徐兵
- 作品数：40 被引量：91H指数：5
- 供职机构：福建医科大学孟超肝胆医院更多>>
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- 两种磁分离酶联免疫法检测血清甲胎蛋白
- 2010年
- 目的改进磁分离酶联免疫法(MEIA)。方法采取预加微量标本、将磁铁置于微孔条侧壁和扣除上清液A值法,改良MEIA并建立了"差异磁分离酶联免疫法"(differential magnetic enzyme immunoassay,DMEIA)。求DMEIA法的线性范围、回归方程、变异系数(CV),比较了MEIA和DMEIA配对检测100份血清AFP结果差异。结果 DMEIA法检测AFP的回归方程Y=3.94X+16.45,r=0.992,线性范围5～500ng/mL,批内CV=7.7%,批间CV=8.5%;DMEIA法和MEIA法测定血清AFP值差异无统计学意义(t检验,P>0.05),直线回归方程Y=3.418X+70,r=0.981,两法相关良好;检测原倍高浓度AFP时DMEIA法未出现(MEIA法出现)hook效应。结论 DMEIA法可克服hook效应,可用普通微孔板和酶标仪比色,可省去洗涤步骤,检测AFP结果(<500ng/mL时)与MEIA法无明显差异。
- 徐兵徐如梅张建钫沈菁石英伍严安
- 关键词：酶免疫技术甲胎蛋白类化学发光
- 两种含胶原凝胶的人工肝生物反应器的功能比较被引量：1
- 2014年
- 目的：改进中空纤维型人工肝生物反应器。方法将大鼠肝细胞与胶原溶液混合并注入中空纤维反应器管外腔，待混合物在管外腔中形成胶原凝胶将肝细胞悬浮其中，构成胶原凝胶混悬肝细胞反应器（Ⅰ组）；另将大鼠肝细胞混悬液注入涂有胶原层的中空纤维反应器管外腔，构成胶原涂层加肝细胞反应器（Ⅱ组）。两组反应器均由管内腔循环灌注培养液，置孵箱培养9 d，每24 h 换液一次，每48 h 取灌注液检测白蛋白（Alb）、尿素、乳酸脱氢酶（LDH）浓度，以检验反应器的肝细胞功能。采用统计软件SPSS 13．0进行统计学分析，计量数据以均数±标准差（x ±s）表示，两组资料比较用配对 t 检验。结果Ⅰ组和Ⅱ组的 Alb 值均在灌注第3天达峰值，分别为（1．41±0．08）和（0．65±0．05）g/L，3～9 d 各时间点 Alb 值Ⅰ组均明显高于Ⅱ组（P 值均＜0.01）。Ⅰ组和Ⅱ组的尿素值分别在灌注第5天和3天达峰值，分别为（1．73±0．14）和（1．56±0．18）mmol /L，5～9 d 各时间点尿素值Ⅰ组均明显高于Ⅱ组（P 值均＜0．01）。Ⅰ组和Ⅱ组的 LDH 值在灌注第9天达峰值，分别为（32．03±9．13）和（70．17±25．28）U /L，1～9 d各时间点 LDH 值Ⅰ组均明显低于Ⅱ组（P 值均＜0．01）。提示胶原凝胶混悬肝细胞反应器（Ⅰ组）比胶原涂层加肝细胞反应器（Ⅱ组）有更好的肝细胞合成代谢功能，肝细胞酶漏出也更少。结论胶原凝胶混悬固定肝细胞更适用于构建中空纤维型人工肝生物反应器。
- 徐兵吴林岚魏建威黄素钦陈怡赵芝萍蒋晓织郑登滋杨梅玉
- 关键词：生物反应器肝细胞
- 碱化血浆紫外线蓝光照射树脂吸附清除胆红素
- 2010年
