许锦阶
- 作品数：53 被引量：134H指数：7
- 供职机构：汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律更多>>
- 腺病毒伴随病毒表达载体表达人乳头瘤病毒18型E6E7基因构建及其转化作用的鉴定被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨人乳头瘤病毒 (HPV)的E6E7基因在细胞恶性转化中所起的作用。方法 将人乳头瘤病毒 (HPV)的E6E7基因克隆至腺病毒伴随病毒表达载体中 ,通过包装的重组病毒感染 ,将E6E7基因导入并整合到永生 2 93细胞的基因组中。结果 本研究成功地构建了HPV18E6E7AAV病毒并感染了永生 2 93细胞 ,PCR Southern杂交分析表明E6E7基因在转化细胞 2 93TL中确有表达 ,转化细胞 2 93TC和 2 93TL具有明显的转化表型 ,和亲本 2 93细胞相比 ,生长速度快 ,接触抑制消失 ,集落形成率提高 2 0倍 ,且集落明显增大 ,形成时间短。结论 成功地构建了HPV18E6E7AAV病毒 ,HPV18E6E7基因可引起永生化人上皮细胞 2 93的恶性转化。此病毒可用于感染正常上皮细胞 。
- 岑山滕智平张月沈忠英许锦阶杜宾曾毅
- 关键词：人乳头状瘤病毒依赖病毒
- 淫羊藿甙对大鼠早期卵巢卵泡发育和卵母细胞凋亡影响的初步研究被引量：18
- 2007年
- 目的探讨淫羊藿甙对早期卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响。方法用淫羊藿甙对受孕11.5d大鼠灌胃[100mg/(kg·d)]直至生产,分别取淫羊藿甙灌胃组(试验组)和空白对照组中出生2d、4d、8d龄新生大鼠卵巢,用苏木素-伊红(hematoxylin-eoxin,HE)染色观察不同发育阶段卵泡比例,TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-End Labeling)荧光染色检测卵巢内卵母细胞凋亡变化,免疫组化染色观测caspase-3的定位和表达水平。结果在试验组新生大鼠,2d龄卵巢卵母细胞巢内卵母细胞比例增高,原始卵泡比例下降;4d龄卵巢中原始卵泡比例显著增高,发育卵泡比例降低;8d龄卵巢各不同发育阶段卵泡比例与对照组相一致;试验组2d卵巢内TUNEL阳性率降低;Caspase-3主要在卵母细胞巢和原始卵泡的卵母细胞中表达,2d卵巢表达水平高于4d卵巢。结论淫羊藿甙能延缓新生大鼠卵母细胞巢破裂,抑制原始卵泡的发育启动,减少卵泡的消耗;能降低2d龄卵巢卵母细胞的凋亡率,抑制卵母细胞凋亡,增加原始卵泡池的储备量。
- 黄菊罗丽莉傅玉才钱元恕许锦阶
- 关键词：卵母细胞卵泡发育CASPASE-3TUNEL
- 槲皮素对大鼠卵巢发育和卵巢寿命的影响被引量：16
- 2010年
- 背景:研究发现一些植物雌激素可改变生殖系统发育,并可能最终影响生殖衰老的年龄。槲皮素是一种黄酮类物质,具有微弱的雌激素效应,但对卵巢卵泡发育和卵巢衰老进程究竟有无影响还不清楚。目的:观察槲皮素对大鼠卵巢卵泡发育和卵巢寿命的影响。方法:健康成年SD大鼠30只雌雄按2∶1合笼所生的新生雌鼠,分为3组:母鼠灌胃组,对孕10.5d母鼠槲皮素灌胃,1次/d,直至分娩,取1,2,4d新生雌鼠;腹腔注射组,对正常出生后12h内新生雌鼠槲皮素腹腔注射,1次/d,取2,4d新生雌鼠;空白对照组:不进行任何干预的1,2,4d新生雌鼠;观察新生鼠卵巢发育情况。另取12月龄雌性大鼠22只,以数字表法随机分为实验组和对照组:实验组用槲皮素灌胃4个月,1次/d;对照组灌胃给予生理盐水。对灌胃前和灌胃期间12月龄雌性大鼠行阴道涂片,观察大鼠动情周期模式;灌胃结束后,计算卵巢和子宫系数,苏木精-伊红染色观察各期卵泡发育情况和卵泡总数变化。结果与结论:用槲皮素干预1,2d龄新生大鼠未装配的卵泡均减少,而发育更晚期阶段的卵泡即原始卵泡或发育卵泡有所增加。灌胃前大部分大鼠动情周期已经不规则,用药后,随着大鼠年龄的增长,实验组与对照组显示了相似的动情周期变化:规则的动情逐渐消失,周期变得延长或不规则,灌胃结束时均以不规则动情为主。灌胃4个月后,实验组大鼠卵巢大部分由闭锁卵泡组成,另外可见少许原始卵泡、发育卵泡以及窦状卵泡和黄体,实验组窦状卵泡较对照组增加(P<0.05),两组卵巢和子宫系数及体质量增加无差异。提示槲皮素可能具有一定促进卵巢卵泡发育和成熟的作用,但不影响卵巢寿命。
