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王兴: 作品数：15 被引量：44H指数：4; 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金贵州省卫生厅科学技术基金陕西省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学更多>>

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一种大鼠肝癌干细胞的离心富集方法被引量：2: 2012年; 目的建立一种富集大鼠肝癌干细胞的方法，并检测此种方法分离得到的细胞是否具有肿瘤干细胞的生物学特征。方法二乙基亚硝胺（DENA）腹腔注射构建大鼠肝癌模型，两步胶原酶灌注法分离肝癌细胞并体外培养，Percoll连续梯度密度离心法将细胞分成4层，采用流式细胞仪检测各层细胞的肝癌干细胞表面标志上皮细胞黏附因子（EpCAM）、甲胎蛋白（AFP）的表达，并用实时一聚合酶链反应（ReM—timePCR）验证EpCAM、CDl33、AFP的mRNA表达。绘制生长曲线检测各层细胞增殖能力，Transwell小室检测各层细胞的侵袭能力。结果Percoll离心所得4层细胞中，第3层细胞是富集肝癌干细胞最多的一层，具有最强的增殖能力。第3层细胞EpCAM与AFP阳性表达最高，分别为（84．50±8．31）％和（85．20±8．31）％，与其他各层比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。经ReM—timePCR验证，第3层细胞的EpCAM和AFPmRNA表达最高，分别为（111．34±5．59）和（13．76±0．95），与其他各层比较，差异有统计学意义（P〈0．05），第3层的CD133表达为（17．16±0．42），与第2层、4层比较，差异有统计学意义（P〈0．05），但与第1层比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。侵袭实验可见第3层细胞穿透的数量最多（92．750±4．432），与其他各层比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论利用Percoll连续梯度密度离心法成功地富集了肝癌干细胞，经验证符合肿瘤干细胞生物学特性，为肝癌的靶向治疗、多重耐药等基础研究提供了确切的研究对象。; 王兴刘卫辉夏宁张娟杨建栋王涛尤楠龚振斌季茹赵戈窦科峰; 关键词：肝细胞干细胞细胞分离

小分子干扰RNA介导的RhoA沉默优化胎肝干细胞培养被引量：3: 2012年; 背景:细胞移植治疗是目前的研究热点之一,寻找良好的细胞来源并有效扩增,是大量临床应用的基础。目的:通过沉默RhoA基因优化胎肝干细胞培养方法。方法:体外培养胎肝干细胞,经小分子干扰RNA转染以沉默RhoA基因表达,分为3组:A组为干细胞组,B组为经随机打乱顺序的小分子干扰RNA转染干细胞组,C组为经小分子干扰RNA转染的干细胞组。应用反转录-聚合酶链反应、Western blot法检测胎肝干细胞在转染前后RhoA基因和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法观察细胞生长的优化作用;流式细胞术测定细胞周期分布的变化。结果与结论:转染小分子干扰RNA后C组与A、B组相比,RhoA基因和蛋白表达量明显降低(P<0.05),细胞的生长速度明显增快,细胞周期G0/G1期减少,S期细胞数增多,各组间差异有显著性意义(P<0.05)。提示通过沉默RhoA基因的方法可以促进胎肝干细胞增殖,对其培养有优化作用。; 赵戈刘卫辉王涛王兴夏宁杨平寇明文张宁陶开山; 关键词：胎肝干细胞细胞培养 RHOA

贵阳市花溪区7～9岁小学生口腔健康状况调查分析被引量：5: 2014年; 目的调查贵阳市花溪区7～9岁小学生龋病流行情况,为制定针对性预防措施提供科学依据。方法按照《第三次全国口腔健康流行病学调查方案》的原则,采用整群抽样和分层抽样的方法,对花溪区的部分7～9岁小学生进行口腔健康检查,对结果进行统计学分析。结果检查的5759名儿童中,整体乳牙患龋率为63.1%,乳牙龋均为4.37；龋齿充填率为9.77%；第一磨牙萌出率为98.3%,患龋率为10.1%,而且随着年龄增加,第一磨牙患龋率明显升高。结论贵阳市花溪区儿童虽然乳牙患龋率低于全国平均水平,但龋齿充填率较低；第一磨牙患龋率高达10.1%,提示应加强对龋病的防治措施。; 杨振祥张娟王兴黄霞郑丹赵吾华罗松; 关键词：小学生口腔健康

