苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室
- 作品数：72 被引量：65H指数：4
- 相关作者：缪竞诚叶震敏单云波谢宇峰王家融更多>>
- 相关机构：东南大学附属徐州医院上海交通大学医学院第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省卫生厅科研基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 腺病毒介导的IL-24增强紫杉醇对A549肺腺癌细胞生长的抑制作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨腺病毒介导的白细胞介素24(Ad-IL-24)联合紫杉醇对体外培养的人肺腺癌A549细胞生长的影响。方法用Ad-IL-24、紫杉醇、Ad-IL-24联合紫杉醇处理A549细胞,以CCK-8法测定细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的变化。结果 Ad-IL-24可明显抑制人肺腺癌A549细胞生长并诱导细胞凋亡,与紫杉醇联合处理后,其抑制肺癌细胞生长及诱导细胞凋亡作用明显优于单用紫杉醇组及Ad-IL-24组,并引起G2/M期阻滞。结论 Ad-IL-24感染肺癌A549细胞可增强紫杉醇对肿瘤细胞生长的抑制作用。
- 徐明菊李敏敏杨吉成郭锦锦孙万邦
- 关键词：重组腺病毒白细胞介素24紫杉醇细胞生长
- 腺病毒介导的ING4基因诱导乳腺癌细胞凋亡的研究
- 目的:研究腺病毒介导的肿瘤抑制基因（inhibitor of growth family member4,ING4）对人乳腺癌细胞的抑制作用及其可能的分子机制。方法:扩增重组腺病毒Ad-ING4（实验组）及腺病毒空载体A...
- 苗莉缪竞诚张海峰王金志谢宇锋盛伟华杨吉成
- 关键词：腺病毒载体乳腺癌细胞凋亡P53
- 文献传递
- 腺病毒载体介导的ING4基因对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用被引量：9
- 2009年
- 目的:用人源化改造的鼠肿瘤生长抑制因子(mING4)基因构建的腺病毒表达载体(Ad-ING4)研究对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用。方法:以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过基因定点突变技术对mING4基因进行人源化改造,采用腺病毒载体的基因重组和体外包装技术获得表达与人ING-4氨基酸序列相同的重组腺病毒子(Ad-ING4),感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING4在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法和流式细胞技术检测ING4基因表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;荧光共聚焦显微镜观察MG-63细胞凋亡的形态学变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因表达对MG-63细胞中的Bax、Bcl-2基因表达的影响。结果:基因测序和PCR分析结果显示,人源化改造的小鼠ING4分子氨基酸序列与人ING4分子完全相同,成功构建了Ad-ING4腺病毒表达载体,在MG-63细胞中ING4基因的表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡,出现典型细胞凋亡形态学变化,ING4基因表达可通过上调细胞中Bax和下调Bcl-2基因表达诱导细胞凋亡。结论:转染ING4基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导细胞凋亡,该现象可能是通过改变Bax,Bcl-2表达水平来发挥抗肿瘤作用的。
- 井莹莹杨吉成缪竞诚盛伟华胡志清单云波刘铁连韩亚丽包婉蓉
- 关键词：ING4基因腺病毒载体凋亡
- 裂解型腺病毒Ad-E1A的构建以及体外对肝癌细胞的作用
- 2010年
- 目的构建Ad-E1A裂解型腺病毒载体,研究其对肝癌细胞的裂解作用。方法以QBI-293A细胞基因组DNA为模板,用特异性引物PCR法扩增E1A基因,酶切后连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,用PmeI酶对pAdTrack-CMV-E1A线性化后,与pAdEasy-1共转化在BJ5183大肠杆菌中进行同源重组,筛选重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-E1A;再用PacI酶切对重组腺病毒质粒线性化,脂质体转染QBI-293A细胞,收获Ad-E1A腺病毒子。在QBI-293A细胞中多轮感染后获得高效价的病毒。将Ad-E1A腺病毒感染SMMC-7721,并用MTT和流式细胞仪检测Ad-E1A对人肝癌细胞生长和细胞周期的影响。结果获得高滴度的重组裂解型腺病毒Ad-E1A。Ad-E1A感染SMMC-7721后,出现明显的细胞病变。Ad-E1A对人肝癌细胞SMMC-7721的生长有明显抑制,48 h后效果明显。Ad-E1A可直接诱导SMMC-7721细胞的凋亡。结论裂解型腺病毒Ad-E1A构建成功并可以显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长,并在肝癌细胞中复制造成细胞裂解,诱导肝癌细胞的凋亡。
- 周忆新谢宇锋叶震敏盛伟华杨吉成
- 关键词：细胞凋亡E1ASMMC-7721肝癌细胞
- 脐血CD34+造血干/祖细胞在丝素膜上向内皮细胞分化的研究
- 目的：以人脐血CD34+造血干/祖细胞为种子细胞，探讨其体外分离、纯化、诱导扩增和分化为内皮细胞的可行性，以及丝素材料对其生长、粘附、分化等情况的影响。方法：采集新鲜脐血经抗凝处理及无菌包装，Ficoll密度梯度离心法得...
