等研究的新进展，并对其在基因沉默中的作用作了重点概述。
- 严忠海龙健儿
- 关键词：MIRNA基因调控基因沉默
- 多发畸形患儿t（3;12;15）复杂易位核型分析一例
- 2010年
- 染色体畸变是导致自然流产、死胎和畸形儿的重要病因之一[1].细胞遗传学检查发现,最常见的染色体结构变异包括缺失（deletion）、重复（duplication）、倒位（inversion）和易位（translocation）.本研究报道1例多发畸形患儿复杂易位核型分析.
- 管翌华孙恒娟任兆瑞黄英
- 关键词：复杂易位畸形患儿核型分析多发细胞遗传学检查染色体畸变
- 转基因小鼠乳腺上皮细胞的体外培养及其对催乳素反应的研究被引量：4
- 2012年
- 实现转基因生物乳腺反应器对外源蛋白的高效表达是目前生物制药亟待解决的难题。催乳素对泌乳期乳蛋白的合成与分泌具有重要的调控功能。通过转基因小鼠乳腺上皮细胞模型的建立,研究催乳素如何调控乳蛋白的表达,为提高乳腺反应器高效表达外源蛋白提供技术及理论支撑。应用机械破碎及胶原酶消化法,经差速贴壁纯化,成功培养含人转铁蛋白基因的小鼠乳腺上皮细胞,细胞上清液中检测到人转铁蛋白表达。细胞经牛催乳素诱导后人转铁蛋白的表达水平明显升高。利用转基因小鼠乳腺上皮细胞模型,可以进行催乳素和环境因素等对乳腺上皮细胞合成及分泌蛋白能力影响的研究。
- 蒋世忠闫亚彬谢飞龚秀丽黄英吕宝忠
- 关键词：转基因小鼠乳腺上皮细胞催乳素转铁蛋白
