王云华
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 嘉兴地区幽门螺杆菌临床菌株cagA和vacA优势基因型研究
- 2008年
- 目的研究嘉兴地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株cagA和vacA优势基因型状况及与疾病的关系。方法从胃、十二指肠疾病患者的胃粘膜活检组织中分离培养出44株Hp。采用PCR检测cagA基因和vacA基因的信号区(s)和中间区(m)亚型的分布,用卡方检验分析各基因在不同消化性溃疡或慢性胃炎中的Hp差异。结果44株Hp中cagA的阳性率为100%(44/44),vacAsla/m2基因型阳性率为61.4%(27/44),vacAsla/m1b为25.0%(11/44),vacAsla/m1b-m2为9.0%(4/44),其中有2株Hp同时检出sla/m2和sla/m1b-m2基因,另有2株Hp未检测到m区基因。慢性胃炎患者Hp的vacAsla/m2和vacAsla/m1b基因阳性率明显高于消化性溃疡患者的Hp(P<0.05),其余基因在不同类型疾病中的分布无统计学差异(P>0.05)。结论cagA+vacAsla/m2、cagA+vacAsla/m1b均为嘉兴地区消化性溃疡或慢性胃炎患者感染的Hp的优势基因型,部分患者可混合感染多株不同vacA基因型的Hp。
- 漆秋兰徐水凌李玉梅王云华张成文
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA基因VACA基因
- 重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白D9N的表达、纯化及生物学活性的研究被引量：2
- 2009年
- 目的表达、纯化重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白D9N(rSEB-D9N),了解表达产物rSEB-D9N的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和肿瘤生长抑制作用。方法不同浓度IPTG诱导SEB-D9N突变体原核表达系统pET32a-SEB-D9N-E.coliBL21DE3表达rSEB-D9N,经Ni-NTA亲和层析法纯化rSEB-D9N,10%SDS-PAGE和高效液相色谱检测其纯度。以Vero细胞为靶细胞,进行rSEB-D9N的细胞毒性作用,并计算TCID50值。采用MTT法分别检测不同浓度的rSEB-D9N促人淋巴细胞增殖及抑制KB及MCF-7癌细胞株生长的作用。流式细胞术检测rSEB-D9N刺激人淋巴细胞后CD3、CD4、CD8的表达。结果rSEB-D9N表达产量约占细菌总蛋白30%,纯化后获得纯度为90.48%的rSEB-D9N。rSEB和rSEB-D9N对Vero细胞的TCID50值分别为3.12,8.85μg,10.0,20.0mg·L-1的rSEB-D9N具有显著的促PBMC增殖的作用(P<0.05),且主要上调CD3,CD4和CD8的表达。5.0～20.0mg·L-1rSEB-D9N作用的PBMC上清对KB和MCF-7细胞生长均可产生明显抑制作用(P<0.05)。结论获得并纯化了重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白(rSEB-D9N),其细胞毒性作用有所降低,但促人淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用仍较强,可作为研制升白细胞、抗肿瘤相关药物的候选突变体。
- 徐水凌王兆丰漆秋兰蒋晓玲王云华
- 关键词：葡萄球菌肠毒素B细胞毒性淋巴细胞增殖抑制肿瘤细胞