- 陈瑶杨吉成缪竞诚
- 关键词：脐血诱导分化内皮细胞
- Ad-hOSM转基因饲养层细胞对脐血CD34^+造血干/祖细胞增殖及归巢能力的影响
- 2011年
- 目的:建立转人抑瘤素M(hOSM)基因腺病毒载体的饲养层细胞,观察转基因细胞对脐血CD34+造血干/祖细胞扩增的影响,比较扩增前、后造血干/祖细胞体外迁移能力的变化。方法:建立转hOSM基因腺病毒载体的饲养层细胞,并用RT-PCR法和ELISA法鉴定目的基因;采用免疫磁珠法分离脐带血CD34+造血干/祖细胞,流式细胞术(FCM)检测纯度;将CD34+造血干/祖细胞与饲养层细胞共培养,FCM检测各组增殖效果;扩增后的造血干/祖细胞用跨膜迁移实验(Transwell实验)检测自发迁移率和SDF-1诱导迁移率以鉴定体外扩增的造血干/祖细胞的归巢能力。结果:建立的转基因饲养层细胞均有绿色荧光,RT-PCR法和ELISA法证实有目的基因表达,免疫磁珠法分离的脐血CD34+造血干/祖细胞纯度可达(96.8±2.28)%,与Ad-hOSM转基因饲养层细胞共培养7 d后CD34+造血干/祖细胞可扩增15.73倍,表面黏附分子CXCR4和CD54表达量仍较高,培养后的细胞用Tran-swell板做体外迁移实验,与转基因饲养层细胞共培养的干细胞,其诱导迁移率为(40.68±1.35)%,明显高于对照组,可以较好的保持其归巢能力。结论:转hOSM基因腺病毒载体的饲养层细胞可有效扩增脐血CD34+造血干/祖细胞,延缓其分化,并且体外扩增后仍保持较高的归巢能力。
- 田丽娜郁心包婉蓉陈瑶韩亚丽张凤娟缪竞诚
- 关键词：腺病毒载体
- AD-ING4-IL-24对乳腺癌抑癌增效作用的实验研究
- 目的ING4(肿瘤生长抑制因子4)和IL-24(白细胞介素24)双基因共表达腺病毒载体对MDA-MB-231乳腺癌细胞的抑癌增效作用。方法将AD-ING4-IL-24腺病毒感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞，用RT-P...
- 关键词：腺病毒ING4IL-24乳腺癌
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- AD-ING4-IL-24双基因共表达对人乳腺癌放疗增敏的体内外实验研究
- 目的研究用POLYA-PROMOTER构建的人肿瘤生长抑制因子4(ING4)和自细胞介素24(IL-24)双基因共表达腺病毒载体AD-ING4-POLYA-PMMOTER-IL-24(简称AD-ING4-IL-24)对人...
- 关键词：ING4IL-24MDA-MB-231细胞放疗增敏
- 文献传递网络资源链接
- AD-HLIF转基因饲养层细胞体外促进脐血CD34+造血干／祖细胞扩增及其分子机制的研究
- 目的：建立转HLIF基因腺病毒载体的饲养层细胞，观察对CD34+造血干／祖细胞的扩增作用及归巢能力的影响，并探讨LIF因子在信号通路方面发挥作用的分子机制。方法：建立转HLIF基因腺病毒载体的饲养层细胞，并用RT-PCR...
- 关键词：腺病毒载体
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- 腺病毒介导的IL-24表达对PC-3人前列腺癌细胞体内外抑癌效应被引量：3
- 2010年
- 目的:研究腺病毒介导的IL-24基因表达对前列腺癌细胞体内外的抑癌效应及分子机制。方法:将扩增的Ad-IL-24感染PC-3细胞,用RT-PCR和Western blot法检测IL-24基因在PC-3细胞中的表达;MTT法检测IL-24基因表达对PC-3细胞的生长影响;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡变化;RT-PCR法检测IL-24基因的表达对PC-3细胞中的Bcl-2、Bax、p53和Caspase3凋亡相关基因表达的影响。用Ad-IL-24在裸鼠PC-3移植瘤的瘤体内注射治疗,通过免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、CD34等与细胞凋亡和血管形成相关因子的表达。结果:IL-24基因在PC-3细胞中成功表达,对PC-3细胞增殖有明显抑制作用,可上凋p53、Bax、Caspase-3基因和下凋Bcl-2基因表达,进而诱导细胞凋亡。Ad-IL-24能显著抑制裸鼠前列腺癌移植瘤生长,瘤重的抑制率可达54%;免疫组化结果显示Ad-IL-24不仅能明显上调Bax和Caspase-3基因和下调Bcl-2基因表达,而且能引起与血管形成标记基因CD34表达水平下降。结论:腺病毒介导的IL-24基因表达在体内外可明显抑制PC-3细胞的生长,诱导其凋亡。其机制可能与上凋P53、Bax、Caspase-3基因和下凋Bcl-2和CD34基因表达水平有关。
- 张治国杨吉成杨慧翠盛伟华谢宇锋龙建华丁翔欧阳骏
- 关键词：IL-24基因前列腺癌肿瘤抑制
