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来源于西洋梨的苹果茎沟病毒分离物基因组分子特性研究被引量：2: 2017年; 为了获得来源于西洋梨红贝雷沙寄主潜带苹果茎沟病毒(ASGV)分离物的基因组全长序列,并明确其分子特性,采用RT-PCR、RACE末端克隆及生物信息学方法,对ASGV分离物基因组全长进行序列测定,并对其序列特点进行分析。结果发现,来源于西洋梨的ASGV-HB分离物的基因组全长序列为6 496 nt(Gen Bank登录号:KU605672),含有2个开放阅读框ORF1、ORF2及2个可变区Ⅵ、Ⅶ。序列分析表明ASGV-HB与Gen Bank登录的18个ASGV分离物的基因组全长核苷酸序列同源性为80.6%~87.7%;ORF1和ORF2编码的氨基酸同源性分别为84.3%~92.3%和94.4%~98.7%;Ⅵ和Ⅶ可变区的氨基酸序列同源性分别为22.9%~68.8%和48.8%~92.2%;系统发育树分析显示,来源于不同国家的相同寄主的ASGV分离物聚集为同一分支。结果表明,ASGV的分子变异无地域相关性,具有一定的寄主选择性,研究结果为进一步探究ASGV的群体遗传进化机制及其防治提供了重要的分子信息。; 张雪娇王利平赵振军郑银英陈婕崔百明; 关键词：苹果茎沟病毒同源性

库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒RNAi技术抗病研究: 为了初步研究苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)中CP、MP基因的功能及致病相关性,根据Genbank中登录的ACLSV序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增CP基因5′端序列377bp(PCR-CLA)和MP基因3′端序列3...; 李诗林郑银英都业娟乔亚红田桂英向本春; 关键词：苹果褪绿叶斑病毒克隆 RNAI载体; 文献传递

抗黄瓜花叶病毒RNAi载体的构建及烟草的转化(摘要)(英文)被引量：4: 2010年; [目的]构建抗黄瓜花叶病毒RNAi载体,并将载体转入烟草。[方法]采用RT-PCR方法,扩增黄瓜花叶病毒NS04加工番茄分离物的RNA2基因组的序列。选取CMV RAN2基因组中的复制酶片段作为靶序列,构建pBi35SCR2真核表达载体,并对表达载体时行鉴定;通过农杆菌介导的方法将表达载体转入烟草,用PCR的方法检测载体是否转入。[结果]系统进化树分析结果表明,RNA2中编码CMV-2a的序列与中国浙江的DQ412731分离物有较高核苷酸及氨基酸同源性,分别达到98.0%和96.5%;PCR结果表明,试验成功构建了pBi35SCR2真核表达载体,并成功将表达载体转入烟草。[结论]试验获得的转基因烟草可作为后期攻毒试验的材料,并为研究加工番茄抗黄瓜花叶病毒奠定了基础。; 张瑜郑银英赵峰玉乔亚红崔百明向本春Yin-yingFeng-yuYa-hongBai-mingBen-chun; 关键词：黄瓜花叶病毒烟草 CUCUMBER MOSAIC VIRUS CUCUMBER MOSAIC VIRUS RNA2

新疆石河子、伊宁地区黄瓜花叶病毒株系分化被引量：8: 2013年; 为了研究新疆黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)分子变异及株系分化,对从石河子和伊宁地区采集的205个加工番茄、23个辣椒、4个番茄、2个南瓜样品进行酶联免疫检测和RT-PCR检测。在4种寄主上均检出了亚组Ⅰ型CMV,其中加工番茄的感染率高达74.15%。进一步对来自辣椒的YN-6、LJ-4、L-10,加工番茄的S1-1、S1-14,番茄的YN-2,以及南瓜的YN-9等7个样品CP、RNA3、MP核苷酸序列进行相似性和进化树分析。7个样品与CMV亚组ⅠB株系分离物的相似性较高、亲缘关系最近,均可归为CMV亚组ⅠB。而来自辣椒的LJ-4、L-10与其余5个样品的序列相似性较低,亲缘关系较远,在进化树上形成独立分支。说明在新疆加工番茄及其它蔬菜上广泛流行的CMV存在分子变异。; 程朝玲向本春崔百明郑银英; 关键词：黄瓜花叶病毒血清学 RT-PCR 株系分化

CMV 2b和TOMV CP酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活效应检测: 2011年; 通过RT-PCR从CMV和ToMV新疆分离物中扩增出CMV 2b和ToMVCP这2个基因,按正确方向将目标片段分别插入诱饵载pSos中,并将重组质粒导入酵母温度敏感酵母菌株cdc25H,检测其表达产物对酵母Sos恢复系统Ras信号通路的激活作用和对酵母细胞温敏特性影响。结果表明,这2个诱饵载体构建成功,对酵母菌株cdc25H无毒性和对Sos恢复系统无激活作用。为利用酵母双杂交系统研究加工番茄病毒的感染机制和病毒-寄主相互作用及防治加工番茄病毒病奠定了基础。; 王子华郑银英崔百明向本春; 关键词：CMV TOMV 酵母双杂交系统

