范京惠
- 作品数：128 被引量：347H指数：9
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 猪四种呼吸道疫病的关键检测技术
- 左玉柱陈东来范京惠范炜范慧霞王连群申亮朱金红赵飞苏翔王丽娟张俊欣刘媛
- 该成果为猪四种呼吸道疫病的关键检测技术，通过分子生物学方法，建立了猪四种呼吸道疫病：猪繁殖呼吸综合征、猪圆环病毒2型感染、猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病的多联PCR检测方法，该方面具备敏感特异等优点，采用对猪繁殖呼吸综合征病...
- 关键词：
- 关键词：分子生物学
- 规模化猪场生物安全措施调查与分析被引量：2
- 2023年
- 1引言近年来,我国生猪养殖模式发生了巨大变化,由农户散养模式正逐步向规模化养殖模式转变,养殖模式的转变给养殖场带来经济利益的同时,也带来了巨大的生物安全隐患。生物安全是近年来提出的有关集约化生产过程中保护和提高畜禽健康的系统化管理实践,是预防病原体和传染因子进入猪群生产的每一阶段采取的规定与措施。陆续发生的非洲猪瘟疫情凸显了生猪养殖过程中生物安全风险管理的重要性和必要性,尤其是在目前非洲猪瘟无苗可防、无药可治的大环境下。
- 张帅王俞丹郑丽丽范京惠左玉柱
- 关键词：生物安全措施畜禽健康传染因子规模化猪场规模化养殖农户散养
- 鹅细小病毒河北流行株HBZF07 NS1基因的克隆与序列分析
- 2007年
- 鹅细小病毒HBZF07株经13日龄鹅胚增殖后收集尿囊液,提取病毒基因组总DNA,采用PCR方法,一次性扩增出与预期大小相符的特异性条带。将扩增产物提纯回收后克隆入pMD18-T载体,经转化、筛选及酶切鉴定后,对阳性克隆进行了序列测定和序列分析。测序后拼接的基因长1892bp,包含完整的NS1开放阅读框(1884bp),编码623个氨基酸。与GenBank中其它毒株的NS1基因核苷酸序列相比,同源性分别为DY(EF515837)98.4%,与B(GPU25749)为99.2%,与HG5/82(AY506546)为93.9%,与YG(AF416726)为93.9%,与SHM319(GPU34761)为97.0%。
- 左玉柱范京惠张小波
- 关键词：鹅细小病毒NS1基因克隆
- 河北省猪星状病毒4型全基因组测定及遗传进化分析
- 2023年
- 为了解河北省流行的猪星状病毒(PAstV)遗传特性和重组现象,设计了7对特异性扩增引物,利用RT-PCR方法进行全基因组序列扩增;应用DNAStar软件和MEGA 7.0软件对扩增得到的序列进行拼接和核苷酸同源性分析,并建立基于全基因组和ORF2基因的系统进化树;利用生物学分析软件对全基因组序列结构特点和重组现象进行分析。结果显示,成功扩增得到1株PAstV4 HB-SJZ全基因组序列;全基因组遗传分析显示,HB-SJZ株与PAstV4参考毒株同源性显著高于其他基因型毒株,为74.2%~81.0%,与匈牙利4型毒株WBAstV-1同源性最高(81.0%);基于ORF2基因分析显示,HB-SJZ株与PAstV4参考毒株同源性为64.8%~68.9%,与日本毒株PoAstV-VIRES-GX03-C3遗传关系最近(68.9%);重组分析显示,HB-SJZ株的ORF1基因与JPN Bu52014株和JPN Mol2-32015株存在重组现象。这一研究提示河北省流行的PAstV4是同物种重组毒株,为该病的流行病学调查提供科学依据,也为该病的防控提供理论基础。
- 王晶陈少杰张帅张帅刘莹王传文李妍李妍范京惠
- 关键词：全基因组遗传进化分析
- 河北省猪圆环病毒3型流行病学调查及遗传变异分析被引量：15
- 2020年
- 为了解猪圆环病毒型(porcine circovirus3,PCV3)在河北省的流行情况及遗传变异特点,本研究在2017年2月至2018年7月间,从河北省不同地区60个猪场采集了310份不同临床症状表现的发病猪组织样本,应用PCR方法对其进行检测。结果显示该地区PCV3阳性率为16.5%(51/310),猪场阳性率为45.0%(27/60),对不同临床症状发病率分析显示PCV3在表现为繁殖障碍及腹泻猪群中具有较高的阳性率,且易与PCV2发生共同感染。对获得的8株PCV3的cap基因进行测序及同源性分析显示,所得8条序列之间的核苷酸相似性为98.0%~99.7%,与24条国内外参考株之间的核苷酸相似性为98.0%~100.0%。对cap基因所推导的氨基酸序列进行分析发现cap基因的主要突变位点发生在24,27,77及150位,其中24和27位主要发生了A24V和R27K变异。对32条序列进行进化树的构建发现,进化树可分为3a、3b和3c 3个基因群,河北分离株主要分布于3a基因群和3c基因群,表明了河北省PCV3流行株相对稳定。我们的研究结果为PCV3在河北省的流行及进化特点提供了理论参考,这些数据可为该地区PCV3的诊断及综合防控提供科学依据。
- 师乾凯张增贤贾敬亮张迪管朔侯林杉范京惠左玉柱
- 关键词：流行病学调查
- 哺乳仔猪腹泻防治技术
- 范京惠左玉柱秦顺义仝军王云霄张磊郭红斌范炜张彦昌刘观中赵月兰秦建华
- 该课题组在河北省哺乳仔猪腹泻进行了广泛调查的基础上，课题课题组经过三年的努力研究，提出了 “哺乳仔猪腹泻防治技术”成果。该成果为仔猪黄白痢，猪传染性胃肠炎的的控制提出了关键技术。为了正确指导奶牛生产实践，提高奶牛养殖经济...
