黄益飞
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信更多>>
- 两种不同血清型肺炎链球菌致C57BL/6小鼠急性中耳炎的敏感性差异被引量：1
- 2013年
- 目的 比较两种不同血清型肺炎链球菌致C57BL/6小鼠急性中耳炎的敏感性.方法 实验组C57BL/6小鼠经鼓膜穿刺分别接种血清型为TIGR4和6B的肺炎链球菌,对照组采用相同方法接种等体积磷酸盐缓冲液（PBS）.观察小鼠发病情况,分别于感染后第1、3、5、7天制备中耳组织切片,HE染色观察中耳组织损伤及炎性细胞浸润变化,同时收集中耳灌洗液,检测灌洗液中细菌载量、炎性细胞数量和细胞因子含量.结果 6B组小鼠生存率明显低于TIGR4组和PBS对照组,差异具有统计学意义（P＜0.01）.接种肺炎链球菌后,小鼠中耳灌洗液中以中性粒细胞为主,TIGR4组募集的炎性细胞数量明显多于6B组;中耳灌洗液中白细胞介素6和肿瘤坏死因子α含量明显升高,其中TIGR4组细胞因子水平均明显高于6B组;6B组小鼠中耳内的细菌清除更慢.结论 在C57 BL/6小鼠急性中耳炎模型中,6B型肺炎链球菌比TIGR4型致病性更强.
- 王维周爱娥黄益飞项云何於娟
- 关键词：肺炎球菌感染中耳炎
- 听泡穿刺注射法构建C57BL/6小鼠急性中耳炎模型被引量：3
- 2015年
- 目的 探讨听泡穿刺注射法建立小鼠急性中耳炎模型的可行性和实用性.方法 采用听泡穿刺注射的方法建立C57BL/6小鼠急性中耳炎模型,造模组注射5μl肺炎链球菌19F悬液（1×10^7 CFU/ml）,对照组注射等量无菌磷酸盐缓冲液.观察注射后小鼠行为变化,分别于建模后12h、1d、2d、3d、5d、7d处死小鼠,分离中耳组织HE染色观察病理改变,同时收集中耳灌洗液检测炎性细胞数量、细菌载量及相关炎性因子含量.结果 接种1d后,中耳腔内细菌迅速增殖,产生大量肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素1β（IL-1β）,中耳黏膜基质内血管扩张充血,以中性粒细胞为主的炎性细胞逐渐渗出;接种2～3d后细菌载量开始降低,炎性因子表达水平下降,但中耳腔内炎性细胞浸润及黏膜增厚达最高水平;接种5～7d后,细菌基本被清除,中耳炎性反应逐渐消退.结论 听泡穿刺注射方法可成功构建C57BL/6小鼠急性中耳炎模型,具有较好的可行性和实用性。
- 黄益飞金春芳项云王磊王子萌王维何於娟
- 肺炎链球菌诱导中性粒细胞胞外捕获网形成被引量：4
- 2016年
- 目的初步探究肺炎链球菌诱导中性粒细胞胞外捕获网(NETs)形成的作用及调节机制,为进一步研究奠定基础。方法采用免疫磁珠法分选C57BL/6小鼠骨髓中性粒细胞,肺炎链球菌刺激中性粒细胞,分别采用脱氧核糖核酸酶(DNase)降解NETs和NADPH氧化酶抑制剂二苯基氯化碘盐(DPI)预处理中性粒细胞阻断活性氧簇(ROS)生成,免疫荧光染色观察NETs结构,检测游离DNA定量观察NETs的生成。结果肺炎链球菌刺激中性粒细胞释放NETs,DNase降解NETs结构,阻断ROS生成后NETs形成受抑。结论肺炎链球菌能够诱导NETs形成,DNase直接降解NETs或DPI抑制NETs形成可以成为调节NETs生成的有效途径。
- 金春芳黄益飞王子萌项云何於娟
- 关键词：肺炎链球菌中性粒细胞活性氧簇
- IL-17A促进中耳上皮细胞凋亡加重组织损伤被引量：6
- 2017年