- 庄小兰傅玉才许锦阶孔晓霞陈振国罗丽莉
- 关键词：槲皮素卵泡发育
- 佛波酯和人乳头瘤病毒在细胞恶性转化作用中的协同效应被引量：2
- 2006年
- 目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）和促癌物在肿瘤诱发过程中的协同作用。方法研究选择与恶性肿瘤关系密切的癌基因和抑癌基因，利用免疫组化、Southem Blot和半定量RNA斑点杂交的方法，研究在HPV18E6E7和促癌物佛波酯（TPA）的协同作用下，这些基因在细胞内的表达。结果HPVE6E7和TPA的协同作用可以引起细胞内癌基因c-myc的扩增4-8倍，c-erbB2的表达水平提高32-64倍，并导致抑癌基因p16的表达水平下降到正常水平的1／4．1／8。结论HPVE6E7和TPA的协同作用可以引起细胞内癌基因和抑癌基因表达水平异常，可能是细胞癌变的重要原因之一。
- 岑山张月许锦阶沈忠英曾毅
- 关键词：乳头瘤病毒癌基因基因肿瘤抑制
- 新生鼠卵巢FOXO3a表达水平与卵母细胞凋亡的相关性初步研究被引量：15
- 2006年
- 目的:探讨新生大鼠卵巢中FOXO3a(forkhead box groupO)转录因子表达水平与卵母细胞凋亡的相关性。方法:取出生后2d、3d、8d、15d龄大鼠的卵巢,用免疫组化方法观察FOXO3a、caspase-3在卵巢组织中的定位及表达水平,且用TUNEL技术检测卵巢内卵母细胞的凋亡变化。结果:FOXO3a在新生大鼠部分卵母细胞巢内的卵母细胞核内高表达,而在卵泡发育启动后,FOXO3a则从卵母细胞的核内逐渐转移至胞浆。而在次级和成熟卵泡的卵母细胞内,FOXO3a仅出现在胞浆内。≤8d龄大鼠卵巢的部分卵母细胞核内或胞核、胞浆内可检测到caspase-3表达,2d、3d龄大鼠部分卵母细胞核内高表达。TUNEL染色与caspase-3结果相似,2d龄大鼠卵巢的卵母细胞阳性率最高。结论:生后2d大鼠卵巢的卵母细胞存在一个凋亡高峰期;在原始卵泡形成前,FOXO3a在部分卵母细胞核内高表达,并与卵母细胞的凋亡率呈一致性。
- 隋旭霞罗丽莉傅玉才郭宪国许铭炎许锦阶
- 关键词：卵母细胞凋亡FOXO3ATUNEL
- 淫羊藿甙腹腔注射对新生大鼠卵巢发育的影响被引量：10
- 2010年
- 目的应用淫羊藿甙对新生大鼠进行腹腔注射,了解其对卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响。方法用淫羊藿甙对出生后1～8d大鼠腹腔注射50mg/(kg·d),分别取出生后2、4、8d龄卵巢,用苏木素-伊红(hematoxylin-eoxin,HE)染色观察不同发育阶段卵泡比例,末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL)荧光染色检测卵巢内卵母细胞凋亡变化。结果在淫羊藿甙腹腔注射组的新生的鼠中,1、2d龄卵巢内未装配卵泡比例及4、8d龄卵巢内原始卵泡比例均高于对照组;各日龄组卵巢中卵母细胞TUNEL阳性率明显低于对照组。结论淫羊藿甙可能通过延缓卵母细胞巢破裂,抑制原始卵泡的发育启动,减少卵母细胞凋亡从而增加新生大鼠卵巢中卵母细胞的储备量。
- 黄菊傅玉才许锦阶罗丽莉
- 关键词：卵泡发育淫羊藿甙腹腔注射TUNEL
- 用人食管鳞状细胞癌移植建立裸小鼠移植瘤模型
- 1995年
- 将６例人食管癌的手术切除组织移植于ＮＩＨ裸小鼠皮下，其中３例移植成功并能传代，建成３林人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤，其病理组织学特点均与原人体肿瘤相似，染色体分析显示人类恶性肿瘤特征，电镜下形态属鳞状细胞癌，移植瘤中证实有。Ａｌｕ序列存在，表明它们来源于人类组织。３年多来３株移植瘤生长稳定，传代成功率达１００％。
