山西医科大学基础医学院药理学教研室
- 作品数：30 被引量：131H指数：5
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- METTL3介导的m6A修饰对ox-LDL诱导的巨噬细胞焦亡的影响
- 2023年
- 目的探究METTL3(methyltransferase like 3,METTL3)介导的m6A(N6甲基腺苷)修饰对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)焦亡的影响。方法ox-LDL(50μg/mL)诱导RAW264.7细胞24 h后,对METTL3进行敲低或过表达,检测培养细胞RNA m6A甲基化水平,荧光定量PCR和Western blot法检测METTL3和细胞焦亡相关基因NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平,乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测细胞死亡率,酶联免疫吸附法检测炎症细胞因子IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α和IL-10的含量。结果ox-LDL能够促进RAW264.7巨噬细胞METTL3的表达和RNA m6A甲基化水平,同时也能促进炎症因子IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α的分泌(P<0.05),降低IL-10(P<0.05)的表达。在ox-LDL诱导基础上,METTL3过表达后,RNA m6A甲基化水平升高,NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、Caspase-1表达显著增加,促炎细胞因子IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18水平升高,抗炎细胞因子IL-10水平降低,LDH释放增加,METTL3敲低后结果相反。结论METTL3介导的m6A修饰能够显著促进ox-LDL诱导的巨噬细胞焦亡和炎症反应。
- 张昕怡郭敏高慧刘宇
- 关键词：炎症反应
- YTHDF1异常表达对结直肠癌细胞增殖、迁移及CD4^(+)T、CD8^(+)T和Treg细胞浸润的影响
- 2022年
- 目的分析YTHDF1在结直肠癌中的表达及其对肿瘤细胞功能和CD4^(+)T、CD8^(+)T、Treg细胞浸润的影响。方法利用TCGA数据库和免疫组化法检测结直肠癌及癌旁组织中YTHDF1的表达;利用CCK-8、平板克隆实验和划痕愈合、Transwell实验分别检测敲减YTHDF1对细胞增殖、迁移能力的影响;应用ssGSEA评估YTHDF1表达与免疫细胞相对丰度的关系,并采用免疫组化法验证。结果TCGA数据库分析显示结直肠癌组织中YTHDF1 mRNA的表达水平高于正常组织,与患者年龄、临床分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05);结直肠癌组织中YTHDF1的免疫评分(7.0±2.1)高于癌旁组织(5.0±1.5)(P<0.01);敲减YTHDF1可抑制结直肠癌细胞的增殖和迁移能力(P<0.05);YTHDF1与CD4^(+)T细胞(r=-0.6104)、CD8^(+)T细胞(r=-0.5347)浸润水平呈负相关,与Treg细胞浸润水平呈正相关(r=0.4482)。结论YTHDF1能促进结直肠癌细胞增殖和迁移,与CD4^(+)T、CD8^(+)T和Treg细胞浸润相关。
- 张亚楠刘杭丰郑锦秀郗彦凤杨涛
- 关键词：结直肠肿瘤迁移
- 杜鹃素通过降低Cx43的表达抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖被引量：4
- 2018年
- 目的研究Cx43在杜鹃素抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖中的作用。方法体外培养原代大鼠VSMCs细胞,随机分为对照组、AngⅡ刺激组(模型组)、AngⅡ+杜鹃素组(给药组)。CCK-8法检测细胞活力,Ed U法检测细胞增殖活性,流式细胞术观察细胞周期,real-time PCR和Western blot法检测细胞中Cx43的表达。用si RNA干扰Cx43的表达并测定细胞Ed U结合率和细胞周期。结果浓度为60μmol·L^(-1)的杜鹃素可使AngⅡ诱导的大鼠VSMCs的细胞增殖活性和Ed U结合率均明显降低(P<0.05),并阻止VSMCs由G0/G1期向S期的转化。Real-time PCR和Western blot结果显示,与模型组比较,杜鹃素能明显降低Cx43的m RNA和蛋白表达水平(P<0.01)。用si RNA干扰Cx43的表达后,杜鹃素对AngⅡ诱导的VSMCs增殖的抑制作用明显减弱。结论杜鹃素可明显抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖,抑制VSMCs有丝分裂,使其停滞于G_0/G_1期,其作用可能与杜鹃素抑制Cx43的表达有关。
- 张坤秦小江侯晓敏胡燕玲李青山
- 关键词：杜鹃素缝隙连接蛋白43血管平滑肌细胞SIRNA
- 上皮黏附分子通过诱导EMT促乳腺癌转移和耐药被引量：7
- 2021年
- 目的研究上皮黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)在乳腺癌转移和耐药中的作用,并探讨其机制。方法免疫组化方法确定EpCAM在非肿瘤癌旁组织(adjacent non-tumor tissues,ANTTs)和乳腺癌组织的表达;siRNA法敲低三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞中的EpCAM;Transwell实验检测乳腺癌细胞的迁移、侵袭能力;Western blot法确定乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中的EpCAM、上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)标志物(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)、β-catenin蛋白的表达水平。结果相对于ANTTs,EpCAM在乳腺癌组织表达增多,转移灶中进一步上调;相对于乳腺癌MCF-7细胞,EpCAM在MDA-MB-231细胞高表达;敲低MDA-MB-231细胞的EpCAM表达可降低其迁移、侵袭能力,减少其BCRP结论EpCAM可能通过诱导EMT促进乳腺癌的转移和耐药,其分子机制与Wnt/β-catenin信号通路有关。
- 师锐赞何倚帆牛亚楠高宇陈敏张轩萍
- 关键词：上皮间质转化乳腺癌耐药蛋白WNT/Β-CATENIN通路耐药
- miR-31改善二型糖尿病形成的研究
- 目的探究miR-31对于Ⅱ型糖尿病(T2DM)形成过程的影响。方法取4-6周龄雄性FVB小鼠与过表达miR-31的FVB小鼠,适应性喂养1周,将过表达miR-31转基因鼠剪鼠尾提取DNA鉴定,弃去阴性鼠。采用高脂饮食(h...
