南京农业大学动物科技学院江苏省家畜胚胎工程实验室
- 作品数：11 被引量：14H指数：2
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- 相关领域：农业科学文化科学生物学更多>>
- 农业院校畜牧兽医类课程群建设探析——以动物繁殖学为例
- 2016年
- 课程群建设对优化知识体系、提升教学质量和人才培养质量意义重大。动物繁殖学是畜牧兽医类专业的骨干基础课之一,具有内容丰富、知识更新快、实践性强的特点。为满足现代畜牧业生产对畜牧兽医类专业人才培养及学生多元化发展("应用型""创新型""创业型"等)的新要求,南京农业大学动物繁殖教研室针对课程特点并依据多样性、协调性、科学性、实践性等原则构建了包括6门课程的动物繁殖学课程群,取得了良好的教学效果。
- 王子玉肖慎华王锋
- 关键词：课程群课程体系
- 案例教学在动物科学专业基础课中的应用探究——以动物繁殖学为例被引量：5
- 2021年
- 动物繁殖学是动物科学专业必修的专业基础课程之一,教学中对学生的实践能力和创新能力培养要求较高,南京农业大学动物科技学院动物繁殖教研组探索出"案例研习+模拟实训+规范化学习"三位一体的案例教学法,对案例教学法在动物繁殖学教学中的应用及成效进行初步探究,为案例教学在动物科学专业基础课教学中的推广应用提供参考。
- 王子玉杭苏琴李东旭王锋
- 关键词：动物繁殖学实践教学创新教育
- AMPK激活剂在绵羊精液冷冻保存中的作用研究被引量：2
- 2020年
- 旨在研究AMPK激活剂二甲双胍(metformin,Met)和阿卡地新(acadesine,AICAR)对绵羊精液冷冻保存效果的影响。本研究首先在冷冻基础稀释液中分别添加不同浓度(0、100、200、300、400、500μmol·L-1)的Met和AICAR,冷冻解冻后根据精子活力、运动性能和结构完整性指标筛选出最佳的添加浓度(400μmol·L-1 Met、200μmol·L-1 AICAR);然后分别使用不同的冷冻稀释液(对照组:稀释液;Met组:含400μmol·L-1 Met的稀释液;AICAR组:含200μmol·L-1 AICAR的稀释液)冷冻精液,解冻后检测精子中AMPK蛋白表达、顶体酶活性、代谢指标、线粒体功能以及抗氧化酶活性。结果表明,稀释液中添加400μmol·L-1 Met和200μmol·L-1 AICAR均可显著提高解冻后精子活力、运动性能及精子结构完整性(P<0.05),其中400μmol·L-1 Met组精子总活力达43.20%,顶体完整率为91%,质膜完整率为46%。与对照组相比,Met组和AICAR组解冻后精子中AMPK磷酸化水平显著升高(P<0.05);顶体酶活性显著提高(P<0.05);丙酮酸水平显著下降(P<0.05),乳酸脱氢酶活性、乳酸以及ATP含量均显著升高(P<0.05);与对照组相比,Met和AICAR组稀释液更有利于维持线粒体膜电位(P<0.05),提高ATP酶(P<0.05)以及抗氧化酶的活性(P<0.05)。添加适当浓度的AMPK激活剂可以提高绵羊精液冷冻保存的效果。
- 汪棋汪长建魏宗友陆汉希姚晓磊杨花王锋张艳丽
- 关键词：绵羊精液冷冻保存精液品质
- Hippo信号通路核心蛋白在湖羊输卵管和子宫中的表达定位研究
- 引言Hippo通路在维持内环境稳态,参与调节细胞周期和凋亡等方面具有重要的作用。在各种组织和器官中对Hippo信号通路调控功能的研究已有报道,如肝脏、心脏等,但涉及Hippo信号通路在雌性生殖系统中的研究报道较少。本试验...
- 张婷婷张国敏冯旭李奉哲王锋
- 性成熟前后湖羊睾丸lncRNA差异表达谱分析及关键lncRNA筛选
- 引言近年来,长链非编码RNA (lncRNA)成为精子发生过程相关调控因子的研究焦点,在人和小鼠睾丸发育及精子生成等过程起着重要的调控作用。然而在家畜睾丸发育和精子发生过程中的发现鉴定及其生物学功能研究鲜见报道。本试验旨...
