刘海鹰
- 作品数：12 被引量：40H指数：4
- 供职机构：中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 修饰的EB病毒LMP1编码序列,其制备及应用
- 本发明提供基于Epstein－Barr病毒(EBV)DNA的序列，特别是经修饰的编码EBV潜伏膜蛋白1抗原基因的DNA序列，其制备方法及其在生产用于控制EBV感染相关疾病的药物和DNA疫苗中的应用。
- 曾毅周玲刘海鹰贾俊岭王琦
- 文献传递
- 检测Epstein-Barr病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞方法的建立及其初步研究被引量：10
- 1998年
- 目的建立一种非放射性、简便易行的可检测特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞的方法，并且初步应用于Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒的细胞免疫应答。方法用重组的ＥＢＶ－ＬＭＰ１痘苗病毒、ＴＫ＋痘苗病毒和杆状病毒系统表达的ＥＢＶ－ＬＭＰ１蛋白分别免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，用Ｐ８１５细胞和乳酸脱氢酶法检测ＥＢ病毒特异性细胞毒性Ｔ细胞的杀伤效应。结果重组ＥＢＶ－ＬＭＰＩ痘苗病毒免疫组原发ＣＴＬ水平和体外诱生的二次ＣＴＬ水平均高于ＴＫ＋痘苗病毒免疫组和正常组；杆状病毒系统表达的ＥＢＶ－ＬＭＰ１蛋白免疫组的ＣＴＬ水平也明显高于正常鼠。结论本法可以较好的反映ＥＢ病毒特异性细胞毒性Ｔ细胞的水平，而且再一次说明ＬＭＰ１基因能够诱发特异性的细胞免疫。
- 刘海鹰周玲曾毅
- 关键词：特异性细胞毒性T淋巴细胞EB病毒乳酸脱氢酶
- 含有Epstein-Barr病毒膜抗原的重组表达质粒及其基因免疫被引量：2
- 1997年
- 将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ（ＥＢ）病毒主要的膜抗原（ＭＡ）ＢＬＬＦ１基因片段插入ｐＨＤ１０１－３质粒的ＣＭＶ启动子下游，构建了真核表达质粒ｐＨＤ－ｇｐ３５０，并转染２９３细胞进行瞬间表达。用免疫荧光法从细胞膜检测到表达的抗原能与其单克隆抗体发生特异性结合，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法证实，表达的抗原分子量为３５０ｋＤ．用能在真核细胞表达的重组质粒ｐＨＤ－ｇｐ３５０的ＤＮＡ，经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ２Ｂ柱纯化后，注射经普鲁卡因预处理的Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠的四头肌，观察到ＥＢＶ－ＩｇＡ／ＭＡ抗体水平比ＥＢＶ－ＩｇＧ／ＭＡ低，而ＥＢＶ－ＩｇＡ／ＭＡ的持续时间比ＥＢＶ－ＩｇＧ／ＭＡ长。采用表达ＥＢＶＭＡ的质粒ＤＮＡ与ＣＨＯ细胞表达的ＭＡ蛋白免疫小鼠，均获得抗ＥＢＶＭＡ的抗体。
- 周玲王汉明刘海鹰曾毅
- 关键词：EB病毒膜抗原基因免疫
- 中国HIV-1流行毒株的DNA疫苗的初步研究被引量：6
- 2000年
- 为研制针对我国HIV 1流行毒株的艾滋病毒疫苗 ,构建了具有代表性的 gag和 gp12 0核酸疫苗 ,进行了初步的小鼠免疫实验。结果初步显示 :(1)免疫Balb/C小鼠可以产生HIV 1特异性的体液和细胞免疫 ;(2 ) gag和gp12 0基因联合免疫可以同时诱发针对 gag和 gp12 0的细胞和体液免疫反应 ,而且效果比各自单独免疫要好 ;(3)B亚型 gp12 0基因免疫可以诱发识别C亚型 gp12 0抗原的CTL反应。本文核酸疫苗研究的初步结果值得进一步系统地进行试验。
- 管永军朱跃科刘海鹰周玲曾毅
- 关键词：艾滋病毒核酸疫苗GAG基因
- HBsAg基因免疫条件优化的比较被引量：9
- 1997年
- ＨＢｓＡｇ基因免疫条件优化的比较张晓梅周玲刘海鹰曾毅基因免疫（Ｇｅｎｅｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ）是基于裸露ＤＮＡ转基因成功这一最新发现而发展起来的新的免疫技术〔１〕。是利用各种方法，将重组表达的带目的基因的质粒ＤＮＡ不经体外表达直接转化到体内，诱导机...
