武汉大学珞珈学院生物技术系
- 作品数：41 被引量：115H指数：6
- 相关作者：杨锐曾永辉刘梅付文祥傅夏洲更多>>
- 相关机构：山西大学生命科学学院黄土高原研究所太原师范学院城市与旅游学院山西大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院寒区旱区环境与工程研究所知识创新工程项目武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生天文地球农业科学更多>>
- Effects of antisense glutamic aciddecarb0xylase oligodeoxynucleotide on epileptic rats induced by pentylenetetrazol被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨谷氨酸脱羧酶 (GAD)的抗癫痫作用。方法 采用戊四氮制备大鼠慢性癫痫模型 ,利用反义寡脱氧核苷酸技术 ,通过选择性地抑制海马GAD基因的表达来观察其对慢性癫痫大鼠行为、发作阈值及脑电图的影响 ;同时 ,采用高效液相色谱法检测其对海马组织内γ 氨基丁酸 (GABA)含量的影响。结果 给予AntisenseGAD67ODN处理后 ,GAD67mRNA表达下降、GABA浓度下降、痫性发作潜伏期缩短、发作程度加重及脑电图痫波频率增加。结论 从反面进一步说明GAD基因可能是抗痫基因 ,为GAD基因治疗癫痫提供实验依据。
- 何小华李文鑫王伟阮旭中张梁
- 关键词：谷氨酸脱羧酶寡脱氧核苷酸戊四氮
- 嗜热WF146蛋白酶基因的克隆、表达和分析
- 本实验室分离到一株能够产生胞外蛋白酶的嗜热芽孢杆菌WF146。我们利用专一简并杂合引物(consensus-degenerate hybrid oligonucleotide primers)PCR和热不平衡交替PCR(...
- 吴疆卞艳唐兵陈向东沈萍
- 文献传递
- 具有真细菌和真核生物融合特征的古生菌转录系统
- 2004年
- 古生菌是一类区别于真细菌和真核生物的第三域生命形式 ,转录是生物体遗传信息传递系统中的一个中心环节。近年来研究结果表明 ,古生菌的转录系统具有真细菌和真核生物的融合特征 :古生菌的基本转录装置包括RNA聚合酶、基本转录因子、启动子元件等与真核生物相似 ;而古生菌的转录调控机制却更加类似于真细菌 ,在古生菌中发现并鉴定了许多类似于真细菌的转录调控蛋白。
- 杨洋黄玉屏沈萍
- 关键词：古生菌真细菌真核生物转录
- 东亚钳蝎氯毒素BmKCT的表达和功能鉴定(英文)被引量：11
- 2005年
- 从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生物学功能 ,通过pGEX系统成功地表达了BmKCT ,并用GST亲和层析和凝胶过滤的方法获得了纯化的重组BmKCT毒素蛋白 (rBmKCT) .通过膜片钳实验 ,记录了rBmKCT对人脑星型胶质瘤细胞 (gliomascell)表面的氯离子通道电流的作用 .结果显示 ,BmKCT可以显著抑制人脑星型胶质瘤细胞表面的氯离子通道电流 ,并且这种抑制作用在一定程度上是可逆的 .实验证明 ,在细胞水平上 ,BmKCT是一种新的短链氯离子通道抑制剂 .
- 杨锐彭方刘辉曹志贱李文鑫毛歆蒋达和
- 关键词：胶质瘤细胞氯离子通道膜片钳GST东亚钳蝎毒腺
- 细胞凋亡与自身免疫病被引量：5
- 2005年
- 细胞凋亡在维持淋巴细胞稳态及自身耐受中起重要作用。细胞凋亡受多种基因控制与调节,主要可通过外源性和内源性两条通路来触发。而凋亡功能的失常可诱发自身免疫病,如自身免疫淋巴增生综合症、Hashimoto甲状腺炎、Graves病、胰岛素依赖性糖尿病、多发性硬化等。另外凋亡细胞清除缺陷也会诱发自身免疫病。
- 付文祥
- 关键词：细胞凋亡自身免疫病
- 蝎毒素与钾通道相互作用的多样性研究
- ＜正＞蝎毒素是一类能特异性作用钾离子通道的多肽抑制剂,它在钾离子通道的结构与功能关系研究中发挥着重要的作用。目前,虽然越来越多蝎毒素和钾离子通道得到分离和鉴定,但是在空间结构水平上,对蝎毒素与钾通道相互作用分子机制的认识...