- 杨花王锋李奉哲任才芳庞静万永杰王子玉冯旭张艳丽
- 山羊生殖细胞特异报告载体pVASA-EGFP的构建及表达被引量：1
- 2015年
- 为监测成体干细胞向生殖细胞分化的过程,分析生殖细胞特异性DEAD-box家族ATP依赖RNA解旋酶vasa在不同日龄山羊睾丸组织中的表达情况并构建山羊生殖细胞特异性报告载体p VASA-EGFP。通过免疫荧光及RT-PCR法监测vasa的表达情况,利用分子技术构建报告载体p VASA-EGFP,脂质体法转染山羊骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs),经过视黄酸(Retinoic acid,RA)诱导后,观察绿色荧光蛋白表达情况以鉴定该报告载体的有效性。免疫荧光结果显示,Vasa在性成熟不同阶段的山羊睾丸组织中均有表达,RT-PCR结果表明vasa基因在3月龄、10月龄山羊睾丸组织中显著高于10日龄组。测序及酶切鉴定结果表明,扩增的vasa基因启动子片段成功连至N1载体,转染BMSCs后经4 d的RA诱导,发现有绿色荧光蛋白表达,表明成功构建了山羊vasa基因启动子调控的报告载体p VASA-EGFP。以上结果表明,vasa基因在不同日龄山羊睾丸组织中均有表达,所构建的山羊生殖细胞特异性报告载体p VASA-EGFP具有示踪山羊成体干细胞向生殖细胞分化过程的能力,为下一步监测山羊BMSCs向生殖细胞分化的过程提供了鉴定和筛选方法。
- 颜光耀李佩真任才芳王锋张艳丽
- 关键词：视黄酸山羊
- 过表达Kdm4d对山羊孤雌胚胎基因组激活期Xist表达的影响
- 2022年
- [目的]本试验旨在探究过表达赖氨酸特异去甲基化酶4D(Kdm4d)对山羊孤雌胚胎基因组激活期(8细胞期)Xist表达的影响。[方法]通过构建Kdm4d-IRES-EGFP重组质粒,体外转录Kdm4d mRNA,再利用显微注射、免疫荧光和亚硫酸氢盐测序等方法,分析过表达Kdm4d对山羊孤雌胚胎基因组激活期(8细胞期)Xist表达的影响。[结果]与对照组相比,组蛋白H3K9甲基化(H3K9me3)水平在2~8细胞期和囊胚期过表达Kdm4d的山羊孤雌胚胎中均显著降低,过表达Kdm4d山羊的4、8细胞期胚胎和囊胚的发育潜能无显著变化;Xist表达水平在过表达Kdm4d的山羊8细胞期孤雌胚胎中显著升高,但Xist启动子仍维持高甲基化,与对照组相比无显著变化。[结论]Kdm4d能有效移除孤雌胚胎中H3K9me3修饰,促进Xist表达,但不影响Xist启动子DNA甲基化水平和山羊孤雌胚胎发育潜能。本研究为深入理解Kdm4d调控山羊早期胚胎X染色体失活的机制奠定了基础。
- 杨瑛楠蔡玉刘孜斐李东旭万永杰王锋邓明田
- 关键词：XIST孤雌胚胎山羊
- 山羊睾丸支持细胞的培养与双荧光自噬报告载体的建立被引量：1
- 2018年
- [目的]本试验旨在建立一个实时追踪山羊细胞自噬发生状况的工具,以探讨细胞自噬对睾丸支持细胞(SC)和生殖细胞的影响。[方法]通过PCR法扩增mCherry-EGFP-LC3基因序列1 884 bp,将其导入真核表达载体pEX-3中,得到重组质粒pmCherry-EGFP-LC3;将pmCherry-EGFP-LC3及对照质粒p EX-3分别转染体外分离培养的山羊SC,饥饿处理12 h后用荧光显微镜观察融合蛋白在细胞中的表达,用RT-qPCR和Western blot检测细胞中自噬相关基因和蛋白表达变化,用透射电镜观察细胞自噬体的形成。[结果]成功构建了双荧光自噬报告载体,该载体能在山羊SC中表达,荧光显微镜下可见绿色荧光和红色荧光表达;饥饿处理后,该载体可以指示细胞中自噬泡的形成过程,且细胞自噬相关标记Beclin1 mRNA以及LC3Ⅱ/LC3ⅠmRNA比值和蛋白水平均显著上调,并能观察到初始自噬体的形成。[结论]获得的山羊SC可以作为后续试验的细胞模型;构建的双荧光pmCherry-EGFP-LC3自噬报告载体可为进一步研究山羊SC的自噬发生提供有效的工具。
- 韩乐张国敏杨花庞静万永杰姚晓磊王锋张艳丽
- 关键词：自噬睾丸支持细胞山羊
- 哺乳动物合子基因组激活调控的研究进展被引量：2
- 2020年
- 合子基因组激活(zygotic genome activation,ZGA)异常是哺乳动物早期胚胎发育阻滞的主要原因之一,其发生对早期胚胎发育和全能性的建立有着重要的意义。研究发现ZGA发生与DNA甲基化、组蛋白甲基化和非编码RNA等表观遗传及转录因子有关。笔者主要对以上因素调控哺乳动物ZGA的机制予以综述,为深入理解哺乳动物早期胚胎发育提供参考。
- 邓明田王锋
- 关键词：DNA甲基化组蛋白甲基化非编码RNA转录因子
- 高低繁湖羊卵巢全基因组差异甲基化位点的研究
- 引言排卵率和产羔数是高价值绵羊品种中极其重要的繁殖性状。近期的研究结果显示DNA甲基化通过影响基因转录水平进而影响雌性繁殖机能。然而,在雌性动物个体表现出的繁殖力差异与表观遗传学DNA甲基化方面的研究较少。因此,本研究利...
- 李奉哲冯旭王锋杨花朱翱翔庞静韩乐张婷婷张艳丽
- 文献传递
