刘光清
- 作品数：200 被引量：516H指数：12
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- RK-13细胞HBB基因敲除稳定株的构建方法
- 本发明公开了一种RK‑13细胞HBB基因敲除稳定株的构建方法；所述方法包括如下步骤：设计一对互补的靶向家兔HBB基因第二个外显子的sgRNA，以pSpCas9(BB)‑2A‑Puro(PX459)V2.0质粒为载体,构建...
- 刘光清谭永贵刘腾朱杰陈宗艳李传锋
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- 猪繁殖与呼吸综合征二价重组腺病毒疫苗及其制备方法
- 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征二价重组腺病毒疫苗及其制备方法，属于生物疫苗制备技术领域。该疫苗可通过在PRRSV GP5和M蛋白之间插入一具有自我裂解的FMDV 2A基因相连接，构建成GP5－2A－M融合蛋白基因，并与腺...
- 刘光清云涛倪征余斌陈柳华炯钢李双茂
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- 绵羊MAVS基因的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2019年
- 通过RT-PCR方法从绵羊肺细胞(sheep lung cells,SLT)扩增获得MAVS(mitochondrial antiviral signaling protein)基因,并将其克隆至原核表达载体pET-32a,测序鉴定结果表明成功获得重组质粒pET-32a-MAVS。将其转化至感受肽细胞BL21中,经IPTG诱导获得重组蛋白。将纯化的MAVS蛋白免疫BALB/c雌鼠,制备抗MAVS的鼠源多克隆抗体。SDS-PAGE结果表明该抗体具有良好的反应原性。MAVS多克隆抗体的成功制备为其生物学功能研究奠定了基础。
- 董丹丹刘腾缪秋红朱杰刘光清
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 口蹄疫病毒结构蛋白的二级结构及其B细胞抗原表位的预测被引量：11
- 2004年
- 以口蹄疫病毒OLZ0 2株基因组序列为材料 ,采用Garnier Robson法、Chou Fasman法和Karplus Schulz法预测了其结构蛋白的二级结构 ,用Kyte Doolittle法分析了各结构蛋白的亲水性 ,Emini法预测了各结构蛋白的表面可能性 ,Jameson Wolf法预测了各蛋白的抗原指数 ,综合评价了口蹄疫病毒结构蛋白的B细胞抗原表位。结果表明 ,VP1蛋白含有的B细胞优势抗原表位最多 ,是研制口蹄疫基因工程疫苗的首选免疫原 ,但其他结构蛋白也含有少量的B细胞抗原表位 。
- 云涛刘光清冷青文郭慧琛刘在新张居农谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒B细胞表位
- 兔病毒性出血症病毒突变株及其构建方法、用途
- 本发明公开了一株兔病毒性出血症病毒突变株及其构建方法、用途；所述兔病毒性出血症病毒突变株，含有基因组编码的衣壳蛋白VP60，次级结构蛋白VP10和非结构蛋白p11、p28、p35、p32、VPg、3C样蛋白酶和RNA依赖...
- 刘光清朱杰孟春春李传峰陈宗艳
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- SYBR Green II荧光定量PCR结合熔解曲线鉴别不同亚型兔病毒性出血症病毒方法的建立被引量：2
- 2017年
- 本研究建立了一种荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR)结合熔解曲线区分不同亚型兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)方法。根据GenBank数据库中已公布的不同亚型RHDV(经典RHDV和RHDV2)的衣壳蛋白VP60序列保守区设计了1对特异性引物,利用SYBR Green II荧光染料,在实时荧光定量PCR方法的基础上结合熔解曲线进行分析,经典RHDV和RHDV2熔解温度(Tm)分别为(86.3±0.1)℃和(85.1±0.1)℃,扩增产物的熔解曲线分析均只出现单特异峰。结果表明,本研究建立的方法能够快速地鉴别经典RHDV和RHDV2。
- 谭永贵刘腾朱杰郭慧敏吴巧梅李琦缪秋红陈宗艳李传峰刘光清
- 关键词：兔病毒性出血症病毒荧光定量PCR熔解曲线
- 杯状病毒复制酶的结构与功能被引量：1
- 2022年
- 本文综述了近年来有关杯状病毒RdRp的结构和功能的研究进展,并对与RdRp可能发生相互作用的伴侣分子进行了综述。此外,我们还讨论了所有杯状病毒的RdRp中可能存在的保守结构基序。
- 刘光清
- 关键词：杯状病毒复制酶
- 一种兔出血症病毒“自杀性”DNA疫苗及其构建方法
- 本发明公开了一种兔出血症病毒“自杀性”DNA疫苗及其构建方法。本发明的兔出血症病毒“自杀性”DNA疫苗，由RHDV-VP60基因和甲病毒复制子载体pSCA组成。该DNA疫苗的构建方法包括：RHDV病毒总RNA的提取及纯化...
- 刘光清程英杰孟春春陈宗艳李传峰
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- 新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：6
- 2014年
- 为了解新型鸭呼肠孤病毒(NDRV TH11株)σC蛋白的抗原性,采用RT-PCR方法扩增了NDRV TH11株σC蛋白的编码基因,将其克隆于原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达His-σC重组蛋白。SDS-PAGE和Western blot分析表明该重组蛋白获得高效表达,并具有较好的反应原性。以纯化的σC蛋白免疫实验兔制备了抗σC蛋白的多克隆抗体,间接ELISA检测结果显示其效价达1∶20 000以上;间接免疫荧光试验表明,多克隆抗体能够特异性识别NDRV的σC蛋白,显示出σC蛋白具有良好的免疫原性。
- 毕庄莉朱英奇陈宗艳李传峰孟春春王桂军刘光清
- 关键词：新型鸭呼肠孤病毒原核表达多克隆抗体
- 一种抗原蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种抗原蛋白及其编码基因与应用，该抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明抗原蛋白为非全病毒抗原、安全性好，不含无关杂蛋白，只与血清中兔病毒性出血症病毒(RHDV)抗体特异结合，不与家兔其它疫...
- 余斌刘光清云涛倪征陈柳华炯钢李双茂梁华丽
- 文献传递