- 目的探讨用紫外线蓝光混合光照射碱化血浆再用树脂吸附对胆红素影响,建立净化人工肝分离血浆新方法。方法 (一)将人工肝分离出的血浆碱化成pH10(血浆:0.2mol/LNa2CO3=1∶1,V/V),用紫外线蓝光照射(10～14)min,再用D4006(交联PS塑料)非极性吸附树脂流动吸附3min,检测胆红素和蛋白浓度。(二)将人工肝分离出的血浆碱化成pH10(血浆:2mol/LNa2CO3=10∶1,V/V),用紫外线蓝光照射15min,再用D4006树脂流动吸附5min,检测胆红素和蛋白浓度。结果在方法一,碱化血浆照射组的胆红素(TBil、DBil、IBil)清除率分别为86%、84%、87.5%,Alb回收率99%;碱化血浆照射吸附组的TBil、DBil、IBil清除率均为98%,Alb回收率90%。在方法二,碱化血浆照射组的TBil、DBil、IBil清除率分别为85%、84%、86%,Alb回收率99%;碱化血浆照射吸附组的TBil,DBil,IBil清除率分别为90%、87%、91%,Alb回收率90%。结论紫外线蓝光照射碱化血浆可明显降低胆红素浓度,照射后再用D4006树脂吸附可进一步降低胆红素浓度,且Alb回收率达90%～99%。故本法有望用于人工肝血液净化。
- 徐兵蒋晓织林曼芝陈敏
- 关键词：血浆置换胆红素紫外线疗法
- 梯度pH法快速回收人工肝置换血浆中多种蛋白质
- 目的:体外快速回收人工肝置换下来的患者血浆中蛋白,以期用于自体回输治疗。方法:自行设计一种梯度pH法(从pH值5．0开始,静置缓慢逐滴加入碳酸氢钠溶液,3 h加完,使终点pH值至7．6),用此法配合盐析法(NaCl饱和度...
- 徐兵潘晨蒋晓织林曼芝陈敏陈怡林灼陈惠聪
- 文献传递
- 紫外线蓝光照射和树脂吸附清除血浆胆红素
- 2010年
- 目的探讨紫外线蓝光混合光照射血浆联合树脂吸附对血浆蛋白及胆红素的影响，初步建立紫外线蓝光和（或）树脂吸附净化血浆方法。方法将人工肝分离出的原血浆先用紫外线蓝光照射，再用D201型大孔强碱性阴离子交换树脂或D4006型非极性大孔吸附树脂吸附，根据采用的方法不同分为吸附组、照射组和照射吸附组，并与原血浆进行对照。观察在不同处理阶段（照射组、照射吸附组）及单纯吸附组蛋白和胆红素浓度变化。结果①照射组总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）和间接胆红素（IBil）浓度明显低于原血浆组（P〈0．01），血浆蛋白照射前后差异无统计学意义（P〉0．05）。②用D201树脂吸附时，照射吸附组胆红素（TBil、DBil和IBil）清除率分别为85．3％、85．8％和85．1％，吸附组分别为58．3％、50．8％和61．7％，两组的胆红素清除率和浓度差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）；两组总蛋白、白蛋白差异无统计学意义（P〉0．05）。③用D4006树脂吸附时，照射吸附组胆红素（TBil、DBil和IBil）清除率分别为71．0％、74．5％和68．6％，吸附组分别为19．8％、17．6％和21．2％，两组胆红素清除率和浓度差异均有统计学意义（P〈0．01）；两组总蛋白、白蛋白差异无统计学意义（P〉0．05）。④在照射吸附组中，用D4006树脂时IBil清除率（68．6％）低于用D201树脂时IBil清除率（85．1％）（P〈0．05），使用D4006树脂组血浆自蛋白高于使用D201树脂组（P〈0．05）。结论紫外线蓝光照射血浆可直接降低胆红素浓度，明显提高阴离子交换树脂和吸附树脂胆红素清除率，对血浆蛋白回收影响较小，因此紫外线蓝光混合照射联合树脂吸附有望用于人工肝治疗。
