李江姣
- 作品数：29 被引量：44H指数：4
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肺炎球菌结合疫苗两种免疫效果评价方法的比较分析被引量：5
- 2014年
- 目的研究肺炎球菌结合疫苗诱导的功能抗体滴度与总抗体浓度的相关性。方法采用调理吞噬实验(opsonophagocytic assay,OPA)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)对13价肺炎球菌结合疫苗免疫后血清样本进行OPA滴度和抗体浓度检测,并就两种检测结果进行比较,分析二者相关性。结果血清型1,3,5,6A,6B,9V,14,18C,19A和23F两种检测结果的相关系数较高,为0.71~0.88。19F和4型的相关系数相对略低,分别为0.66和0.52。结论 OPA法与ELISA法测定的血清抗体效价的相关性较高,二者结果具有良好的一致性。
- 李江姣杜慧竟陈驰石继春徐苗叶强
- 关键词：肺炎球菌结合疫苗ELISA
- EoRab43参与游仆虫细胞内大核周围的物质运输被引量：3
- 2009年
- Rab家族蛋白是真核细胞内膜泡运输途径中重要的调节因子。EoRab43是八肋游仆虫中一种编码非典型Rab蛋白的基因。本研究依据已获得的EoRab43基因序列设计引物,从八肋游仆虫大核DNA中扩增了EoRab43基因的3′端153bp片段,即EoRab43153bp(对应于EoRab43蛋白的C末端50个氨基酸,EoRab43C),构建重组表达质粒pGEX-EoRab43153bp转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,纯化后的融合蛋白GST-EoRab43C免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。经检测,制备的抗体具有较高的效价及良好的特异性。利用制备的抗体对EoRab43在游仆虫细胞内进行免疫荧光定位,结果显示该蛋白主要定位于该生物细胞内大核染色体的周围。
- 李江姣聂宇梁爱华党旭红王伟
- 关键词：八肋游仆虫大核免疫荧光定位膜泡运输
- 全自动移液工作站在肺炎疫苗多重调理吞噬实验中的应用
- 2022年
- 目的用全自动移液工作站代替人工进行多重调理吞噬实验(multiplexed opsonophagocytic killing assay,MOPA)部分操作步骤。方法用两台全自动移液工作站(1号和3号)分步进行11份13价肺炎球菌疫苗免疫血清样本的MOPA检测,通过与人工操作的检测结果比较验证其准确性;通过5次试验内和5次试验间平行检测验证其重复性。结果1号工作站检测11份血清样本的13个型别滴度结果与手动操作结果的相关系数均在0.90以上,除6B和9V型,滴度差值80%以上均在3倍以内;1号工作站对6份样本5次试验内平行检测,每份血清样本的滴度均在均值的3倍以内;3号工作站预稀释和人工预稀释的11份血清滴度值相差均在3倍以内;3份血清5次试验内平行检测,每份血清的滴度均在均值的3倍以内;11份血清5次试验间平行检测,每份血清的滴度均在均值的3倍以内。结论全自动移液工作站实验准确性和重复性良好,有望代替人工完成部分MOPA实验步骤。
- 杜慧竟张全仓李江姣叶强
- 关键词：肺炎球菌疫苗
- 金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品的研制被引量：2
- 2021年
- 目的研制金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品。方法将10株金黄色葡萄球菌和10株阴性对照代表性菌株分别在适宜条件下复苏培养,制备合适浓度的菌悬液,并加热灭活和分装。随机抽样不同候选参考品样品10支进行均匀性分析,并将样品分别置于2~8、25、37℃条件下保藏以及反复冻融,评价标准物质的稳定性。同时对候选参考品的准确性、特异性、重复性、最低检出限进行分析,并组织8家实验室进行协作标定。结果制备了由阳性、阴性、重复性和最低检出限样品组成的金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用候选参考品。不同候选参考品不同样品间的Ct值的变异系数在1.23%~3.86%之间,表明制备候选参考品均匀性良好。同时证实P1~10阳性和最低检出限候选参考品样品在反复冻融及加速破坏条件下稳定性良好。应用3个不同厂家生产试剂盒进行重复性验证实验显示,样本的Ct值均小于5.0%,表明候选参考品的重复性良好。除P6阳性候选参考品样品不能被部分试剂盒检出,其余阳性参考品样品均能成功检测、最低检出限为1.0×10^(3)个/m L。协作标定结果进一步表明阳性、阴性、重复性和最低检出限候选参考品均符合国家参考品的各项要求。结论研制的金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒用国家参考品已获得批准,可用于金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒的质量控制和评价。
- 陈驰梁丽王春娥石继春龙新星刘茹凤黄洋李康徐潇李江姣徐颖华叶强
- 关键词：金黄色葡萄球菌核酸国家参考品均匀性稳定性