miR-200a在肝癌干细胞中的差异表达及其作用: 2014年; 目的:分离肝癌细胞系MHCC97-H中肝癌干细胞并分析miR-200a在肝癌干细胞和非肝癌干细胞亚群中的表达差异,探讨miR-200a的表达水平与肝癌干细胞之间的关系。方法:利用流式细胞荧光激活分选法从MHCC97-H中分选出肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)和非肝癌干细胞(non-liver cancer stem cells,non-LCSCs)两个亚群;采用real-time PCR检测miR-200a在两个亚群中的表达差异;在MHCC97-H中瞬时转染miR-200a-mimic,检测LCSCs亚群比例的变化。结果:LCSCs亚群占总体细胞的百分比为3.56%;LCSCs亚群细胞中miR-200a的表达明显低于non-LCSCs亚群(P<0.05);上调miR-200a后LCSCs亚群细胞比例为1.24%。结论:miR-200a在LCSCs亚群细胞中明显低表达,上调miR-200a后LCSCs亚群细胞比例明显降低,提示miR-200a能够调控肝癌干细胞的比例。通过调控miR-200a的表达,可以降低LCSCs亚群细胞比例,从而为肝癌的治疗提供新的思路。; 汪建林杨西胜王兴戴斌阮柏高远李海民; 关键词：肝癌肝癌干细胞

血清及肝组织miR-200a在大鼠肝癌发生过程中的动态表达分析被引量：9: 2014年; 目的分析血清及肝组织miR-200a在肝癌发生过程中的表达水平并将其与传统肝癌血清学标志物甲胎蛋白比较,探索其成为肝癌早期诊断标志物的可能性.方法二乙基亚硝胺腹腔注射诱导建立大鼠肝癌模型,建模过程中收集肝癌发展到各个阶段大鼠血液及肝脏组织.同时,临床收集正常、肝硬化、肝癌患者血液标本.用实时定量PCR技术检测血清miR-200a的相对表达情况,用酶联免疫吸附法检测血清甲胎蛋白动态变化,原位杂交法检测miR-200a在组织中表达情况.体质量数据采用两样本t检验,PCR及酶联免疫吸咐各组数据间采用单因素方差分析进行比较.结果与正常组及纤维化期大鼠相比,miR-200a在肝硬化期、肝癌早期、肝癌晚期的大鼠血清均有不同程度下调(P值均＜0.05),甲胎蛋白在肝癌早期、肝癌晚期的大鼠血清明显上调(P值均＜ 0.05).与肝硬化期大鼠比较,肝癌晚期大鼠体内的miR-200a表达显著下调(P值均＜0.05),甲胎蛋白在肝癌早期、肝癌晚期均显著上调.临床标本分析结果显示,miR-200a在肝硬化及肝癌患者中均显著下调(P值均＜0.05),甲胎蛋白仅在肝癌患者中出现异常表达.原位杂交结果显示,以正常肝组为标准,miR-200a在正常组、纤维化期、肝硬化期、肝癌早期、肝癌晚期中表达水平依次为:1.00％±0.01％、0.37％±0.03％、0.14％±0.01％、0.05％±0％、0.01％±0.00％.结论 miR-200a极大程度地参与了肝癌发生,对于肝癌发生各个阶段均有巨大的指示作用,可能作为肝癌预防和早期诊断的一个潜在标志物.; 夏宁高媛王兴刘卫辉杨建栋王涛赵戈李海民; 关键词：肝肿瘤血清甲胎蛋白类

