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PRRSV高致病性毒株RT-PCR鉴别诊断方法的建立被引量：1: 2010年; 根据GenBank中已发表的PRRSV的NSP2基因序列,设计一对特异性引物。针对经典型毒株与高致病性毒株,采用RT-PCR方法扩增,可分别扩增出相应的576bp,486bp的目的片段。从而在检测PRRSV的基础上,进一步区分PRRSV的经典型和高致病性毒株。通过对扩增条件的筛选,成功地建立了猪繁殖与呼吸综合征经典型与高致病性毒株的RT-PCR鉴别诊断方法,且为PRRSV分离株的鉴定分型及NSP2功能研究奠定了基础。; 赵泽坤王娇王金凤张岭岭孙继国; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2 RT-PCR

猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株ORF6基因的克隆及原核表达被引量：4: 2009年; 从河北沧州分离到一株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒,接种Marc-145细胞,经4代盲传,出现细胞病变,经鉴定为PRRSV,命名为HB-3(cz)株。根据GenBank公布的PRRSV JXA1株ORF6基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物(P1/P2),用RT-PCR方法扩增完整ORF6基因,将扩增产物连接到pGM-T载体并转化克隆菌,阳性重组质粒PGM-M进行序列测定与分析。后将克隆质粒PGM-M双酶切后连接原核表达载体pET-32a(+),在Rosseta-DE3中成功获得表达,经Western-blotting分析表明,表达蛋白与阳性血清发生特异性反应。; 王娇孙继国陈赛娟刘涛王坤赵泽坤; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒河北分离株 ORF6基因原核表达

猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株ORF3基因的克隆及变异分析: ＜正＞引言猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiration Syndrome,PRRS）是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的猪传染病。2006年夏我国爆发的高热病...; 王娇赵泽坤孙继国王金凤张岭岭; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白诊断试剂盒; 文献传递

河北省猪三种病毒病的分子检测技术: 孙继国袁万哲郑世学杨艳曹立辉刘娜赵正阳李艳琴张秀珊刘涛陈赛娟赵泽坤王娇张玲玲王金凤; 针对猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型、猪脑心肌炎三种病毒病的分子检测技术展开研究。分析显示，河北省PRRSV流行毒株属于美洲型，分属于同一个亚群；分离到一株PRRSV流行株，建立了一种能快速区分PRRSV高致病株和经典...; 关键词：; 关键词：病毒病分子检测技术

猪繁殖与呼吸综合征诊断方法研究进展被引量：5: 2010年; 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种高度传染性疾病,又称"猪蓝耳病"。该病以怀孕母猪流产、早产、死胎和木乃伊胎等繁殖障碍以及仔猪和育肥猪的呼吸道症状为特征。为了预防和控制该病,建立有效实用的诊断技术是一个重要环节,论文就实验室诊断、常见的血清学诊断以及生物学诊断予以综述。; 赵泽坤王娇王金凤张岭岭孙继国; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征

猪繁殖与呼吸综合征诊断方法研究进展: 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种高度传染性疾病,又称'猪蓝耳病'。该病以怀孕母猪流产、早产、死胎和木乃伊胎等繁殖障碍以及仔猪和育肥猪的呼吸道症状为特征。为了预防和控制该病,...; 赵泽坤王娇王金凤张岭岭孙继国; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征; 文献传递

PRRSV高致病性毒株的RT-PCR鉴别诊断及部分NSP2基因序列分析: 2010年; 为了区分猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的经典型和高致病性毒株,试验采用RT-PCR方法,根据GenBank中已发表的PRRSVNSP2基因序列设计1对特异性引物,针对经典型毒株与高致病性毒株分别扩增出相应的576bp、486bp的目的片段,并对4份阳性病料扩增的部分NSP2基因进行序列测定。结果表明:RT-PCR方法快速、敏感、特异,可以鉴别高致病性PRRSV,通过序列的测定分析发现所得部分NSP2基因有相同的缺失,从而补充和丰富了PRRSV毒株的基因组信息数据。; 赵泽坤王娇王金凤张岭岭孙继国李克良; 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2基因

造成兽药残留的原因及控制对策被引量：3: 2010年; 随着经济的发展,人民生活水平不断提高,人们对畜禽产品的需求量日益增加,兽药残留作为影响动物产品食用安全的重要因素,已成为人们普遍关注的一个社会热点问题。论文就造成兽药残留的原因及危害进行了较为全面的论述,并提出了相应的控制对策。; 王娇王坤王金凤张岭岭赵泽坤孙继国; 关键词：兽药残留

猪繁殖与呼吸综合征病毒TS株结构蛋白基因的克隆与变异分析: 2010年; 从河北唐山分离到一株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),接种Marc-145细胞,经2代盲传后出现细胞病变,经鉴定为PRRSV,命名为TS株。利用RT-PCR扩增出TS株各基因的cDNA片段,然后克隆入pMD19-T载体并测序。应用DNAStar软件,结合其它河北毒株与多株GenBank中已发表的PRRSV毒株相应基因进行序列比较。结果表明:PRRSV TS株与VR-2332同源性为88.9%-94.7%,与河北省2007年以来发现的8个毒株同源性很强,为98.0%-99.7%;与LV株的亲缘关系较远,同源性为61.2%-69.0%,属于美洲型。遗传进化树表明国内美洲型分离株明显分为2个亚群,所有河北省流行毒株属于同一亚群,且TS株与高致病性代表毒株JXA1关系非常近。本研究将为河北省预防和控制PRRS提供重要的理论数据。; 王娇赵泽坤王坤孙继国; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白基因遗传变异分析

高致病性PRRSV河北地方株的分离鉴定及部分Nsp2基因变异分析被引量：3: 2010年; 从唐山某猪场患高热病病料中分离到1株病毒,该病毒能在Marc-145细胞上增殖,产生细胞病变。经RT-PCR鉴定证明,该病毒为美洲型PRRSV,将其命名为TS02。应用设计的特异性引物扩增TS02株的Nsp2基因,并与国内外PRRSV分离株的Nsp2基因序列进行了比较。结果表明,TS02株Nsp2基因推导的氨基酸序列出现30个不连续的缺失,与PRRSV高致病性毒株JXA1、GD、WUH1、Jiangxi-3的核苷酸序列同源性分别为97.7%、97.7%、96.5%和97.1%。; 王金凤张岭岭王娇赵泽坤孙继国袁万哲; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2基因

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王娇