左佳
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华中农业大学食品科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技攻关计划天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学农业科学更多>>
- 胶体金免疫层析法检测葡萄球菌B型肠毒素被引量：2
- 2009年
- 目的通过优化制备中各关键步骤的实验条件,建立快速检测葡萄球菌B型肠毒素的胶体金免疫层析法。方法采用柠檬酸三钠还原氯金酸法制备直径16nm的胶体金溶液,葡萄球菌B型肠毒素多克隆抗体制备免疫胶体金复合物,组装胶体金免疫层析快速检测试纸条。结果用柠檬酸三钠还原法制备的16nm胶体金溶液呈亮红色,其颗粒大小比较均一。胶体金标记抗体蛋白的最低稳定量为15μg/mL,最适稳定量为18μg/mL,标记的最适pH为7.8。此方法检测限为0.2μg/mL,准确度为94.9%。结论制备了葡萄球菌B型肠毒素胶体金免疫试纸条,该方法简便、快速,而且灵敏度高、稳定性强,适用于食品中葡萄球菌B型肠毒素的快速检测。
- 左佳宁保安孙思明周焕英李晓芳杨丽丽高志贤
- 关键词：胶体金胶体金免疫层析法试纸条
- 胶体金放大型葡萄球菌B型肠毒素生物传感器的研制
- 金黄色葡萄球菌肠毒素是引起食物中毒和院内感染的最重要病原之一，葡萄球菌B型肠毒素（SEB）还是一种具有超抗原活性的外毒素，具有强大的生物学活性。快速检测SEB对预防食物中毒、保障食品安全具有重要的现实意义，但传统的SEB...
- 左佳
- 关键词：葡萄球菌胶体金生物传感器食品安全
- 文献传递
- 氯霉素高特异抗体的制备与纯化
- 2009年
- 目的自制免疫亲和层析柱,采用亲和层析法获取高纯度的抗氯霉素抗体并对其进行活性分析。方法采用硫酸铵分级沉淀法对抗体进行初步提取。然后选用3,3′-二氨丙基亚胺(DADPA)作为亲和凝胶与配基氯霉素之间的"间隔臂",制备分离纯化抗氯霉素特异性IgG的亲和层析柱,对IgG粗品进行亲和层析纯化,并用ELISA法检测其活性。结果经饱和硫酸铵分级沉淀,可除去大部分的杂蛋白,较好实现对目标蛋白的初步分离;采用自制的免疫亲和层析柱,可获得高纯度的兔抗氯霉素抗体,检测其活性比纯化前提高了4倍,交叉反应结果显示抗体对CAP有高的特异性,对其他类似药物无反应活性。结论应用本试验所建立的方法可得到高纯度的抗氯霉素抗体,为氯霉素的免疫检测奠定了基础。
- 杨丽丽胡红芳宁保安李晓芳左佳高志贤
- 关键词：氯霉素抗体特异性抗体亲和力
- 胆汁三烯结合蛋白在大肠杆菌中的表达、复性与纯化被引量：1
- 2009年
- 目的:合成胆汁三烯结合蛋白(BBP)基因并在大肠杆菌中表达,获得重组BBP纯化制品。方法:根据天然BBP的基因序列和大肠杆菌偏好密码子设计并合成BBP基因的引物,PCR扩增优化的BBP基因序列,克隆至载体pEasy-T3;测序正确后,将该序列克隆至表达载体pET-32a上,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,在IPTG诱导下表达融合蛋白;采用Ni柱纯化融合蛋白。结果:PCR扩增获得了优化后的BBP基因序列,构建了表达载体pET-32a-BBP;SDS-PAGE分析表明表达的融合蛋白相对分子质量为20×103,以包涵体形式存在,占全菌蛋白的40%以上;变性、复性后经Ni2+柱纯化,获得纯度达98%以上的重组蛋白。结论:优化并合成了BBP全基因序列,获得了高纯度重组融合蛋白,为进一步鉴定其生物活性及筛选小分子的研究奠定了基础。
- 李晓芳宁保安胡红芳杨丽丽左佳王彩红高志贤
- 关键词：大肠杆菌融合蛋白