- 许锦阶沈健游绍进沈忠英
- 关键词：肿瘤移植食管鳞状细胞癌移植瘤动物模型
- 人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤模型建立及其应用研究被引量：5
- 1997年
- 将人食管癌手术标本直接移植于裸小鼠，建立了人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤（Eca910709），其光镜和电镜形态与原发瘤相似。移植瘤中检测到人Alu序列，证明其来源于人体。应用Eca910709，用平阳霉素（BLMA5）对其进行治疗，按15mg／kg腹腔注射给药，经重复实验，抑瘤率为58％-70％（P＜0．01），说明BLMA5对Eca910709有明显的抑瘤作用。经三个疗程治疗，Eca910709即对BLMA5产生耐药，表现在抑瘤从70％（P＜0．01）递减为34％（P＜0．05）和6％（P＞0.05）。给药剂量增加至30mg/kg，BLMA5对已耐药的Eca910709再次显示一定的抑瘤作用（抑瘤率为44％，P＜0．01）。
- 许锦阶沈健游绍进沈忠英
- 关键词：食管鳞状细胞癌移植瘤模型平阳霉素
- 二甲基亚砜和珍黄注射液联合用药对小鼠宫颈癌的抗癌作用
- 2001年
- 目的 :探讨二甲基亚砜 (DimethlSulphoxide ,DMSO)和珍黄注射液 (Zhenhuanginjection ,ZHI)联合用药对小鼠宫颈癌的抗癌作用 ,为临床试验提供科学依据。方法 :用DMSO( 50mg/kg)、ZHI( 2 0mg/kg)、DMSO +ZHI(DMSO 50mg/kg ,ZHI 2 0mg/kg)分别对小鼠宫颈癌U14腹水瘤模型和实体瘤模型进行治疗 ,以生命延长率和抑瘤率作为疗效评价指标。实验重复两次。结果 :在腹水瘤治疗实验 ,DMSO组、ZHI组、DMSO +ZHI组的生命延长率分别为 2 1.37%～ 2 5.86%、4 1.38%～ 4 3 .59%、65.81%～ 69.83 % ,经统计学分析 ,三个治疗组与对照组比较均有极显著性差异 (P <0 .0 1) ,联合用药组 (DMSO+ZHI组 )与单药组 (DMSO组或ZHI组 )比较均有极显著性差异 (P <0 .0 1)。在实体瘤治疗实验 ,DMSO组、ZHI组、DMSO +ZHI组的抑瘤率分别为 2 2 .50 % 2 5.83 %、37.50 % 4 1.67%、60 .83 % 68.33 % ,经统计学分析 ,三个治疗组与对照组比较均有显著或极显著性差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,联合用药组与单药组比较均有极显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :ZHI对小鼠宫颈癌U14有一定的抗癌作用 ,DMSO和ZHI联合用药能起增效作用。
- 罗丽莉许锦阶徐虹徐小虎
- 关键词：宫颈癌抗癌作用小鼠联合用药
- 酵母双杂交诱饵蛋白LASS1融合表达质粒的构建及鉴定
- 2008年
- 目的构建酵母双杂交系统诱饵蛋白大鼠LASS1融合表达质粒,为进一步筛选大鼠脑神经元内与LASS1p相互作用的蛋白奠定基础。方法应用PCR方法获得大鼠LASS1基因2个片段,分别克隆入酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,转染酵母菌AH109并检测重组质粒的自激活现象及毒性。利用Western印迹检测重组质粒在AH109的表达情况。结果LASS1基因的PCR产物片段大小分别为Flag(111bp)、Slag(109bp);Western印迹结果表明2个重组质粒表达的蛋白均可以与抗c-Myc抗体在22kU处特异性反应;重组质粒转化酵母后无自激活作用。结论重组质粒pGBKT7-Flag、pGBKT7-Slag均能够在AH109内正确表达,可作为酵母双杂交系统诱饵蛋白使用。
- 刘居理傅玉才许铭炎许锦阶
- 关键词：酵母双杂交诱饵蛋白
