王金凤
- 作品数：52 被引量：177H指数：8
- 供职机构：河北省动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：质检公益性行业科研专项项目国家质检总局科技计划项目河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 施马伦贝格病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立及应用
- 2015年
- 依据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因保守序列,设计了特异性引物和MGB荧光探针,建立了SBV实时荧光RT-PCR检测方法,构建标准曲线,进行特异性、敏感性和重复性等试验评价,并对绵羊和牛全血样品进行了检测。结果表明,所建立的SBV检测方法模板浓度与Ct值呈现良好的线性关系,相关系数R2为0.998;特异性强,仅对SBV RNA出现特异性扩增曲线;灵敏度高,对SBV RNA的检测灵敏度为10copies;重复性好,重复检测灵敏度CV<3%;对临床样品的检测均为SBV阴性。所建立的SBV实时荧光RT-PCR方法可以为SBV的诊断和流行病学调查提供一种快速、特异、敏感的检测手段。
- 王建昌王金凤段永生张永宁李静
- 关键词：施马伦贝格病毒S基因
- 高致病性PRRSV河北地方株的分离鉴定及部分Nsp2基因变异分析被引量：3
- 2010年
- 从唐山某猪场患高热病病料中分离到1株病毒,该病毒能在Marc-145细胞上增殖,产生细胞病变。经RT-PCR鉴定证明,该病毒为美洲型PRRSV,将其命名为TS02。应用设计的特异性引物扩增TS02株的Nsp2基因,并与国内外PRRSV分离株的Nsp2基因序列进行了比较。结果表明,TS02株Nsp2基因推导的氨基酸序列出现30个不连续的缺失,与PRRSV高致病性毒株JXA1、GD、WUH1、Jiangxi-3的核苷酸序列同源性分别为97.7%、97.7%、96.5%和97.1%。
- 王金凤张岭岭王娇赵泽坤孙继国袁万哲
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因
- PRRSV高致病性毒株RT-PCR鉴别诊断方法的建立被引量：1
- 2010年
- 根据GenBank中已发表的PRRSV的NSP2基因序列,设计一对特异性引物。针对经典型毒株与高致病性毒株,采用RT-PCR方法扩增,可分别扩增出相应的576bp,486bp的目的片段。从而在检测PRRSV的基础上,进一步区分PRRSV的经典型和高致病性毒株。通过对扩增条件的筛选,成功地建立了猪繁殖与呼吸综合征经典型与高致病性毒株的RT-PCR鉴别诊断方法,且为PRRSV分离株的鉴定分型及NSP2功能研究奠定了基础。
- 赵泽坤王娇王金凤张岭岭孙继国
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2RT-PCR
- 鸭肉冒充牛羊肉的分子生物学检测被引量：19
- 2012年
- 针对送检牛肉和羊肉样品,设计合成检测动物源性成分的通用引物,并对PCR产物测序后在NCBI数据库中进行比对;根据牛、羊、鸭源性成分检测的相关标准,合成引物和探针,进行送检样品中牛、羊和鸭源性成分的实时荧光PCR检测。结果表明:在7份送检样品中4份检测到鸭源性成分,2份检测到牛源性成分,1份检测到羊源性成分。实时荧光PCR方法灵敏性更高、特异性更强、结果判定更为迅速。
- 王建昌王金凤陈瑞春田振祥
- 关键词：通用引物实时荧光PCR
- 入境旅客非法携带番石榴中实蝇幼虫的分子鉴定被引量：1
- 2014年
- [目的]探索DNA条形码技术在实蝇快速鉴定中的应用。[方法]利用DNA条形码技术和BOLD系统,选取线粒体细胞色素氧化酶I(COI)基因片段,针对截获入境旅客非法携带的番石榴中实蝇幼虫进行序列测定、比对和分析,并对培养后的成虫进行形态学分类从而验证分子分类的结果。[结果]检测的11头实蝇幼虫全部鉴定为橘小实蝇[Bactrocera dorsalis(Hendel)]。[结论]为河北出入境检疫部门初步探索DNA条形码技术在实蝇快速鉴定中的应用及提升检疫工作的时效性奠定了技术基础。
- 李静王珅王建昌张毅邓宏飞王金凤
- 关键词：实蝇DNA条形码COI基因分子鉴定
- 河北进境种用动物衣原体血清学检测
- 2012年
- 衣原体病是一种重要的人畜共患病,给养殖业带来巨大的经济损失,同时严重威胁从业人员的身体健康。本研究对河北辖区引进的2批种鸡、2批种鸭及2批种猪进行抽样,使用间接血凝试验(IHA)检测引进种用动物的衣原体抗体。结果表明:衣原体IHA抗体阳性率为15.7%。在种鸡、种鸭和种猪中均检测到衣原体IHA抗体,阳性率分别为18.1%、4.2%和20%。这说明在引进种用动物中存在着较高的衣原体抗体阳性率,需要加强对该病的检测。
- 王建昌付琦王金凤田振祥
- 关键词：衣原体间接血凝试验
- 两株高致病性PRRSV河北分离株NSP2和ORF5基因的克隆及遗传变异分析被引量：1
- 2011年
- 从河北省保定某两个猪场疑似高致病性猪繁殖与呼吸综合征病料中分离出能引起Marc-145细胞病变的病毒，经RT-PCR鉴定证明，该病毒为美洲型PRRSV，分别命名为BDl和BD2株。并将其克隆、测序，与国内外PRRSV分离株的Nsp2和E基因序列进行了比较。结果表明，与PRRSV高致病性毒株JXA1、GD、WUH1、SY0608、HLrN0701的核苷酸序列同源性为95．3％~96．5％，BD1和BD2株ORF5基因存在部分突变，没有缺失，与国内高致病性PRRSV分离株JXA1、HUB1、Jiangxi．3、Henan-1、WUH1的同源性高达97．20／0-99-3％。
- 王金凤张岭岭韩庆安袁万哲孙继国
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因ORF5基因
- 河北省规模蛋鸡场H5亚型禽流感防控关键技术集成与示范
- 韩庆安曹立辉赵炎刘彦生井水兰宁必武李兰春王英利柴皓洁袁东芹王金凤张洪发马修国仇国明刘天驹
- 课题针对2004年以来中国国内陆续爆发了H5亚型高致病性禽流感疫情后，许多规模养鸡场虽有禽流感的防控意识和措施，但存在往往抓不住关键环节，不能有效防范禽流感疫情的发生，更缺乏禽流感风险评估和免疫效果评价的有效手段，总是处...
- 关键词：
- 关键词：养鸡场禽流感防治
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株ORF3基因的克隆及变异分析
- ＜正＞引言猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiration Syndrome,PRRS）是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的猪传染病。2006年夏我国爆发的高热病...
- 王娇赵泽坤孙继国王金凤张岭岭
- 文献传递
- 河北省猪三种病毒病的分子检测技术
- 孙继国袁万哲郑世学杨艳曹立辉刘娜赵正阳李艳琴张秀珊刘涛陈赛娟赵泽坤王娇张玲玲王金凤
- 针对猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型、猪脑心肌炎三种病毒病的分子检测技术展开研究。分析显示，河北省PRRSV流行毒株属于美洲型，分属于同一个亚群；分离到一株PRRSV流行株，建立了一种能快速区分PRRSV高致病株和经典...
- 关键词：
- 关键词：病毒病分子检测技术
