杨丽丽
- 作品数:12 被引量:8H指数:2
- 供职机构:华中农业大学食品科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家科技攻关计划天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学农业科学医药卫生更多>>
- 恩诺沙星对鸡细胞色素P450 1A5表达的影响被引量:2
- 2009年
- 目的观察恩诺沙星对鸡细胞色素P450 1A5(CYP1A5)表达的影响,为揭示兽药残留的产生机制以及临床安全联合用药提供理论依据。方法各实验组分别给予恩诺沙星5mg/kg(低剂量组)、25mg/kg(中剂量组)和125mg/kg(高剂量组);对照组给予相同体积的生理盐水。给药5d后检测鸡肝微粒体蛋白含量、CYP450含量、CYP1A5 mRNA及蛋白表达量的变化。结果中、高剂量组的肝微粒体蛋白含量、CYP450含量、CYP1A5 mRNA及蛋白表达量与对照组相比分别下降14%、36%,5%、5%,9%、20%,37%、49%,差异均有显著性(P<0.05)。结论中、高剂量恩诺沙星对CYP1A5的表达呈现出抑制作用。
- 胡红芳杨丽丽李晓芳高志贤程义勇
- 关键词:恩诺沙星实时PCR
- 胶体金免疫层析法检测葡萄球菌B型肠毒素被引量:2
- 2009年
- 目的通过优化制备中各关键步骤的实验条件,建立快速检测葡萄球菌B型肠毒素的胶体金免疫层析法。方法采用柠檬酸三钠还原氯金酸法制备直径16nm的胶体金溶液,葡萄球菌B型肠毒素多克隆抗体制备免疫胶体金复合物,组装胶体金免疫层析快速检测试纸条。结果用柠檬酸三钠还原法制备的16nm胶体金溶液呈亮红色,其颗粒大小比较均一。胶体金标记抗体蛋白的最低稳定量为15μg/mL,最适稳定量为18μg/mL,标记的最适pH为7.8。此方法检测限为0.2μg/mL,准确度为94.9%。结论制备了葡萄球菌B型肠毒素胶体金免疫试纸条,该方法简便、快速,而且灵敏度高、稳定性强,适用于食品中葡萄球菌B型肠毒素的快速检测。
- 左佳宁保安孙思明周焕英李晓芳杨丽丽高志贤
- 关键词:胶体金胶体金免疫层析法试纸条
- 氯霉素高特异性抗体的制备与纯化
- 目的自制免疫亲和层析柱,采用亲和层析法获取高纯度的抗氯霉素抗体并对其进行活性分析。方法采用硫酸铵分级沉淀法对抗体进行初步提取。然后选用3,3′-二氨丙基亚胺(DADPA)作为亲和凝胶与配基氯霉素之间的"间隔臂",制备分离...
- 杨丽丽胡红芳宁保安李晓芳左佳高志贤
- 关键词:氯霉素纯化
- 文献传递
- 氯霉素竞争ELISA检测试剂盒的研制
- 2010年
- 目的应用抗氯霉素多克隆抗体,建立竞争ELISA分析方法,研制氯霉素残留快速检测试剂盒,并对其性能进行测定。方法选用抗氯霉素高特异性抗体,直接包被抗体后,将酶标记氯霉素和氯霉素标准品或样品加入预先包被了特异性抗体的孔内,建立直接竞争ELISA检测试剂盒。结果所选用的抗体对氯霉素亲和力高,与链霉素、四环素、土霉素、青霉素4种抗生素及克伦特罗的交叉反应率均小于0.01%;抗体的特异性强;检测质量浓度为50、10.5、0.5mg/ml样本时,平均变异系数为11.4%;对氯霉素残留检测的标准曲线为y=-14.843logx+56.692,R2=0.9965,线性范围为0.02~64.0ng/ml,检测限IC10为0.451ng/ml,灵敏度IC50为2.82ng/ml,样品的加标回收率为72%~113%。结论试剂盒检测的准确性和重现性较好,可用于批量虾肉、鸡肉、牛奶等样品中氯霉素残留的检测。
- 杨丽丽胡红芳高志贤
- 关键词:氯霉素酶联免疫吸附分析试剂盒
- 动物源性食品中氯霉素快速检测的ELISA方法研究
- 氯霉素(CAP)是一种高效的抗生素,它可以和大多数药物和饲料添加剂混用,在使用过程中稳定,药效不会降低。由于该药物的广泛使用,使其在动物源性食品中的检出率越来越高,许多发达国家相继禁止或严格限制使用氯霉素,但传统的氯霉素...