- 付媛张玉娟杜若琛原一桐王春芳张轩萍
- 关键词：二型糖尿病动物模型胰岛素抵抗
- miR-31通过下调FIH和上调VEGF-A/VEGFR-2促进大鼠主动脉内皮细胞增殖
- 2023年
- 目的探讨miR-31对大鼠主动脉内皮细胞(rat aortic endothelial cells,RAECs)增殖的影响及其潜在的作用机制。方法分离RAECs,鉴定为目的细胞后,观察miR-31激动剂(miR-31 agomir)和抑制剂(miR-31 antagomir)对RAECs增殖以及缺氧诱导因子抑制因子(hypoxia inducible factor inhibitor,FIH)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)和血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)水平的影响。通过CCK-8实验测定miR-31对细胞增殖能力的影响,qRT-PCR检测细胞中miR-31的相对表达水平,Western blot检测细胞中FIH、VEGF-A和VEGFR-2水平。结果在无特殊器械、不添加营养因子的情况下成功培养出RAECs;转染miR-31 agomir显著促进RAEC的细胞增殖,降低FIH水平,上调VEGF-A和VEGFR-2水平,转染miR-31 antagomir则相反。结论miR-31可能通过下调FIH、上调VEGF-A和VEGFR-2的表达促进主动脉内皮细胞增殖。
- 李咏梅付媛曹利利杜若琛王春芳张轩萍
- 关键词：主动脉内皮细胞原代培养增殖
- 多巴胺及D_1样受体激动剂SKF38393对大鼠胰岛素分泌的影响及机制
- 2018年
- 目的研究多巴胺及D_1样受体激动剂SKF38393(SKF)对大鼠胰岛素分泌的影响及其机制。方法雄性Wistar大鼠胰腺中注入胶原酶P,分离胰腺并经11 min消化和梯度离心得到胰岛组织颗粒。分离的胰岛经乙二胺四乙酸(EDTA)络合、分散酶(Dispase)Ⅱ进一步消化得到单个胰岛细胞。胰岛组织经挑选、分组和不同药物干预后,用放射免疫分析法检测胰岛素分泌量的不同。通过全细胞膜片钳技术记录胰岛B细胞电压依赖性钙通道电流,进而深入探究多巴胺对大鼠胰岛素分泌调控的机制。结果在16.7 mmol/L的葡萄糖环境中,多巴胺和D_1样受体激动剂SKF皆呈浓度梯度依赖性的方式抑制胰岛素分泌。胰岛B细胞在给予多巴胺和SKF干预后,均可使细胞上的电压依赖性钙通道电流减少。结论多巴胺及SKF均呈浓度梯度依赖性的方式抑制葡萄糖刺激的胰岛素分泌,这种作用与电压依赖性钙通道和D_1样受体有关;
- 任乐乐白涛刘萌萌杨晓华刘云峰章毅
- 关键词：多巴胺胰岛素胰岛B细胞电压依赖性钙通道
- CXC趋化因子配体8促进结直肠癌微环境中M2型巨噬细胞趋化及浸润被引量：3
- 2022年
- CXC趋化因子配体8(CXC chemokine ligand 8,CXCL8)在结直肠癌等多种肿瘤中高表达,并促进肿瘤恶性进展。研究发现,结直肠癌微环境中有大量M2型巨噬细胞浸润,但CXCL8是否影响M2型巨噬细胞的浸润及其潜在机制尚未可知。本文旨在探讨CXCL8对结直肠癌中M2型巨噬细胞浸润及趋化作用的影响。本研究首先分析了TCGA数据库结直肠癌样本中CXCL8表达水平及免疫细胞浸润情况,并在临床组织中进行验证。随后Western印迹及qRT-PCR检测5种结直肠癌细胞株CXCL8的表达情况。佛波酯(PMA)及IL-4诱导THP-1至M2型巨噬细胞后,与HCT116、SW480细胞及过表达CXCL8的HCT116(CXCL8/HCT116)、SW480(CXCL8/SW480)共培养,检测M2型巨噬细胞趋化情况。