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赵坤

作品数：4 被引量：17H指数：3
供职机构：广东医学院更多>>
发文基金：国家教育部博士点基金广东省科学事业费计划项目博士科研启动基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 3篇细胞
  • 3篇分子
  • 2篇树突
  • 2篇树突状
  • 2篇淋巴
  • 2篇淋巴细胞
  • 2篇T淋巴细胞
  • 2篇T淋巴细胞弱...
  • 2篇BTLA
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇弱化
  • 1篇受体
  • 1篇受体-1
  • 1篇树突状细胞
  • 1篇细胞表面
  • 1篇小鼠
  • 1篇克隆
  • 1篇克隆表达
  • 1篇基因

机构

  • 4篇广东医学院
  • 3篇华中科技大学

作者

  • 4篇赵坤
  • 4篇徐军发
  • 3篇龚非力
  • 2篇黄保军
  • 2篇熊平
  • 2篇方敏
  • 1篇胡国艳
  • 1篇郑芳
  • 1篇杨衡
  • 1篇冯玮
  • 1篇沈关心
  • 1篇徐勇
  • 1篇袁春雷

传媒

  • 2篇细胞与分子免...
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇国际免疫学杂...

年份

  • 2篇2007
  • 2篇2006
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
小鼠BTLA胞外功能区基因克隆表达及其对DC表面B7分子表达的影响被引量：5
2006年
目的:研究重组谷胱甘肽S-转移酶(GST)-小鼠B/T细胞弱化因子包外功能区(mBTLAext)融合蛋白(GST-mBT-LAext)对小鼠树突状细胞系DC2.4表面B7分子表达的影响。方法:采用RT-PCR技术从小鼠脾细胞总RNA中逆转录mB-TLAcDNA。将其胞外功能区基因克隆入原核表达载体pGEX-4T-2中,构建重组表达质粒pGEX-4T-2/mBTLAext并转化E.coliBL21(DE3),以1mmol/L的IPTG诱导表达。提取包涵体,经变性、负性后,采用GlutathioneSepharose4B柱纯化可溶性的GST-mBTLAext。将不同浓度的GST-mBTLAext加入到DC2.4的培养体系中,采用流式细胞术检测其对DC上B7-1和B7-2表达的影响。结果:成功地克隆了mBTLA基因,并构建了重组原核表达载体。变性、复性,经GlutathioneSepharose4B柱纯化,获得了可溶性的GST-mBTLAext融合蛋白。经SDS-PAGE鉴定表明,融合蛋白的相对分子质量(Mr)为43000,同预期的结果一致。流式细胞术检测显示,GST-mBTLAext可上调DC2.4上B7-1的表达并呈剂量依赖性,这一作用可被抗GST-mBTLAext血清阻断。未检测到GST-mBT-LAextDC2.4上B7-2的表达有影响。结论:BTLA对DC2.4表面B7分子表达的上调可能是BTLA-HVEM途径反向信号对DC作用的结果,对进一步研究其对DC生物学行为的影响及其分子机制具有重要的理论意义。
徐军发赵坤黄保军熊平方敏沈关心龚非力
关键词：树突状细胞B7分子
小鼠B7-H4基因克隆及真核表达载体的构建被引量：9
2007年
目的:克隆小鼠B7-H4(mB7-H4)基因cDNA全长,构建表达跨膜型mB7-H4-GFP融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-GFP和表达可溶性mB7-H4-Fc融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-Fc。方法:采用RT-PCR技术从小鼠脾细胞总RNA中逆转录mB7-H4cDNA,将其全长cDNA去掉中止密码克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,并转染293T细胞使其表达跨膜型mB7-H4-GFP融合蛋白;将其胞外功能区cDNA克隆入pcDNA3·1-hFc真核表达载体中,并转染COS-7细胞使其表达可溶性mB7-H4-Fc融合蛋白。结果:序列测定证实克隆的mB7-H4全长cDNA阅读框正确完整,酶切和序列测定证实mB7-H4分别正确插入pEGFP-N1和pcDNA3·1-hFc载体中,两种表达载体分别转染293T细胞和COS-7细胞后可分别表达跨膜型mB7-H4-GFP和可溶性mB7-H4-Fc。结论:成功地克隆mB7-H4基因并构建了两个真核表达载体,它们可分别表达跨膜型和可溶性融合蛋白。
徐军发袁春雷杨衡赵坤胡国艳龚非力
关键词：B7-H4真核表达基因克隆
B/T细胞弱化分子—CD28超家族一个新的共抑制分子的研究进展被引量：1
2007年
B/T 细胞弱化分子(BTLA)是最近发现的 CD28家族共抑制分子,主要表达于 B 细胞、T 细胞和抗原递呈细胞表面。BTLA 的配体是 TNF 超家族成员疱疹病毒进入介质(HVEM)。HVEM-BTLA 信号途径对 T、B 细胞的活化起负调节作用,在调节机体免疫应答,维持自身免疫稳定中起着十分重要的作用。深入研究 BTLA 的生物学功能及其作用机制对探寻治疗肿瘤、自身免疫性疾病、移植排斥反应、变态反应性疾病等的新干预措施具有重要意义。
徐军发赵坤
可溶性小鼠BTLA对树突状细胞表面B7-1和B7-2表达的影响被引量：3
2006年
目的研究可溶性小鼠B／T淋巴细胞弱化因子(murine B and T lymphocyte attenuator, mBTLA)-人IgG1 Fc融合蛋白(mBTLA-hIg)对树突状细胞表面共刺激分子表达的影响。方法克隆mBTIA基因,构建mBTLA胞外功能区和人IgG1 Fc融合基因的真核表达载体(pmBTLA-hIg),并采用脂质体转染法,将pmBTLA-hIg质粒转染小鼠树突状细胞系(DC2.4)。采用RT-PCR、ELISA和Western blot分别检测pmBTLA-hIg质粒转染DC中mBTLA基因mRNA的表达及细胞培养上清中mBTLA-hIg融合蛋白的表达;采用流式细胞术检测pmBTLA-hIg质粒转染对DC2．4表面共刺激分子B7-1(CD80)和B7-2 (CD86)表达的影响。结果成功克隆了小鼠BTLA基因,并构建了真核表达载体;mBTLA-hIg融合基因转染的DC高表达mBTLA-hIg融合蛋白,并可结合到DC表面。表达可溶性mBTLA-hIg融合蛋白的DC2．4表面B7-1的表达上调,B7-2的表达下调,而且这种改变可被兔抗GST-mBTLA血清阻断。结论可溶性mBTLA-hIg融合蛋白对DC细胞表面B7分子的表达具有调节作用,可能是BTLA反向信号作用于DC的结果。
徐军发赵坤黄保军熊平冯玮徐勇方敏郑芳龚非力
关键词：共刺激分子
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