赵忠良
- 作品数：59 被引量：192H指数：8
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校骨干教师资助计划军队杰出人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 维甲酸诱导前列腺癌细胞DU-145凋亡有关的基因克隆被引量：8
- 2000年
- 目的 克隆维甲酸诱导的前列腺癌细胞 DU- 145凋亡的未知相关基因 .方法 以全反式维甲酸 (all- trans retinoicacid)诱导前列腺癌细胞系 DU- 145细胞凋亡 ,在此基础上 ,采用基于 PCR技术的改良消减杂交方法克隆前列腺癌凋亡相关基因 .结果 成功克隆出一条与凋亡可能有密切关系的未知基因 pcar,已被 Gen Bank收录 ,登录号为 AF174394.结论 维甲酸诱导前列腺癌细胞 DU- 145凋亡的过程是一个多基因参与的复杂过程 。
- 邵晨朱峰晏伟赵忠良柴玉波王成济邵国兴
- 关键词：前列腺癌维甲酸克隆
- 出血热病毒抗原与其抗独特型抗体基因的研究被引量：1
- 1996年
- 为了解抗独特型抗体与抗原的基因特征和相互关系。方法采用基因工程方法，从分泌肾病综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）内影像型抗独特型人单克隆抗体杂交瘤细胞系（Ｃ８），克隆获得的抗ＨＦＲＳＶＩｄ人单克隆抗体重链和轻链可变区基因，并与出血热病毒基因进行了比较。结果抗Ｉｄ人单克隆抗体重链可变区第４５～５５位氨基酸序列和轻链可变区第５８～６８位氨基酸序列，均与出血热病毒Ｇ２膜蛋白的第４４７～４５７位氨基酸序列高度同源，而且同源区域具有相似的蛋白质二级结构。结论抗Ｉｄ人单克隆抗体模拟抗原具有一定的分子基础。
- 高磊陈苏民陈南春赵忠良刘新平
- 关键词：病毒性出血热肾病综合征
- 新基因Restin的克隆及比较生物学分析被引量：12
- 2002年
- 采用PCR介导的减法杂交技术,从全反式维甲酸诱导的HL-60细胞中克隆得到一新基因,该基因编码219个氨基酸.借助生物信息学分析技术,发现该基因表达蛋白与神经细胞生长抑制因子（Necdin）的功能结构域高度同源（49％）,均为碱性蛋白,命名为Restin（细胞静息相关蛋白）.更有意义的是,同源搜索发现Restin,Necdin和Mages（黑色素瘤相关抗原家族）为同一蛋白家族,提示Restin和Mages是两类具有某种联系而功能又不同的蛋白质.对所有这些蛋白进行综合分析发现,它们分别属于两个不同的亚家族,碱性蛋白家族和酸性蛋白家族,其中Restin,Necdin和Mage D1含有碱性同源结构域（理论pI为8.6～10.1）,主要在终末分化细胞中表达,在肿瘤组织极少表达或不表达,实验结果表明,Necdin可以与转录因子（E2F1）及p53相互作用,从而抑制细胞增殖,推测此类蛋白可能与细胞静息状态相关;而 Mage A,C等表现为酸性同源结构域（理论pI为4.2～4.9）,主要在肿瘤组织和胎儿组织中表达,推测此类蛋白可能与细胞增值有关.这两类蛋白是否构成一对与细胞周期调控相关的正负系统值得进一步深入研究.
