丛晓燕
- 作品数:95 被引量:80H指数:5
- 供职机构:山东省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 副猪嗜血杆菌ompP2基因在猪肺泡巨噬细胞中的表达
- 2016年
- 为了进一步研究副猪嗜血杆菌(HPS)ompP2基因的功能,根据已发表的副猪嗜血杆菌核苷酸序列,设计并合成1对引物,PCR扩增HPS LZ株外膜蛋白ompP2基因,获得大小为1 158bp的核苷酸片段,该片段纯化后克隆至pEASY-Blunt载体,转化后鉴定,再与真核表达质粒pCI-neo经过酶切和连接反应,转化感受态大肠杆菌Trans-T1,双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒并测序。通过脂质体法将pCI-neoompP2转染猪肺泡巨噬细胞,通过RT-PCR和Western blot方法检测重组质粒是否表达。结果显示,成功构建了含ompP2基因的副猪嗜血杆菌真核表达载体pCI-neo-ompP2,提取转染该质粒的猪肺泡巨噬细胞的mRNA,进行RT-PCR扩增,在1 000bp^2 000bp之间可见1条明显的条带。Western blot发现在42ku处出现目的条带。试验结果为后期研究副猪嗜血杆菌感染猪肺泡巨噬细胞的机理奠定了基础。
- 于江杜以军李俊丛晓燕孙文博时建立陈智陈蕾吴家强王金宝
- 关键词:副猪嗜血杆菌真核表达载体猪肺泡巨噬细胞
- 欧、美型猪繁殖与综合症病毒抗体鉴别诊断试剂盒的制备方法
- 本发明提供一种欧、美型猪繁殖与综合症病毒抗体鉴别诊断试剂盒的制备方法,该方法是针对PRRSV VR-2332株的ORF7基因中欧、美型毒株的保守表位25aa~30aa,37aa~52aa及50aa~66aa的基因缺失,构...
- 王金宝张祯涛李俊任慧英吴家强张秀美丛晓燕温建新周顺
- 文献传递
- 环二鸟苷酸C-DI-GMP的制备与纯化
- 引言环二鸟苷酸(cyclic diguanylate,C-DI-GMP)是细菌中保守的第二信使分子,参与调节多种生理功能,包括细菌的运动、生物被膜形成、致病因子产生,细胞间通信等。近年来发现环二鸟苷酸作为免疫调节剂作用于...
- 丛晓燕王金宝
- 关键词:鸟苷酸C-DI-GMP反相高效液相色谱DGC免疫调节作用
- PCV2 Rep、截短Cap蛋白原核表达条件的优化及纯化蛋白的免疫原性被引量:3
- 2011年
- 为得到纯化的Rep、截短Cap蛋白并确定其免疫原性,通过对前期构建的Rep、截短Cap蛋白原核表达载体进行原核表达条件的优化,最终确定诱导5 hI、PTG终浓度为1.5 mmol/L作为最佳的诱导条件,诱导表达Rep、截短Cap蛋白,用纯化试剂盒进行纯化,包被ELISA板和已经检测过的血清阳性样品符合率达到90%以上。
- 时建立李俊吴家强丛晓燕孙文博杜以军王金宝周顺
- 关键词:PCV2ORF2纯化免疫原性
- PCV2 Rep蛋白N-糖基化位点突变对病毒复制的影响被引量:1
- 2015年
- N-糖基化对病毒的感染与增殖均具有重要作用,与PCV2复制相关的Rep蛋白含有三个N-糖基化位点。为了分析PCV2Rep蛋白N-糖基化位点突变对病毒复制的影响,本试验构建了三个双拷贝突变体感染性克隆2M23、2M256、2M286,并成功拯救病毒。通过间接免疫荧光检测病毒的拯救效果,TCID50测定病毒的感染力,荧光定量PCR检测细胞病毒的载量。结果显示,PCV2Rep蛋白的23~25aa、256~258aa N-糖基化位点突变后降低病毒的复制能力,而286~288aa突变后增强病毒的复制能力,为进一步阐明PCV2的复制及致病机制提供参考。
- 徐胜男时建立彭喆徐绍建吴晓燕丛晓燕杜以军吴家强李俊王金宝
- 关键词:REP蛋白
- 副猪嗜血杆菌血清5型分离株生长曲线与致病力研究被引量:5
- 2011年
- 本文对副猪嗜血杆菌血清5型生长曲线进行了研究。结果表明:种子液接种后6 h开始进入对数生长期,培养24 h后活菌数达到最高峰,20~30 h活菌数维持在同一个水平,进入稳定期,30 h后活菌数呈现下降趋势,进入衰退期。该曲线提供了副猪嗜血杆菌生长规律,为疫苗研制提供了理论基础。
- 王大鹏吴家强于江丛晓燕杜以军孙文博张玉玉时建立李俊周顺王金宝
- 关键词:副猪嗜血杆菌致病力
- 一种实验室用高压水流清洗器
- 本实用新型属于实验室用清洗仪器的技术领域,具体为一种实验室用高压水流清洗器。采用包括供水软管,在供水软管的一端连接柱状出水装置,该柱状出水装置的喷嘴部位为圆台状,该圆台的顶面设有两列出水口,该两列出水口呈十字交叉,该圆台...
- 黄保华彭喆李俊刘俊珍时建立徐绍建丛晓燕朱荣生刘畅韩红
- 文献传递
- 环二鸟苷酸(c-di-GMP)作为潜在免疫佐剂的研究进展
- 环二鸟苷酸(cyclic diguanylate,c-di-GMP)是在细菌中普遍存在的第二信使分子,参与调节多种生理功能,近年来研究发现环二鸟苷酸作为免疫调节剂作用于真核细胞可产生很好的免疫调节作用,一系列的体内、体外...
- 丛晓燕陈智王金宝孙文博时建立于江赵鹏伟李俊杜以军吴家强陈蕾
- 关键词:动物疾病免疫调节剂疗效评价
- 文献传递
- PCV2Rep蛋白N-糖基化位点突变及其真核表达载体的构建被引量:3
- 2014年
- 根据GenBank发表的猪圆环病毒2型(PCV2)基因序列设计并合成引物,通过点突变的方法对其进行单点、两点和3点突变,成功获得含单点、两点和3点的突变体。设计引物扩增突变体的ORF1片段,将目的片段分别经KpnI和XbaI双酶切进而将其连接到真核表达载体pVAX1中,成功构建PCV2-pVAX1-Rep真核表达载体。此重组表达载体的成功构建为进一步研究PCV2 ORF1编码蛋白的生物学活性打下了基础。
- 王鹏张熙艳时建立徐绍建丛晓燕刘畅彭喆孙文博杜以军吴家强王金宝李俊
- 关键词:猪圆环病毒2型突变
- 猪内脏组织活体采样并进行核酸提取的装置
- 本发明公开了一种猪内脏组织活体采样并进行核酸提取的装置,其活体采样针包括作用于体内组织的针体和用于支承针体的支撑体,针体包括均为细长中空结构的内采样针和外切割针,内采样针的长度大于外切割针的长度,内采样针穿过外切割针的内...
- 孙文博吴家强陈智郑乾坤李敏邱宪波张璐璐刘国宪杜以军丛晓燕陈蕾于江李俊时建立郭立辉任素芳