- 关键词：
- 关键词：哺乳仔猪腹泻
- pEGFP-N1-pAPN-SPC段基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中表达被引量：1
- 2014年
- 为了构建能够表达猪pAPN-SPC段的真核细胞表达载体pEGFP-N1-pAPN-SPC,并在Vero细胞中进行表达,本试验从猪肠道黏膜组织基因组中扩增出pAPN-SPC段基因,插到带有EGFP基因的真核细胞表达载体pEGFP-N1中,经Bam HⅠ及EcoRⅠ酶切鉴定正确后转染Vero细胞,用荧光显微镜检测细胞中EGFP的表达,用RT-PCR和Western blot检测pAPN-SPC段基因的表达情况。结果成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-pAPN-SPC,且pAPN-SPC段在Vero细胞中得到了有效表达,为研究pAPN-SPC段蛋白对病毒增殖效果的影响奠定了基础。
- 杨震左玉柱裴丽华范京惠
- 关键词：真核表达
- 河北省奶牛病毒性腹泻病原分离与免疫防治技术
- 赵月兰张宁左玉柱王建永范京惠秦建华张保宁高存福及连盈田席荣杜聚朝
- 该项目将危害奶牛健康的主要疾病奶牛病毒性腹泻病作为研究重点内容。采用实验室试验研究、现场试验研究等技术手段，针对当前奶牛生产中凾待解决的问题，提出了富于创新的“河北省奶牛病毒性腹泻病原分离与免疫防治技术”成果。该成果为探...
- 关键词：
- 关键词：奶牛病毒性腹泻病原分离免疫
- 河北省奶牛肢蹄病发病情况调查及防治效果观察被引量：14
- 2007年
- 赵月兰秦建华左玉柱包永占范京惠汪恩强李玉文
- 关键词：发病情况调查奶牛生产肢蹄病繁殖障碍
- CSFV、PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及其应用被引量：8
- 2019年
- 由猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的繁殖障碍性疫病在中国的不断暴发,增加了猪的发病率和死亡率。为了建立同时检测这3种病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank中这3种病毒的参考基因序列设计引物,并对反应中的影响因素进行优化,建立了同时检测CSFV、PRV和PRRSV的多重PCR方法。该方法扩增的基因片段大小分别为570(CSFV),232 (PRRSV)和173bp(PRV)。敏感性和特异性试验结果显示,该方法对3种病毒的核酸最低检出量分别为23.88(CSFV),13.10(PRRSV)和14.60pg(PRV),对大肠杆菌(Ec.oli)、沙门菌(Salmonella)、猪乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性。对2015年5月至2016年1月收集的168份临床样本检测结果显示,CSFV阳性率为24.4%,PRRSV阳性率为21.4%,提示河北省该段时间内引起猪繁殖障碍性疫病的主要病原为CSFV和PRRSV。经多重PCR检测为PRRSV、PRV或CSFV阳性的临床样本,再次使用商品化的试剂盒进行检测,符合率为100.0%。这些结果表明,本试验建立的多重PCR方法省时、高效,可用于PRRSV、PRV和CSFV感染的临床诊断。
- 顾文源范京惠邸晶美罗尚星刘宝京左玉柱
- 关键词：伪狂犬病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒
