富宁
- 作品数：138 被引量：954H指数：14
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 金葡菌LTA模拟肽的筛选及鉴定
- 目的：以液相筛选法获得模拟金葡菌脂磷壁酸(LTA)阳性序列,依据阳性序列合成的线性肽及四分支多价抗原肽,探讨合成肽抗原性,四分支多价抗原肽的免疫原性以及免疫后对小鼠在金葡菌系统性感染模型中的保护作用。方法：以抗金葡菌LT...
- 黄钊霞王湘豫侯晓睿易夏玉朱平富宁刘北一
- 关键词：金黄色葡萄球菌LTA
- 合成环肽抑制HIV-1病毒介导的细胞融合的初步研究被引量：2
- 2006年
- 目的鉴定合成环肽FJ-08是否抑制HIV-1病毒介导的细胞融合。方法固相合成环肽FJ-08(SACYWWHRLHCGGGS),将合成肽与BSA载体交联,ELISA检测交联物与源于HIV-1gp41N螺旋的合成肽N36结合,细胞融合抑制实验检测FJ-08抑制H9/HIVIIIB细胞与MT-2细胞的融合。结果ELISA鉴定表明FJ-08-BSA与N36肽结合。与无关肽比较,细胞融合抑制实验显示在2h内,80#g/ml的FJ-08肽具有抑制融合作用,呈现浓度依赖效应。结论FJ-08合成肽可抑制HIV-1介导的细胞融合。
- 刘北一朱平姜世勃富宁
- 关键词：HIV-1GP41模拟肽
- 抗胎儿血红蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的制备和鉴定抗胎儿血红蛋白(fetal hemoglobin,HbF)单克隆抗体(mAb),为相关疾病的研究提供支持与工具。方法用脐带血红细胞裂解物免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(NS-1)融合制备杂交瘤,经筛选和三次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体。用ELISA以及western blot等方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力)。结果筛选到3株可稳定分泌抗HbF单克隆抗体的杂交瘤细胞6A5、5C8、2C8,腹水效价分别为1×10-6、2×10-6和4×10-6。单抗亚类均为IgG1,抗体亲和力分别为7.8×109、2.2×108和8.6×109。ELISA和western blot结果显示,6A5、5C8、2C8 mAb只与HbF的二聚体特异性结合,与其他类型血红蛋白不发生交叉反应。结论获得3株能特异性识别HbF的高亲和力mAb,可结合二聚体与单体HbF,为临床检测HbF水平及相关研究提供了有效的工具。
- 程伟刘艳君陈远东钟梅富宁
- 关键词：胎儿血红蛋白单克隆抗体
- CD_4^+自然杀伤T细胞在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用被引量：5
- 2000年
- 目的 了解CD+ 4、CD+ 8自然杀伤 (NK)T细胞在慢性HBV感染者外周血中的分布情况 ,并对其细胞毒性进行分析 ,阐明其在慢性HBV感染中的作用。方法 常规分离外周血单个核细胞(PBMCs) ,用重组人白细胞介素 12 / 2 (rhIL 12 /IL 2 )诱导 14d ,以鼠抗人CD4 单克隆抗体 (mAb)或抗人CD8mAb与抗人CD56mAb分别标记细胞样品 ,流式细胞术 (FCM)分析 ,CD+ 4CD+ 56同时阳性的细胞 ,即为CD+ 4NK T细胞 ;CD+ 8CD+ 56同时阳性的细胞为CD+ 8NK T细胞 ,因此获得CD+ 4、CD+ 8NK T细胞的百分比。并对细胞样品同时进行细胞毒性试验 ;分别以鼠抗人CD4 mAb、抗人CD8mAb及抗人CD56mAb和新鲜兔血清处理细胞 ,以鉴定CD+ 3 CD+ 4NK T、CD+ 3 CD+ 8NK T细胞的细胞毒活性。结果 rhIL 12 /IL 2诱导后 ,慢性HBV感染者外周血CD+ 4NK T细胞的含量远低于正常对照组。CD+ 4NK T细胞的比例(% )在正常对照组、慢性乙型肝炎 (CH)组和慢性无症状携带者 (AsC)组分别为 18 10± 4 2 0 ,6 95±2 85和 1 5 0± 1 30 ,经方差分析证实 3组之间差异具有显著性 (P <0 0 5 ) ;CD+ 8NK T细胞的比例 (% )在正常对照组、CH组及AsC组分别为 2 70± 1 10 ,2 2 0± 1 40和 3 10± 0 70 ,经方差分析显示 3组之间无统计学差异 (P >0 0 5 )。
- 姜荣龙卢桥生侯金林郭亚兵骆抗先富宁
- 关键词：慢性乙型肝炎自然杀伤细胞T细胞CD4^+
- 作用于gp41的HIV融合抑制剂高通量筛选方法的研究被引量：12
- 2002年
- 目的 对作用于gp4 1的HIV融合抑制剂筛选方法进行研究和改进 ,使其成为更加简便的高通量药物筛选模型。方法 采用夹心ELISA方法 ,检测HIVgp4 1六股α 螺旋束的形成。结果 以特异性识别HIVgp4 1六股α 螺旋束的单克隆和多克隆抗体为基础建立的改良夹心ELISA方法 ,特异性好 ,准确性高 ,更为简便和经济 ,能稳定有效地检测样品对 gp4 1六股α 螺旋束形成的抑制作用。 结论 本研究建立的改良方法可作为高通量药物筛选方法 ,用于从中草药库、噬菌体肽库和微生物发酵液等复杂组分样品中筛选作用于 gp4 1的HIV融合抑制剂 。
- 刘叔文姜世勃刘北一吴志华吕琳张嘉杰富宁吴曙光
- 关键词：HIVGP41高通量筛选模型HIV融合抑制剂抗HIV药物
- 交叉反应性抗类脂A单克隆抗体的制备及初步鉴定被引量：10
- 1998年
- 应用杂交瘤技术得到２株可稳定分泌高效价抗鼠伤寒杆菌类脂Ａ单克隆抗体的杂交瘤细胞株，二株均为ＩｇＧ１，且与大肠杆菌类脂Ａ以及绿脓杆菌、布氏杆菌均有较好的交叉反应，并对大肠杆菌的致死性攻击具有一定的保护效应。
- 鲍永利富宁于春雷王莉杨贵贞
- 关键词：类脂A单克隆抗体
- 针对晚期氧化蛋白产物的抗体制备与应用被引量：4
- 2010年
- 目的:制备特异性识别晚期氧化蛋白产物(Advanced oxidation protein products,AOPP)的多克隆抗体,为研究AOPP的致病机理及与临床病情相关性提供有效工具。方法:用次氯酸氧化家兔血清白蛋白以获得AOPP-RSA,以此为免疫原免疫家兔,亲和层析纯化免疫血清,ELISA鉴定多克隆抗体的效价及特异性,Western blot检测慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者血浆中AOPP,免疫组织化学方法检测肾组织中AOPP分布与定位。结果:获得效价达10-6的抗AOPP免疫血清,纯化抗体可特异地与不同种属来源的氧化修饰白蛋白结合,而与正常白蛋白及糖基化蛋白终产物无交叉反应。该抗体可识别人血浆中的AOPP,可特异地与大鼠CKD模型及各种炎症性CKD患者肾组织成份反应。结论:成功制备了可与不同种属AOPP结合的特异性多克隆抗体,并首次用于检测存在于CKD患者血浆、肾组织及模型动物肾组织中的AOPP,为深入研究AOPP的病理作用及其在组织定位提供了有效工具。
- 卢晓田建伟刘北一侯晓睿朱平侯凡凡富宁
- 关键词：晚期氧化蛋白产物多克隆抗体慢性肾脏病
- 钙离子载体诱导HL-60细胞分化成树突状细胞的实验研究被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨一种钙离子载体 (calciumionophore,CI)A2 3187,能否诱导早幼粒白血病细胞株HL 6 0分化成具有活性的树突状细胞 (dendriticcells,DCs)。方法 :将生长状态良好的HL 6 0细胞分别加在普通培养液中 ,或在含不同浓度 (2 5～ 16 0 0 μg/L)的A2 3187及 10 0 μg/L重组人粒 /单集落刺激因子 (rhGM CSF)的普通培养液中培养。 2 4～ 96h后 ,在光镜及电镜下观察细胞的形态 ;用流式细胞仪检测细胞的表面标志 ,MTT比色法检测其刺激同种异体T细胞增殖的作用。结果 :HL 6 0细胞以适量 (2 0 0 μg/L)的A2 3187诱导 2 4h ,DC的特征性表面标志CD83分子的表达最高 ,72h可出现典型的树突状突起 ,96h细胞表面CD80 (B7.1)、CD86 (B7.2 )、MHC II分子及细胞间黏附分子CD5 4的表达最高 ,且能明显激活同种异体T细胞。结论 :钙离子载体A2 3187可将HL 6 0细胞诱导成具有活性的DC样细胞。
- 吴军杨太成冼江王捷陈政良富宁
- 关键词：钙离子载体树突状细胞
- 手足口病相关肠道病毒感染血清中交叉抗体反应的初步鉴定被引量：4
- 2015年
- 目的了解我国手足口病常见病毒感染患者血清中抗体交叉反应及保护性,为揭示手足口病二次感染保护机制提供依据。方法收集2010-2014年珠江医院经荧光定量PCR确诊为手足口病患儿血清,用间接免疫荧光鉴定非EV71肠道病毒感染血清与EV71病毒感染细胞间结合,及EV71感染恢复期血清和抗EV71单克隆抗体与非EV71肠道病毒感染细胞的结合,对存在交叉结合反应的血清检测其交叉中和保护性。结果共收集149例非EV71肠道病毒感染血清,经鉴定其中54份标本无EV71混合感染及既往感染,血清型分别为CA6、CA10、CA9、CA5、CA16、CB3、CB5及未分型肠道病毒。46份(85.2%)非EV71感染血清Ig G抗体与EV71病毒感染细胞结合,具统计学意义(Z=-2.39,P=0.017),并对EV71病毒具弱中和活性。EV71感染血清及5株抗EV71单克隆抗体仅与CA16感染细胞结合。结论初步确定多种非EV71肠道病毒感染血清与EV71病毒存在交叉反应,且具有弱中和活性;而EV71感染血清对其他肠道病毒无交叉保护作用。首次证明抗EV71 VP2、VP4单抗可结合CA16病毒。
- 薛霖余楠郭勇晖潘玉先陈满君郭敏富宁
- 关键词：手足口病肠道病毒属
- 三种检测噬菌体阳性克隆的ELISA比较被引量：7
- 1998年
- 本研究以抗白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒα）单抗５Ｇ１筛选噬菌体六肽库为实验体系，比较了三种不同ＥＬＩＳＡ（噬菌体常规包板、固定包板及双抗体夹心法），证实固定包板优于常规包板，夹心ＥＬＩＳＡ效果最佳，实为一种检测噬菌体阳性克隆抗原性的简便。
- 刘北一李一富宁齐杰王莉于春雷
- 关键词：噬菌体肽库阳性克隆ELISA