- 抗甲病毒化合物高通量筛选模型的建立与应用
- 2015年
- 建立抗甲病毒化合物高通量筛选模型可为筛选和分析抗甲病毒药靶提供技术基础。本研究以含有分泌型荧光素酶(Gaussialuciferase,GLUC)报告基因标记的重组辛德毕斯病毒XJ160-GLUC为分子基础,建立了抗甲病毒化合物的高通量筛选模型,并对感染复数、检测时间等参数进行优化。经过优化,筛选模型的Z’因子值可达到0.71,表明我们所建立的筛选模型具有较好的稳定性。应用该筛选模型对8080个五合一样品进行筛选,最终获得19个具有抗甲病毒活性的阳性化合物。本研究所建立的抗甲病毒化合物高通量筛选模型及抗甲病毒阳性化合物的发现为抗甲病毒靶标相关的研究提供了新的思路和信息。
- 尉研李江姣王焕琴岑山梁国栋谭文杰朱武洋
- 关键词：甲病毒药靶
- Rab11的结构特征、效应因子与功能被引量：3
- 2008年
- Rab11是Rab小分子GTP酶家族的成员。在细胞内膜泡再循环途径中,Rab11作为重要调节因子,介导膜泡从内体向质膜的运输。近年来随着对Rab11研究的深入,人们发现该蛋白质在多种细胞生命活动中发挥着关键作用。现对Rab11的结构、效应蛋白及功能等方面进行了综述。
- 李江姣聂宇党旭红王伟
- 辛德毕斯病毒E2包膜蛋白可溶性表达条件的优化
- 2011年
- 目的:通过优化表达条件,提高辛德毕斯病毒E2包膜蛋白胞外区的可溶性表达量。方法:构建含E2基因胞外区的重组表达质粒pGEX-6p-1-E2,筛选合适宿主菌和诱导温度,并构建5种分子伴侣共表达系统(即pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pG-Tf2和pTf16 5种分子伴侣质粒分别与重组表达质粒pGEX-6p-1-E2共表达),筛选最适分子伴侣质粒。结果:(1)E2蛋白的表达量在E.coli BL21、BL21(DE3)pLysS、Rosetta(DE3)及Origami B(DE3)4种表达菌中没有明显差别;(2)16℃诱导时E2蛋白在上清中可溶性表达量最高;(3)分子伴侣质粒pG-Tf2使目的蛋白的可溶性表达量提高了15.7%,作用最为显著。结论:通过优化表达条件及使用分子伴侣共表达系统提高了E2蛋白的可溶性表达,为进一步E2蛋白的相关研究奠定了基础。
- 李江姣朱武洋何英梁国栋
- 关键词：辛德毕斯病毒分子伴侣可溶性表达
- 评价肺炎链球菌疫苗免疫效果的功能性抗体检测方法的建立被引量：6
- 2014年
- 目的建立肺炎球菌疫苗免疫效果评价的功能性抗体滴度检测方法。方法参考美国阿拉巴马大学的多重调理吞噬实验(MOPA)方法,构建并鉴定HL-60效应细胞库、肺炎球菌工作菌种库和补体;在此基础上对5份血清样本进行调理吞噬活性检测。结果 HL-60细胞分化后表面标志表达量CD35为71.78%,CD71为10.97%,活细胞比例为72.96%。13个血清型的肺炎链球菌工作菌种的冻存复活率均高于90%;抗生素抗性与敏感性与预期结果一致;工作稀释度均≥1000。补体的非特异性杀菌率均≤70%。血清样本的杀菌曲线均为标准的S型,平行孔间的差异不超过3倍。结论效应细胞、工作菌种、补体及血清样本的检测结果均符合阿拉巴马大学参考方法的标准要求,成功建立了基于MOPA的功能性抗体检测方法。
- 李江姣杜慧竟石继春徐苗叶强
- 关键词：肺炎链球菌疫苗
- EoRab43为八肋游仆虫中编码非典型Rab的基因被引量：6
- 2008年
- Rab蛋白是与真核细胞内的膜泡运输密切相关的调节分子。本研究运用简并引物PCR技术从原生动物八肋游仆虫大核基因组中克隆获得了一个全新的Rab基因,EoRab43 (GenBank登陆号为EU365391) ,该基因拟编码蛋白的氨基酸序列基本包括Rab蛋白保守的GTP结合区以及RabF模序。Blast结果显示,EoRab43序列与其它生物中Rab5A、Rab6和Rab13的一致性相对较高,但也仅为36·4 %-38·5 %,无法将其归类于任何现有的Rab蛋白亚家族。序列分析显示该基因拟编码的蛋白质属于非典型Rab,这是首次在游仆虫中发现的编码非典型Rab蛋白的基因,推测其在原生动物八肋游仆虫细胞内可能执行某些特殊的生理功能。
- 聂宇李江姣梁爱华杨欣张志云王伟
- 关键词：游仆虫基因克隆
- 含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的辛德毕斯病毒的制备与鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的 制备含有增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）报告基因的辛德毕斯病毒,并对其进行鉴定.方法 采用融合PCR技术将报告基因EGFP融合到辛德毕斯病毒XJ-160感染性克隆pBR-XJ160的结构基因编码框后,并在报告基因前面添加亚基因启动子SP6,通过反向遗传学技术拯救得到EGFP标记的辛德毕斯病毒.结果 成功拯救并获得了EGFP标记的XJ-160病毒,该重组病毒具有良好的荧光表达特性和遗传稳定性.结论 EGFP标记的辛德毕斯病毒可用于观测病毒的侵染轨迹,为进一步研究辛德毕斯病毒嗜性、生物学功能,以及感染机制奠定了基础.
- 邓玲玲李江姣尉研王焕琴张凤娟孙继国陈畅朱武洋梁国栋