- 徐兵蒋晓织陈敏林曼芝林灼朱勇强
- 关键词：紫外线人工肝蛋白胆红素
- 紫外线摇动灭菌法建立及在胶原溶液灭菌中的应用被引量：1
- 2009年
- 背景:在已有胶原溶液灭菌方法中,微孔膜过滤和紫外线照射可不降低溶液的黏性,但紫外线只能用于表层溶液或透明管道中溶液的灭菌,限制了紫外线的灭菌效率。如果能用紫外线使一个容器中上下各液层都受照射灭菌,就可省去紫外线灭菌的循环管道,可简化操作保持灭菌蛋白特性。目的:改进紫外线灭菌法,使之适用于胶原溶液的灭菌。设计、时间及地点:体外观察实验,于2000-02/2008-06在福州市传染病医院肝病研究所完成。材料:灭菌装置由紫外灯、反光罩(可罩于摇床上)、摇床和容盘组成。方法:①容盘置于摇床上。将待灭菌的酸性胶原溶液装入容盘,液层深8～12mm。②开动紫外灯和摇床,使容盘中溶液摇动混合、暴露深层受紫外线照射。③将经照射灭菌的胶原溶液pH调为7.4,使成凝胶。主要观察指标:①胶原溶液层厚、紫外线照射时间对灭菌效果(菌落计数)的影响。②将紫外照射后的胶原溶液pH调为7.4,形成凝胶时间。结果:①液层厚8mm照射30min的胶原溶液和液层12mm照射90min的胶原溶液,经培养均显示细菌和霉菌阴性。②将用本法灭菌的胶原溶液pH变为7.4后可在1h内形成凝胶。结论:紫外线摇动灭菌法简便有效,灭菌后不影响胶原溶液成凝胶性,适用于胶原及类似蛋白溶液的灭菌。
- 徐兵赵芝萍丘仲琼陈怡
- 关键词：灭菌紫外线胶原蛋白质
- 用超速玻璃化冻存的人肝组织微团构建人工肝生物反应器的功能研究
- 2014年
- 目的探讨用超速玻璃化法冻存的人肝组织（细胞）微团构建人工肝生物反应器的代谢和合成功能。方法将手术来源的人肝组织用胶原酶做有限消化，分解成肝组织微团，将肝组织微团用超速玻璃化法冻存，复苏后再用胶原酶有限消化成更小的肝细胞微团。将肝细胞微团与胶原溶液（pn7．4）混合，并将混合物注入中空纤维反应器管外腔，使混合物在管外腔形成胶原凝胶将肝细胞微团固定其中，构成生物反应器。用利多卡因循环灌注反应器管内腔24h，检验反应器的药物代谢功能；用乙型肝炎患者血浆循环灌注反应器管内腔6．5h，检测灌注液中血氨、间接胆红素（IBIL）、凝血酶原时间（PT）的变化，检验反应器的肝细胞功能。结果人肝组织微团经超速玻璃化冻存7d后复苏的肝细胞活率为（81．9±4．2）％。用利多卡因灌注24h后，利多卡因浓度为6．2mg/L，代谢转换率为92％。100mL患者血浆循环灌注生物反应器6．5h后，灌注液中血氨、IBIL和PT值分别为（22．5±6．1）μmol／L、（29.3±8．6）μmol／L和（20．5±2．7）s，低于灌注0．5h的相应值，差异均有统计学意义（t=13．5、17．9和7．4，P均〈0．05）。结论超速玻璃化法冻存的人肝组织（细胞）微团复苏后固定于胶原凝胶中构建的中空纤维型人工肝生物反应器，有较好的肝细胞代谢和合成功能。