- 杨丽丽
- 关键词:氯霉素多克隆抗体酶联免疫吸附动物源性食品
- 文献传递
- 氯霉素高特异抗体的制备与纯化
- 目的:自制免疫亲和层析柱,采用亲和层析法获取高纯度的抗氯霉素抗体并对其进行活性分析。方法:采用硫酸铵分级沉淀法对抗体进行初步提取。然后选用3,3'一二氨丙基亚胺(DAJDPA)作为亲和凝胶与配基氯霉素之间的“间隔臂”,制...
- 杨丽丽胡红芳宁保安李晓芳左佳高志贤
- 关键词:动物性食品农药残留检测氯霉素抗体制备
- 氯霉素高特异抗体的制备与纯化
- 2009年
- 目的自制免疫亲和层析柱,采用亲和层析法获取高纯度的抗氯霉素抗体并对其进行活性分析。方法采用硫酸铵分级沉淀法对抗体进行初步提取。然后选用3,3′-二氨丙基亚胺(DADPA)作为亲和凝胶与配基氯霉素之间的"间隔臂",制备分离纯化抗氯霉素特异性IgG的亲和层析柱,对IgG粗品进行亲和层析纯化,并用ELISA法检测其活性。结果经饱和硫酸铵分级沉淀,可除去大部分的杂蛋白,较好实现对目标蛋白的初步分离;采用自制的免疫亲和层析柱,可获得高纯度的兔抗氯霉素抗体,检测其活性比纯化前提高了4倍,交叉反应结果显示抗体对CAP有高的特异性,对其他类似药物无反应活性。结论应用本试验所建立的方法可得到高纯度的抗氯霉素抗体,为氯霉素的免疫检测奠定了基础。
- 杨丽丽胡红芳宁保安李晓芳左佳高志贤
- 关键词:氯霉素抗体特异性抗体亲和力
- 蝇蛆饲养废弃物中尿囊素的提取纯化工艺的研究
- 研究了从蝇蛆饲养废弃物中提取和浓缩尿囊素的条件。结果表明,尿囊素的提取最佳条件为:以水为提取液,料液比为1:5,提取温度为80℃,水浴回流时间2h;以乙醇为提取剂,料液比为1:5,水浴回流时间2h。采用调节pH值的方法和...
- 黄文张永丹裴兆义杨丽丽
- 关键词:提取纯化工艺
- 文献传递
- 氯霉素竞争ELISA检测试剂盒的研制及其性能测定
- 目的:应用抗氯霉素多克隆抗体,建立竞争ELISA分析方法,研制出氯霉素残留快速检测试剂盒,并对其性能进行测定。方法:选用抗氯霉素高特异性抗体,直接包被抗体后,将酶标记氯霉素和氯霉素标准品或样品加入预先包被了特异性抗体的孔...
- 杨丽丽胡红芳高志贤
- 关键词:氯霉素酶联免疫吸附分析试剂盒
- 文献传递
- 梯度离心法制备鸡肝微粒体方法的建立被引量:1
- 2009年
- 目的:建立梯度离心法制备鸡肝微粒体的方法。方法:利用蔗糖密度梯度离心法制备鸡肝微粒体,经透射电镜和Western-blot检测肝微粒体纯度,BCA法检测总蛋白质含量,CO差示光谱法检测总CYP450含量。结果:电镜下,制备的肝微粒体可清楚见到大量膜囊泡状结构,其它污染细胞器成分较少见;制备的肝微粒体仅与GRP94抗体特异性结合;肝微粒体总蛋白质含量与总CYP450含量分别为8.749 mg/mL和0.763 nmol/mg。结论:利用蔗糖梯度密度离心法制备得到高质量鸡肝微粒体蛋白,为鸡细胞色素P450的深入研究奠定了基础。
- 胡红芳杨丽丽李晓芳高志贤程义勇吴大成
- 关键词:肝微粒体梯度离心细胞色素P450