白细胞介素1β(IL-1β)处理HCT116、SW480细胞,检测CXCL8表达情况,与M2型巨噬细胞共培养,分析趋化结果。结果显示,患者癌组织CXCL8表达高于癌旁组织,CXCL8高表达癌组织中存在更多M2型巨噬细胞浸润;IL-1β作用于HCT116或SW480后,CXCL8的mRNA及蛋白质表达水平升高(P<0.05)。Transwell实验证实,CXCL8趋化M2型巨噬细胞(P<0.05)。综上所述,结直肠癌细胞中CXCL8可由IL-1β诱导产生,CXCL8表达增加能够促进M2型巨噬细胞的趋化,结直肠癌微环境中M2型巨噬细胞大量浸润可能与CXCL8表达升高有关。
- 高书华柴欣悦刘杭丰成敏蓉郑锦秀邵莹杨涛
- 关键词：巨噬细胞趋化结直肠癌
- 氧化应激介导多柔比星导致的大鼠主动脉血管平滑肌细胞损伤
- 2022年
- 目的探讨氧化应激在多柔比星(Dox)诱导大鼠主动脉血管平滑肌细胞(A7r5细胞)损伤中的作用及其机制。方法A7r5细胞经Dox 0,0.33,1.00和1.33μmol·L^(-1)孵育24 h,MTT法测定细胞存活率;倒置荧光显微镜下观察各组细胞形态;DCFH-DA荧光探针法测定活性氧(ROS)水平;比色法测定过氧化氢酶(CAT)含量;硝酸盐法测定一氧化氮(NO)含量;Western印迹法检测硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)氧化酶2(NOX2)、NADPH氧化酶的胞膜催化亚基p22^(phox)、内皮型NO合酶(eNOS)、诱导型NO合酶(iNOS)、蛋白激酶Cα(PKCα)、PKCβ1和PKCβ2蛋白表达水平。结果与对照组细胞相比,Dox 0.33,1.00和1.33μmol·L^(-1)组细胞存活率显著降低(P<0.05,P<0.01),镜下可见A7r5死细胞数目明显增加,不规则型,细胞核呈碎片状;细胞ROS水平显著升高(P<0.01),CAT含量明显下降(P<0.01),NO含量升高(P<0.01);Dox 1.00和1.33μmol·L^(-1)组细胞内TXNIP,p22^(phox),eNOS和iNOS蛋白表达水平显著升高(P<0.01);Dox 1.33μmol·L^(-1)组细胞内PKCα和PKCβ1蛋白表达水平显著升高(P<0.05);Dox 0.33,1.00和1.33μmol·L^(-1)组细胞内PKCβ2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而NOX2蛋白表达水平呈上升趋势,但未达到统计学差异。结论Dox导致A7r5细胞活力下降和氧化应激损伤,其机制可能与PKC激活NADPH氧化酶和NOS活性,进而诱导ROS大量产生有关。
- 张成瑞谢童邱会琴王婵范彦英杨彩红
- 关键词：多柔比星主动脉血管平滑肌细胞氧化应激
- 脂肪酸从头合成代谢及其抑制剂在肿瘤中的研究进展被引量：2
- 2021年
- 代谢重编程是肿瘤的重要特征之一。肿瘤细胞常会发生过度增殖、局部侵袭、转移、复发和耐药等。这些过程均需要大量的脂肪酸,用于合成肿瘤细胞所必需的生物膜和信号分子等。因此,研究脂肪酸从头合成代谢在肿瘤细胞发生发展过程中所发挥的重要作用有助于深入理解肿瘤的发病机制,为肿瘤的诊断和治疗提供新的思路。本文将对脂肪酸合成代谢在肿瘤中的研究进展进行论述,并关注脂肪酸合成相关代谢酶抑制剂的研究现状,旨在为肿瘤的治疗提供更多的线索。
- 李妍范彦英
- 关键词：肿瘤增殖肿瘤转移