- 吴英亮易虹李文鑫
- 文献传递
- 以白色念珠菌为模型高通量筛选潜在抗真菌药物被引量：5
- 2004年
- 目的通过高通量药物筛选来寻找有活性的广谱性抗真菌药物,专一性抗白色念珠菌药物以及特异性抑制含核酶的白色念珠菌生长的药物。方法以两株基因型不同的白色念珠菌菌株(一株含I型内含子核酶,一株不含核酶)和一株非病原真菌啤酒酵母(不含I型内含子核酶)为细胞模型,3种菌株依次以96孔板为容器,在起始菌液浓度的A580nm为01时分别加入10720种药物样品(包含化合物与天然产物),在30℃静止培养6h,选取抑菌效率超过50%的样品进行复筛。结果通过初筛和复筛,发现了23种药物在10μg·mL-1的浓度时的抑菌效率超过50%,其中1种药物特异性抑制含核酶的白色念珠菌生长,是潜在的抗核酶药物;4种药物特异抑制白色念珠菌的生长,是潜在的抗白色念珠菌药物;18种药物抑制所有模式菌株的生长,是潜在的广谱性抗真菌药物。结论本研究在国内首次采用自动化工作站进行抗真菌药物的高通量药物筛选,方法简便快捷,筛选结果稳定可靠,并筛选到一些有希望向临床发展的抗真菌药物活性样品。此方法有可能应用于抗其他病原微生物的药物筛选。
- 蒋笑艳杜冠华张翼
- 关键词：高通量筛选抗真菌药物白色念珠菌啤酒酵母
- 嗜热WF146蛋白酶热稳定机制研究
- 嗜热脂肪芽孢杆菌WF146产胞外丝氨酸蛋白酶WF146,成熟酶分子量为34kD, 最适反应温度为85℃。在10mMCaCl2情况下,在60℃保温6小时稳定性不变,80℃半衰期为30min。嗜热蛋白酶WF146与嗜冷蛋白酶...
- 卞艳方楠杨怡然唐晓峰唐兵沈萍
- 文献传递
- 枯草芽孢杆菌抗脯氨酸结构类似物突变株的筛选及突变株proBA基因的克隆和序列分析被引量：4
- 2002年
- 利用亚硝基胍对枯草芽孢杆菌 9315 1进行诱变处理 ,获得了耐NaCl浓度达 14 %的突变株 ,同时发现该突变株也是一个抗脯氨酸反馈抑制突变菌株。其胞内自由脯氨酸的含量随着盐浓度的提高显著增加 ,说明其对渗透压的耐受能力与胞内自由脯氨酸的含量紧密相关。利用PCR方法克隆突变株的proBA基因 ,得到一个约 2 3kb的DNA片段 ,序列分析表明该片段含有一完整的proB基因和部分proA基因。与野生菌株的proB基因相比 ,突变株proB基因中有3个碱基发生了改变 ,其中一个碱基的变化 (从起始密码子开始第 781位由T→A)导致了一个氨基酸发生改变 (Ser→Thr) ,另外两个碱基变化为沉默位点突变。将该proB基因转入大肠杆菌脯氨酸营养缺陷型菌株 ,能够与其功能互补。同时对部分proA基因序列分析发现 ,其与proB基因头尾重叠 ,在proA基因起始密码子上游第 14个碱基处有一个类似于SD的序列 ,其所编码的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌 16 8的同源性为 77%
- 苗丽霞曹军卫刘瑞杰王友亮曾永辉
- 关键词：枯草芽孢杆菌克隆
- 一个新的东亚钳蝎毒素(BmKT_1)全长cDNA的克隆和分析被引量：7
- 2000年
- 首先构建了东亚钳蝎毒腺组织 c DNA文库 ;根据已知的东亚钳蝎哺乳动物毒素氨基酸序列保守区设计引物 ,并用 PCR从 c DNA文库中扩增出一个 c DNA片段作为筛选 c DNA文库的探针 ;从 c DNA文库中筛选到二个编码同一个新的蝎毒素多肽的 c DNA,它们除 3′- UTR外 ,其余序列完全一致 .它们均含有 2 55bp长的开放阅读框 ,编码 85肽的前体毒素 ,包括 1 9个氨基酸残基的信号肽 ,66个残基的成熟毒素 (命名为 Bm KT1) ;Bm KT1氨基酸序列与已知的蝎毒素具有较大的同源性 ,与 Bm KM1,Lqq ,Lqhα IT和 Bm K M10 的同源性分别为 77%、67%、67%和 65% .Bm KT1的 C端不存在末端修饰步骤且具有一个与这些毒素不相同的特征结构 ,即在末端延伸了两个氨基酸残基 - P- S,推测 Bm KT1具有新的活性功能特征 .
- 曾宪春李文鑫朱智慧朱顺义彭方毛歆
- 关键词：药物设计CDNA文库克隆