左家地区大型真菌资源调查(第Ⅱ报)被引量：4: 2002年; 在《吉林左家地区大型真菌资源调查 (第Ⅰ报 )》的基础上 ,继续报道本地区大型真菌 2 5科 43属5 2种 ,其中灰环粘盖牛肝菌Suilluslaricinus (Berk inHook )O Kuntze和云南绒盖牛肝菌Xerocomusyunna nensis (Chiu)Tai为吉林省新记录种。凭证标本存放在吉林农业大学菌物标本馆 (HMJAU)。; 图力古尔刘洪章宋惠李新宇郑银英李玉; 关键词：资源调查大型真菌

陆地棉GAI基因原核表达与多克隆抗体制备: 2009年; DELLA蛋白是GA信号响应的关键负调节因子,本文采用基于EST的电子克隆方法,从棉花中克隆了DELLA蛋白家族的一个成员GhGAI。根据电子克隆序列,从陆地棉花胚珠cDNA中扩增得到GhGAI全长基因片段。将其在原核中表达,得到了分子量(Mr)为62000的蛋白质条带。表达蛋白经His-Tag亲和层析纯化后,对兔子进行免疫,制备的抗血清通过间接ELISA检测,具有较高的效价和特异性。; 郑银英崔百明祝建波廖文斌张根发彭明; 关键词：陆地棉多克隆抗体

大叶落地生根STM基因植物表达载体构建及烟草转化被引量：2: 2012年; 为了研究大叶落地生根中(Kalanchoe daigremontiana)的KdSTM基因对侧芽的形成具有一定的促进作用。采用RT-PCR技术以大叶落地生根叶片边缘的小植株的总cDNA为模板,克隆得到KdSTM基因。KdSTM开放阅读框750 bp,编码249个氨基酸残基。为进一步研究该基因是否具有促进植物芽再生的作用,构建了p35S::KdSTM植物过表达载体,利用农杆菌介导将植物表达载体侵染烟草,转化植株经分子鉴定.成功获得转基因烟草植株。通过对转基因烟草试管苗和野生型试管苗的表型观察,发现二者的表型存在有很大的差异。转基因型烟草的叶片浓绿,早期出现较小分枝侧芽,而野生型未出现侧芽。本研究的结果表明克隆的大叶落地生根中KdSTM基因具有生物学活性,对侧芽的形成具有一定促进的作用。; 游义霞黄先忠郑银英崔百明; 关键词：克隆 KNOX

海岛棉一个成花素类似基因的克隆和生物信息学分析被引量：1: 2011年; 【目的】海岛棉成花素类似基因的克隆及生物信息学分析。【方法】利用RT-PCR技术,从海岛棉中克隆成花素FLOWERING LOCUS T(FT)的同源基因,并进行生物信息学分析。【结果】从新海14号花后15 d纤维中,克隆到一个棉花成花素类似基因FLOWERING LOCUS T-LIKE 1,命名为GbFTL1。该基因的开放阅读框为525 bp,编码174个氨基酸。蛋白比对表明GbFTL1和AtFT的相似性为79.3%,和陆地棉GhFTL1的相似性为99.4%,GbFTL1第37位氨基酸为Asn(N),而GhFTL1第37位氨基酸为Ser(S)。GbFTL1含有FT蛋白亚家族两个关键的氨基酸残基及14个保守氨基酸,系统进化树分析表明GbFTL1属于FT亚家族成员。【结论】GbFTL1基因可能为海岛棉中促进开花的基因之一。; 东锐张坤顾超郑银英崔百明黄先忠; 关键词：成花素海岛棉克隆

来源于桃和苹果的苹果褪绿叶斑病毒的部分分子生物学特性和cp基因的原核表达被引量：6: 2007年; 从桃和苹果上分离得到苹果褪绿叶斑病毒ACLSV-HBP和ACLSV-C2个分离物,采用RT-PCR法进行扩增,所获扩增片段经序列测定,其全长分别为1768nt(ACLSV-HBP)和1751nt(ACLSV-C)。这2个分离物扩增片段全长的同源性为83%,mp基因片段核苷酸和推导编码氨基酸序列同源性分别为82.6%和87.1%;cp基因均由582nt组成,其核苷酸和推导编码氨基酸序列同源性分别为87.8%和95.9%。将2个分离物的cp基因与已报道ACLSV分离物进行序列同源性比较,结果显示ACLSV-HBP与SX/2的cp基因核苷酸序列及推导编码氨基酸序列同源性最高,分别为94.0%和96.4%。将ACLSV-HBP分离物的cp基因克隆到原核表达载体pGEX-KG,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白大小约为46kDa。Western-blot分析表明,该基因在大肠杆菌内得到高效表达,融合蛋白具有抗原性。; 郑银英王国平洪霓宋艳苏游红; 关键词：苹果褪绿叶斑病毒 CP基因分子生物学特性 SDS-PAGE分析序列同源性 RT-PCR法

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郑银英

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