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浅析医学院校实验技术人员综合素质培养与提高被引量：6: 2017年; 医学院校实验室队伍的建设、改革与发展,面临着诸多问题,而实验技术队伍的综合素质培养与提高是亟需解决的问题之一。由于历史原因,高校实验室队人员年龄偏高,学历偏低,创新能力不足,接受新知识新技术能力偏低等,造成实验室队伍建设的落后现状制约高校教学,科研和服务社会水平的发展。针对上述问题,对实验技术人员现状及实验技术人员综合素质的培养进行探讨。; 余春波范芳李长福陆红玲; 关键词：医学院校

血流切应力对血管内皮细胞PCP信号通路与初级纤毛发生的影响: 2019年; 目的研究不同血流切应力(fluid shear stress, FSS)对内皮细胞平面细胞极性通路(planar cell polarity, PCP)的调节作用,进一步探讨FSS、PCP信号通路以及纤毛发生之间的关系。方法建立可调控FSS的流体动力学细胞培养模型,qPCR以及免疫荧光检测不同FSS作用下PCP信号通路核心蛋白Dvl2及纤毛装配蛋白IFT88的mRNA表达与细胞定位以及两者的共定位,Western bolt (WB)检测不同FSS作用18 h时Dvl2蛋白表达。结果 qPCR结果显示,与1.5 Pa比较,Dvl2 mRNA的表达量在0.1 Pa FSS作用6 h和18 h时均升高(P<0.05)、12 h时显著升高(P<0.01);IFT88 mRNA表达量在0.1 Pa FSS作用18 h时显著升高(P<0.01)。WB结果显示,与0 h比较,Dvl2蛋白的表达在0.1 Pa FSS作用18 h时升高(P<0.05),在1.5 Pa FSS作用18 h时显著降低(P<0.05);与1.5 Pa FSS比较,Dvl2蛋白的表达在0.1 Pa FSS作用18 h时升高(P<0.05)。免疫荧光结果显示,Dvl2蛋白阳性表达随FSS作用时间的增加增多,且逐渐聚集于细胞核周边一点;IFT88蛋白阳性表达在0.1 Pa FSS作用下逐渐由细胞核向细胞质转移并聚集为一点,1.5 Pa FSS作用下逐渐减少且解聚;蛋白Dvl2、IFT88在0.1 Pa FSS作用下均定位于细胞的同一位置,在1.5 Pa FSS作用18 h内均定位于细胞的同一位置,18 h后由于蛋白IFT88发生解聚,未观察到共定位。结论层流FSS作用能够抑制PCP信号通路的转导并阻碍纤毛发生,低FSS促进其转导,且PCP信号通路可能通过Dvl2调控FSS诱导的初级纤毛发生。; 刘月华生燕欧刚卫生欣; 关键词：血管内皮细胞

医学院校药物制剂专业本科生物化学实验课教学体会被引量：1: 2013年; 实验教学是教学过程中的重要环节,为培养学生的综合实践能力和创新思维,教师应从思想上重视,保持细致认真的态度对待教学过程的每一环节,充分发挥学生的主体作用,培养学生的综合能力。; 生欣涂应琴李大玉陆红玲; 关键词：药物制剂专业生物化学实验教学体会