- 徐兵吴林岚黄素钦杨晓梅陈怡赵芝萍蒋晓织
- 关键词：生物反应器肝组织冻存
- 猪胰岛移植于大鼠肝包膜下人工囊腔治疗糖尿病的研究被引量：1
- 2015年
- 目的建立一种新的免疫隔离法用于将猪胰岛移植于大鼠肝包膜下人工囊腔，并观察其治疗糖尿病大鼠的效果。方法用链脲霉素诱导建立大鼠糖尿病模型。用V型胶原酶消化猪胰腺，梯度离心法分离纯化猪胰岛。检测纯化猪胰岛的胰岛素刺激指数。取18只糖尿病大鼠和6只正常大鼠，手术暴露大鼠肝脏，从肝叶一侧边缘切开并分离肝包膜，将人工囊腔（纤维素酯透析袋，袋内置一中空纤维球，袋两端用线扎紧）两端从肝包膜切口分别塞入两边肝包膜下，囊腔两端连线从肝叶对侧边缘肝包膜开孔穿出并相互连接，绑于肝叶；使囊腔平铺在肝实质表面，中段含纤维球部分位于皮下肝包膜切口问。将含胰岛（4000IEQ）的胶原溶液（pH7．4）注入糖尿病大鼠肝包膜下人工囊腔，作为实验组（n=12）；将不含胰岛的胶原溶液注入糖尿病大鼠（糖尿病对照组，n=6）或正常大鼠肝包膜下人工囊腔（正常对照组，n=6）。缝合切口（囊腔中胶原溶液变成胶原凝胶）。首次移植后8周，实验组各大鼠再经皮向肝包膜下人工囊腔注射胰岛（2000IEQ）悬液1次。各组大鼠每周断尾取血检测空腹血糖值。结果纯化猪胰岛的胰岛素刺激指数为2．2±0．2。首次移植后1～8周，实验组大鼠各时间点空腹血糖值明显低于糖尿病对照组大鼠（P〈0．01）。首次移植后13周，肉眼观察大鼠肝包膜下人工囊腔周围，未见明显纤维组织增生。结论纤维素酯透析袋植入肝包膜下13周对周围组织没有明显刺激。猪胰岛在大鼠肝包膜下人工囊腔中可受到免疫隔离，并正常生长，发挥降血糖功能。可经皮注射将猪胰岛移植于大鼠肝包膜下人工囊腔。
- 徐兵吴林岚杨晓梅黄素钦吴开木
- 关键词：胰岛免疫隔离
- 中空纤维反应器管外腔胶原凝胶混合肝细胞培养
- 2010年
- 徐兵吴林岚魏建威郑登滋扬梅玉
- 关键词：肝细胞培养胶原凝胶生物人工肝中空纤维膜肝细胞功能
- 梯度pH共沉淀法回收人工肝丢弃血浆蛋白初步实验被引量：1
- 2007年
- 目的建立在体外快速回收人工肝丢弃血浆总蛋白的方法。方法设计一种梯度pH共沉淀法,从pH 7.3开始,逐滴加入1 mol/L柠檬酸溶液,5h加完,使溶液pH值呈渐进梯度变化,至终点pH 5.1,用此法配合盐析法(氯化钠饱和度33%,4℃反应5.5h)或低温乙醇沉淀法(乙醇体积分数为0.04,-7℃反应5.5h),使等电点在pH 7.3～5.1范围内的各蛋白连环碰撞聚集而析出,形成多蛋白共沉淀,再一并回收,弃上清液以清除毒物。结果在pH 7.3～5.1范围内,用梯度pH低温乙醇法和梯度pH盐析法分别回收了41%(25 g/61 g)和50%(29 g/57 g)的血浆蛋白,上清液中未回收的蛋白主要是白蛋白及其所结合的胆红素。两法回收的蛋白溶液中,TBil下降,分别为回收前的0.07%(低温乙醇法)和0.06%(盐析法),HBV DNA降为阴性(PCR)。结论在高浓度中性盐或低温乙醇条件下,渐进微调溶液pH值,可使一连串有相邻等电点的蛋白共沉淀,采用梯度pH共沉淀法可选择性快速回收人工肝丢弃血浆中总蛋白。
- 徐兵潘晨蒋晓织林曼芝陈敏林灼陈怡陈惠聪
- 关键词：氢离子浓度盐析法血蛋白质类回收