- 赵忠良路凡朱峰杨辉柴玉波陈苏民
- 关键词：基因克隆生物信息学
- 人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测被引量：3
- 2006年
- 目的:获得大量重组人α防御素(HDα)并检测其活性,为其深入研究提供必要的材料。方法:体外化学合成得到带有羟氨裂解位点编码序列的HDα基因片段,克隆入pBV220-IL-4表达载体构建重组表达载体pBV220-IL-4-HDα。测序正确后将重组质粒转入大肠杆菌DH5α中进行温度诱导表达。经羟氨裂解去除IL-4后,对所得蛋白进行纯化、复性,以SDS-PAGE和生物学活性检测鉴定其特性。结果:经温度诱导后,融合蛋白主要以包涵体的形式表达,表达产物约占菌体总蛋白的20%;羟氨裂解切除IL-4后,所得目的蛋白的纯度约为99.8%。抑菌活性试验和克隆形成试验显示,所得HDα对细菌生长有明显的抑制作用。结论:成功地构建了HDα基因的重组表达质粒,获得稳定表达的工程菌,并建立了复性与纯化技术,为进一步对其进行功能研究与应用奠定了基础。
- 傅海燕张剑路凡蒲勤王孝功卢兹凡徐俊卿赵忠良
- 关键词：纯化生物学活性
- 特异性转移因子对人AFP促进小鼠H22腹水肝癌细胞RNA合成的拮抗效应被引量：2
- 1993年
- 用亲和层析法从3～5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP.用纯化AFP免疫小鼠,取其脾脏按匀浆透析法制备AFP特异转移因子(SP-TF),取正常未免疫鼠脾脏制备非特异转移因子(N—TF),从预接种小鼠腹水中分离Hz2腹水肝癌细胞(H22细胞),体外用[3H]—UR参入方法,从转录水平观察SP—TF对AFP促进小鼠H22细胞生长的拮抗效应。结果表明:SP—TF对AFP促进H22细胞RNA合成具有非常显著的拮抗效应。此效应具有抗原特异性和供体依赖性。
- 许卫民李树凯王易伦赵忠良王国华苏成芝
- 大肠杆菌硫氧还蛋白基因的克隆及序列测定被引量：3
- 1997年
- 获取大肠杆菌硫氧还蛋白基因（trxA），并进行序列测定，为今后研究其机理及应用创造条件．方法：用PCR法从大肠杆菌DNA中扩增trxA基因编码区，重组入pUC19质粒载体，用双脱氧法测定目的基因序列．结果：从大肠杆菌中成功地扩增到trxA基因，测出的序列与已知基因序列一致．结论：构建了trxA基因的重组克隆，为以后的深入研究奠定了基础．
- 刘慧萍柴玉波赵忠良陈苏民陈南春
- 关键词：大肠杆菌基因扩增硫氧还蛋白
- 人牙周膜成纤维细胞与牙龈成纤维细胞差异表达一条新基因的克隆被引量：4
- 2000年
- 目的 :克隆人牙周膜成纤维细胞 (periodontalligamentfibroblast,PDLF)与牙龈成纤维细胞 (gin givalfibroblast,GF)差异表达的新基因。方法 :采用基于PCR和消减杂交的基因克隆技术构建体外培养的人PDLF与GF差异表达基因的扣除文库 ,采用酶切和反向杂交的方法筛选目的克隆 ,并进行测序和计算机分析。结果 :从构建的人PDLF与GF细胞差异表达基因的扣除文库中筛选到 818bp新基因。结论
- 郭希民吴补领肖明振蒲勤赵忠良
- 关键词：牙周膜成纤维细胞牙龈成纤维细胞基因克隆
- 基因芯片与生物信息学被引量：1
- 2000年
- 赵忠良
- 关键词：生物信息学基因芯片遗传信息
- p53对restin基因转录表达的调控作用被引量：1
- 2006年
- restin基因是Zhu等人从全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导肿瘤细胞分化时克隆得到的一种黑色素瘤抗原相关基因．前期研究表明,该基因与细胞周期阻滞有关．由于p53在细胞增殖调控中占据重要地位,并且与维甲酸具有诱导关系,因此本研究试图揭示维甲酸诱导restin基因表达是否与p53有关．将p53转染真核细胞,研究restin与p53的表达关系．结果表明p53能诱导restin基因转录增加．进一步分析发现,restin基因5′端上游约2 kb基因组序列中存在p53蛋白结合位点．扩增该序列构建荧光报告系统,检测到该报告系统可以接受维甲酸的诱导调控．在此基础上,研究p53对缺失p53结合位点的截短体报告质粒和p53结合位点突变后的报告质粒的作用,结果显示p53调控restin基因的表达与该基因上游序列区中的p53结合位点无关,推测p53对restin基因的表达调控可能还存在其他分子的相互作用．
- 王瑞华路凡傅海燕杨国栋吴有盛卢兹凡赵文明赵忠良
- 关键词：RESTINP53全反式维甲酸
- 中间普氏菌内毒素刺激人牙周膜细胞上调表达基因的研究被引量：1
- 2003年
- 目的 :用基因芯片研究中间普氏菌内毒素刺激前后 ,牙周膜细胞上调表达基因。方法 :应用点样数 5 12点的基因芯片分析中间普氏菌内毒素刺激人牙周膜细胞上调表达基因。结果 :研究发现中间普氏菌内毒素刺激牙周膜细胞后有 6条上调基因 ,其中部分基因与蛋白激酶和蛋白磷酸酶有关。结论 :牙周致病菌内毒素刺激牙周膜细胞后 ,可引起部分基因表达上调 ,从而影响牙周膜细胞正常的生理功能。
- 张贤华张斌赵忠良陈苏民吴织芬黄明霞
- 关键词：中间普氏菌内毒素基因芯片牙周膜细胞