血清miR-21及AFP在大鼠肝癌发生过程中的动态表达比较分析被引量：4: 2012年; 目的:分析血清miR-21在肝癌发生过程中的表达水平并将其与传统肝癌血清标志物甲胎蛋白(AFP)比较,探索其成为肝癌早期诊断血清标志物的可能性。方法:二乙基亚硝胺(DENA)腹腔注射诱导建立大鼠肝癌模型,建模过程中收集造癌各个阶段的血清。Realtime-PCR检测血清miR-21的表达情况,ELISA法检测血清AFP水平。结果:与正常组及纤维化期大鼠相比,miR-21在肝硬化期、肝癌早期、肝癌晚期的大鼠血清均有不同程度上调(P<0.05),AFP在肝癌早、晚期的大鼠血清明显上调(P<0.05);与肝硬化期大鼠比较,肝癌早、晚期大鼠体内的miR-21表达显著上调(P<0.05),AFP在肝癌早期、肝癌晚期均显著上调(P<0.05)。结论:血清miR-21参与了肝癌发生的过程,对于肝癌发生的各个阶段均有很大的指示作用,可能作为肝癌预防和早期诊断的一个潜在标志物。; 王兴张娟夏宁刘卫辉窦科峰; 关键词：肝癌血清 MIR-21 AFP

骨质疏松大鼠正畸牙齿移动模型中牙根吸收的比较研究被引量：1: 2011年; 目的观察骨质疏松大鼠牙齿移动模型中,牙根吸收与体内雌激素水平的关系。方法 45只2个月龄雌性SD大鼠随机分为3组,每组15只,分别接受卵巢切除术,卵巢切除术后补充雌激素和假卵巢切除术处理,待骨质疏松模型建立后,3组大鼠均在上颌第一磨牙和切牙之间安置拉簧,力值0.784 N,分别于加力后的第5天、第10天和第14天各组处死5只大鼠,取上颌第一磨牙处标本制作切片,苏木精-伊红染色,处死前取血测定体内雌激素水平。结果各组标本均可观察到牙根吸收现象,而且在骨质疏松组更为普遍,程度也更重。结论骨质疏松时,正畸牙根吸收具有更大的风险性,体内雌激素水平的高低是影响正畸牙移动时,牙根吸收的一个重要因素。; 张娟王兴杨乐王维佳丁寅; 关键词：骨质疏松雌激素牙齿移动牙根吸收 SD大鼠

绿色荧光蛋白转基因小鼠胚胎肝干细胞的分离及鉴定: 目的探索具有自发荧光标记的小鼠胎肝干细胞(FLSCs)的分离及鉴定方法.方法取孕13天绿色荧光蛋白(GFP)转基因C57BL/6J小鼠胚胎肝脏,经机械消化和胶原酶消化后,获得FLSCs克隆并扩大培养;流式细胞鉴定其干...; 黄启科陶开山张洪涛段涛李伟强王兴郑志刚

抑癌基因Tg737下调对肝癌细胞增殖的影响及其机制被引量：4: 2014年; 目的探讨下调Tg737表达对肝癌细胞增殖能力的影响及其下游机制.方法 SMMC7721和MHCC97-H细胞分别转染空白对照病毒和干扰Tg737表达的慢病毒后,用CCK-8法绘制肝癌细胞生长曲线检测其增殖能力变化.通过流式细胞仪检测肝癌细胞周期变化,并进一步检测细胞周期调控蛋白的表达变化,推断可能的分子机制.结果与转染空白对照病毒的细胞相比,稳定下调Tg737的SMMC7721和MHCC97-H细胞增殖能力增强,G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,调控细胞周期完成G1/S转化的cyclinD1的表达水平增高.结论在肝癌细胞SMMC7721和MHCC97-H下调Tg737表达可能通过上调cylinD1的表达促进肝癌细胞周期由G1期向S期转化,进而促进肝癌细胞的增殖.; 高远阮柏张卓超汪建林杨西胜戴斌周倜王兴马奔刘卫辉张福琴窦科峰; 关键词：肝癌细胞周期细胞周期蛋白

肝移植术后早期肠内营养的重要性--6名肝移植患者的统计分析: 目的肝移植术后营养支持的重要性是众所周知的,但是肠内营养(EN,Enteral Nutrition)和肠外营养(TPN,Total Parenteral Nutrition)孰优孰劣,众学者各持己见.我们中心统计了近期...; 王兴陶开山窦科峰

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