蓬乱蛋白2干扰和过表达慢病毒载体的构建及其在hUVECs中的表达被引量：1: 2019年; 目的获得蓬乱蛋白2(DVL2)基因干扰和过表达慢病毒表达系统,并在人脐静脉内皮细胞中(h UVECs)稳定表达。方法 (1)聚合酶链反应扩增目的基因,设计合成sh RNA,以慢病毒表达质粒为基础构建DVL2干扰和过表达载体,酶切电泳、实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和测序技术鉴定载体构建是否成功;(2)以3质粒系统在HEK293T细胞中包装病毒,通过荧光显微镜观察计数并计算病毒滴度;以嘌呤霉素筛选稳定转染的h UVECs,通过荧光显微镜观察计数获得转染效率。将感染好的细胞分为BC组(h UVECs空白对照)、NC组(HBLV-GFP-PURO阴性对照)、干扰组(pHB-shRNA-HDVL2)及过表达组(pHBLV-HDVL2)。(3)通过q RT-PCR与Western blotting检测分别从m RNA和蛋白表达水平验证目的基因的干扰和过表达水平。结果 (1)插入慢病毒表达载体的基因片段与目的基因的碱基序列完全一致。干扰序列峰形图为单峰,无突变。(2)病毒包装后,NC组、干扰组、过表达组滴度分别为2×108、2×108和1×108 TU/ml,感染人脐静脉内皮细胞的感染效率达98%。(3)干扰组DVL2的表达较BC组降低,差异有统计学意义(P <0.05),过表达组较BC组升高,差异有统计学意义(P <0.05),其中干扰效率为61%,蛋白质过表达水平为BC组的2.7倍。结论 DVL2基因干扰和过表达慢病毒载体构建成功,并能够在原代h UVECs中稳定表达。; 生欣王俊华刘月华郜双林谢夏丹范芳; 关键词：慢病毒载体过表达

利用转录组测序筛选低切应力作用下人脐静脉内皮细胞的差异表达基因: 2019年; 目的:通过转录组测序分析获得不同切应力作用下人脐静脉内皮细胞的基因的表达谱,为进一步探索切应力影响内皮细胞形态和功能的机制提供依据。方法:以人脐静脉内皮细胞为材料,通过Streamer系统建立6通道可调控切应力的流体动力学细胞模型,以层流切应力(15 dynes/cm^2)为对照,以低切应力(0.1 dynes/cm^2)为实验组,分别加载细胞18 h。提取总RNA逆转录合成cDNA,建立文库,以二代测序平台Illumina HiSeq中进行扩增和测序。结果:序列比对结果显示,有19986个基因比对上,新转录本分析显示各组新转录本数约占总转录本数的50%。基因表达差异分析显示,较对照组,低切应力组表达上调基因983个,表达下调基因701个。GO分析显示,有18499个基因得到了归类注释,绝大多数基因富集到生物学过程。KEGG分析显示,富集Top20的信号通路与细胞周期、DNA复制和细胞分裂、细胞应激和凋亡等生物学过程相关。结论:低切应力作用不仅仅激活内皮细胞中细胞的增殖相关基因,同时也涉及到DNA损伤修复和凋亡相关基因。; 生欣生燕谢夏丹王俊华郜双林; 关键词：人脐静脉内皮细胞切应力转录组测序

染料木素对人非小细胞肺癌细胞A549/DDP超微结构的影响被引量：2: 2015年; 目的探讨染料木素对人非小细胞肺癌A549/DDP细胞超微结构的影响。方法用60μg/m L和80μg/m L的染料木素分别作用A549/DDP细胞24、48、72 h后,应用透射电子显微镜观察A549/DDP细胞超微结构的改变。结果与对照组比较,A549/DDP细胞经染料木素作用后线粒体和内质网均发生不同程度的肿胀甚至空泡样变,并随着作用时间和作用浓度的增加,可观察到凋亡细胞和坏死细胞。结论染料木素可诱导A549/DDP细胞的超微结构发生改变,最终可能诱导其发生凋亡。; 杨龙陆红玲周正平张雨徐刚; 关键词：染料木素 A549/DDP细胞超微结构细胞凋亡

新闻资源在生物化学教学中的实践被引量：3: 2017年; 在信息化迅猛发展的时代,通过电视、报刊、电脑、手机等讯息媒体随时随地都可接触海量资讯。教师通过挖掘资讯中与生物化学知识相关的新闻资源,就能极大地丰富课程资源。将真实事件、热点讨论或科技前沿为主题的新闻资源融入课堂教学,可以促使学生从生物化学的角度去分析和解决问题,巩固理论知识,调动其学习积极性,使学习不止于课堂,将所学知识融于生活实例,彰显学习的现实意义。; 朱欣婷朱欣婷束波范芳刘云; 关键词：生物化学教学实践新闻资源