- 张晓梅周玲刘海鹰曾毅
- 关键词：HBSAG基因免疫MTNCMV
- 修饰的EB病毒LMP1编码序列,其制备及应用
- 本发明提供基于Epstein-Barr病毒(EBV)DNA的序列，特别是经修饰的编码EBV潜伏膜蛋白1抗原基因的DNA序列，其制备方法及其在生产用于控制EBV感染相关疾病的药物和DNA疫苗中的应用。
- 曾毅周玲刘海鹰贾俊岭王琦
- 文献传递
- 用合成肽抗原检测Epstein-Barr病毒抗体被引量：1
- 1997年
- 用合成肽抗原检测Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒抗体刘海鹰周玲邓洪周维雅Ｊ．Ｍｉｄｄｅｌｄｏｒｐ曾毅Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒（ＥＢＶ）进入宿主细胞后能产生多种由ＥＢＶ决定的抗原，包括早期抗原（ＥＡ），壳抗原（ＶＣＡ）和核抗原（ＥＢＮＡ）等。这些由ＥＢＶ基...
- 刘海鹰周玲邓洪周维雅J.Middeldorp曾毅
- 关键词：EPSTEIN-BARREBV抗体合成肽抗原
- 含有Epstein-Barr病毒膜抗原的DNA疫苗接种诱生细胞免疫的初步研究
- 1997年
- 含有Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒膜抗原的ＤＮＡ疫苗接种诱生细胞免疫的初步研究周玲刘海鹰王汉明曾毅作者单位：１０００５２北京中国预防医学科学院病毒学研究所１９９７年３月４日收稿６月２８日修回ＤＮＡ疫苗接种是指将编码特异抗原的核酸序列直接注射到宿主靶组织...
- 周玲刘海鹰王汉明曾毅
- 关键词：EB病毒DNA疫苗膜抗原细胞免疫
- 重组HIV-1腺病毒伴随病毒的构建及表达被引量：3
- 2000年
- 目的 构建带有HIV 1gag或 gp12 0基因的重组腺病毒伴随病毒AAV HIV gag或AAV HIVgp12 0。方法 共转染法获取重组AAV HIV ;免疫酶法检测病毒滴度。结果 测定制备的重组腺病毒伴随病毒AAVgag42 ,AAVgp42 ,AAVgpRj6 ,病毒滴度在 10 4～ 10 5 范围。结论 构建了带有 gag和gp12 0基因的重组AAV HIV ,可以感染真核细胞并有较高的表达 ,可以用于做靶细胞 ,为发展新型的HIV
- 管永军刘海鹰朱跃科周玲杜宾曾毅
- 关键词：HIV-1T淋巴细胞细胞毒性
- 重组含有Epstein-Barr病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)基因的杆状病毒在昆虫细胞中的表达被引量：6
- 1998年
- 用杆状病毒表达系统重组病毒，在昆虫细胞中表达了完整的含有ＥＢＶ－ＬＭＰ１基因３个外显子开放读码框架的长２．３ｋｂ的ｃＤＮＡ片段。用重组病毒感染Ｓｆ９细胞，用免疫荧光染色，结果表明：４８小时表达重组蛋白，７２小时细胞较完整，免疫荧光染色强阳性，９６小时后细胞出现破碎。我们采集７２小时的组织培养上清和细胞破碎裂解液，分别采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＨＰＬＣ分子筛法，用免疫蛋白印迹法实验证明，表达的蛋白能被抗ＬＭＰ１的单克隆抗体所识别，测定表达蛋白的分子量为６０ｋＤ。经蛋白含量扫描图分析，采用Ｓｅｐｈａｄｅｘ－７５柱初步纯化表达的ＬＭＰ１蛋白，将后者进行裸鼠体内致瘤实验，未见肿瘤生长。
- 周玲刘海鹰柯越海王汉明马林曾毅
- 关键词：杆状病毒昆虫细胞纯化