- 目的建立肺炎链球菌性急性中耳炎小鼠模型,研究白细胞介素17A(interleukin 17A,IL-17A)促进中耳上皮细胞凋亡以及凋亡促进中耳组织损伤的作用。方法鼓膜穿刺术建立C57BL/6小鼠和IL-17A缺陷鼠急性中耳炎模型。收集中耳灌洗液,ELISA检测灌洗液中炎症因子和损伤标志物的表达。中耳组织石蜡切片经TUNEL染色和HE染色,观察小鼠中耳上皮细胞的凋亡和中耳组织损伤程度。采用广谱的凋亡抑制剂Z-VAD-FNK抑制凋亡后,观察中耳组织损伤的变化。结果 IL-17A显著上调白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和髓过氧化物酶(MPO)表达,加重了中耳炎症。IL-17A还促进了上皮细胞的凋亡和黏膜损伤。抑制凋亡后,显著降低了IL-17A介导的炎症反应,减轻了中耳组织损伤。结论 IL-17A可促进上皮细胞凋亡,加重中耳组织损伤。
- 王子萌王维马毓蓉范芳梅金春芳黄益飞项云刘佳丽何於娟
- 关键词：中耳炎凋亡
- 肺炎链球菌荚膜多糖加重C57BL/6小鼠中耳炎的炎症应答和中耳组织损伤被引量：1
- 2015年
- 目的:研究肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)荚膜多糖(capsular polysaccharide,CPS)对C57BL/6小鼠急性中耳炎的炎症应答和组织损伤的作用。方法:首先通过同源重组的方式构建TIGR4Δcps菌株,然后经鼓膜穿刺,分别接种5μl/耳的TIGR4和TIGR4Δcps于C57BL/6小鼠的双侧中耳腔,对照组采用相同方法接种等体积无菌磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)。观察小鼠发病情况,分别于感染后1、3、5 d制备中耳组织切片,HE染色观察中耳组织损伤及炎性细胞浸润变化,同时收集中耳灌洗液(middle ear lavage fluids,MELF),检测MELF中细菌载量、炎性细胞数量和细胞因子含量。结果:成功构建了TIGR4Δcps菌株。与TIGR4组相比,TIGR4Δcps组小鼠中耳上皮的损伤更轻,中性粒细胞募集减少(第1天时P=0.004;第3天时P=0.000;第5天时P=0.000),MELF中细胞因子TNF-α和IL-6水平更低(第1天时P=0.076、P=0.000;第3天时P=0.002、P=0.003;第5天时P=0.000、P=0.000),但细菌清除更快(第1天时t=2.659,P=0.029;第3天时t=3.717,P=0.006)。结论:在S.pn TIGR4致小鼠急性中耳炎过程中,CPS具有加重炎症应答和组织损伤,并导致宿主对S.pn的清除减慢的作用。
- 项云周爱娥王维王磊黄益飞金春芳王子萌尹一兵何於娟
- 关键词：肺炎链球菌荚膜多糖急性中耳炎
- 小鼠急性中耳炎模型的建立被引量：4
- 2013年
- 目的:建立小鼠急性中耳炎模型并初步探讨其病理机制。方法:不同菌量肺炎链球菌TIGR4经鼓膜穿刺接种于C57BL/6小鼠中耳腔内,观察小鼠体重变化及发病情况,于接种后不同时间点取小鼠头部进行组织切片HE染色,取心脏血及中耳灌洗液,中耳灌洗液进行细胞计数、细菌铺板计数和细胞涂片瑞氏染色,并测定其上清和血清中细胞因子含量。结果:小鼠接种肺炎链球菌后,体重下降,呈剂量依赖方式。中耳粘膜增厚,上皮细胞坏死脱落,中耳腔内大量炎症细胞浸润。中耳腔内中性粒细胞的募集时相与细菌的清除时相呈相关性,中耳灌洗液中IL-6和TNF-α显著升高。结论:本研究成功构建了小鼠急性中耳炎模型,为进一步研究急性中耳炎发病机制奠定了实验基础。
- 周爱娥王维项云黄益飞董姗姗何於娟
- 关键词：急性中耳炎小鼠肺炎链球菌动物模型