联合抗原修复法在免疫组化法检测家兔颈动脉粥样硬化陈旧性蜡块组织MMP-9及TIMP-1表达中的应用被引量：1: 2017年; 目的探讨联合抗原修复法对免疫组织化学(免疫组化)法检测家兔颈动脉粥样硬化陈旧性蜡块组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法对家兔颈动脉粥样硬化陈旧性蜡块组织连续切片198张,分别采用胰蛋白酶、加热、联合抗原修复法,检测MMP-9、TIMP-1的免疫组化染色效果。结果 0.1%胰蛋白酶(pH 7.6)37℃孵育20 min为胰蛋白酶抗原修复法的最佳条件,0.01 mol/L乙二胺四乙酸缓冲液(pH 8.0)进行微波抗原修复为加热抗原修复法的最佳条件,胰蛋白酶与微波联合进行的抗原修复法明显优于单用胰蛋白酶抗原修复法、加热抗原修复法,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论联合抗原修复法更适于免疫组化法检测家兔颈动脉粥样硬化陈旧性蜡块中MMP-9、TIMP-1的表达。; 江齐昌徐刚黄跃陆红玲; 关键词：基质金属蛋白酶-9 组织金属蛋白酶抑制物-1

不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌对人脐静脉内皮细胞产生血管细胞黏附分子1和细胞间黏附分子1的影响被引量：7: 2011年; 目的观察不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonasgin givalis，Pg）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）产生血管细胞黏附分子l（vasclllar celladhesion molecule-1，VCAM-1）和细胞间黏附分子l（intercellul aradhesion molecule．1，ICAM-1）的影响，探讨Pg在动脉粥样硬化发生、发展中的可能作用。方法实验分别以PgATCC33277（IfimA）、WCSPll5（IIr^nA）、W83（1VnmA）和大肠杆菌脂多糖刺激HUVEC作为T1、他、T3组（3个实验组）和阳性对照组，未受刺激的HUVEC作为阴性对照组；标准条件下厌氧培养上述3型Pg，将其以及大肠杆菌脂多糖分别与HUVEC共同孵育2、6、24h，采用流式细胞术检测HUVEC表面ICAM-l和VCAM-1的蛋白表达量，并通过激光共聚焦显微镜观察ICAM．1和VCAM-1的表达分布情况。结果I、Ⅱ、1VfimA型Pg刺激HUVEC后，细胞表面ICAM-1表达均增强（P〈0．05），2、6、24h表达量分别为IfimA：60．27±5．43、80．81±1．44、85．94±2．56；IIfimA：86．69±8．81、90．19±0．00、96．18±0．48，IVfimA：59．66±O．40、85．79±4．86、96．044-2．07。除2h时IfimA与IVfimA型如刺激的HUVEC表面ICAM-1表达量差异无统计学意义外，其他各时问点Ⅱ、IVfimA型Pg的刺激作用均强于IfimA型Pg（P〈0．05）。本研究条件下，I、Ⅱ、IVfimA型Pg刺激HUVEC后2、6、24h表达VCAM-1的水平均较低，各实验组与对照组间相比差异均无统计学意义（P〉0．05）。激光共聚焦显微镜观察显示，Pg刺激下HUVEC表达ICAM-1和VCAM-1增加，在Ⅱ、IVfimA型Pg刺激下，HUVEC中ICAM．1和VCAM-1荧光点相对较多且分布范围广。结论牙周主要致病菌Pg毒力和致病性与其fimA基因型相关，IIfimA和iVfimA型Pg有较强的上调HUVEC表达细胞黏附分子的能力，可能导致血管内皮功能紊乱。; 蔡树玉林玉祥肖莉何权敏葛颂钱民章; 关键词：紫单胞菌基因型血管细胞黏附分子1 细胞间黏附分子1

冰冻切片的制作被引量：1: 2017年; 临床手术及科学研究过程中的冰冻切片对临床病理诊断或科学研究观察均至关重要。要制作优良的冰冻切片,需要对取材、温度控制、切片、固定及染色等许多环节进行把控。该文结合工作实践对冰冻切片的制作进行经验总结。; 黄跃张睿吴德江陆红玲; 关键词：冰冻切片病理学标本

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