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黄彦: 作品数：18 被引量：49H指数：3; 供职机构：南京农业大学生命科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省杰出青年基金国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：生物学环境科学与工程化学工程农业科学更多>>

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植物乳杆菌G63电转化方法的优化被引量：6: 2016年; 为获得植物乳杆菌G63高效的电转化方法,本研究从细胞生长状态、细胞弱化剂质量浓度、洗涤液、质粒添加量和电击参数等方面对菌株G63的电转化效率进行优化。结果表明:取菌株G63对数生长中期的细胞制备感受态,以1 g/100 m L甘氨酸作为细胞弱化剂,分别用1 mmol/L Mg Cl2和30 g/100 m L聚乙二醇1000洗涤细胞,并用30 g/100 m L聚乙二醇1000作为电击液,加入20μg穿梭质粒,在1.5 k V和400Ω条件下进行电击,可以获得最高的电转化效率,转化效率达到1.18×103 CFU/μg DNA,满足后续遗传学实验要求。; 范璟席雪冬黄彦崔中利; 关键词：植物乳杆菌电转化

Pseudomonas putida DLL-E4中非编码RNA ins1、ins2对菌株降解对硝基苯酚的调控作用的初步研究: 硝基酚类化合物应用广泛,可作为原材料或中间体被应用于炸药、医药、杀虫剂、染料、木材防腐剂和橡胶等生产中。对硝基苯酚（PNP）是其中最重要的硝基酚类污染物,具有'三致'作用。PNP可通过多种方式进入到环境中,如化学工业中产...; 涂辉陈琼珍叶现丰黄彦崔中利; 关键词：硝基苯酚菌株降解葡萄糖代谢; 文献传递

硝磺草酮抗性菌株的筛选及抗性基因的克隆表达被引量：3: 2015年; 【目的】从采集的土壤中筛选出硝磺草酮的抗性菌株,并从中克隆对羟苯基丙酮酸双加氧酶抗性基因。【方法】以酪氨酸为唯一碳源,采用富集培养法筛选分离硝磺草酮抗性菌株,利用16S r RNA基因序列分析对菌株进行初步鉴定。通过PCR扩增获得其HHPD基因序列,构建p ETH4表达载体并在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行异源表达。通过检测色素在440 nm处的吸收值分析菌株E.coli BL21(DE3)-p ETH4对硝磺草酮的抗性特性。【结果】在含10 mmol/L硝磺草酮和1 g/L酪氨酸的选择培养基上,分离得到7株硝磺草酮抗性细菌,1株为不动杆菌属,2株为无色杆菌属,4株为假单胞菌属。从抗性最佳的Pseudomonas sp.AM-H4中扩增得到HPPD的基因片段为1 056 bp,其序列与Acinetobacter baumannii基因组中HPPD的基因序列相似性达到99%,341位点由天冬氨酸突变为丙氨酸。HPPD基因在大肠杆菌中实现异源表达,蛋白分子量大小约40 k D。菌株E.coli BL21(DE3)-p ETH4在40μmol/L硝磺草酮酪氨酸LB培养基中的色素吸收值显著降低,能够耐受高于200μmol/L的硝磺草酮。【结论】克隆获得的HPPD具有良好的硝磺草酮抗性,将在新除草剂抗性作物选育中有一定的应用潜力。; 黄彦夏冰洁崔中利; 关键词：抗性菌株基因克隆与表达

非编码RNA对Pseudomonas putida DLL-E4菌降解对硝基苯酚的调控作用的初步研究: 对硝基苯酚(PNP)是重要的硝基酚类污染物，具有"三致"作用.PNP可通过多种方式进入到环境中，如化学工业中产生的废水废气、有机磷农药使用过程中的水解、贮运生产过程中的意外事故而造成的泄漏等.; 涂辉陈琼珍黄菲黄彦崔中利

粘细菌Corallococcus sp.strain EGB及其培养发酵液的安全性评估被引量：2: 2022年; 【目的】研究粘细菌Corallococcus sp.strain EGB及其细胞培养发酵液的毒理安全性,为菌株EGB作为新型生防微生物菌剂的开发和环境施用安全性提供一定的科学基础。【方法】通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验测定粘细菌EGB菌体及其细胞培养发酵液的遗传毒性;通过经口灌胃的方式测定粘细菌EGB菌体及其细胞培养发酵液对ICR小鼠的急性毒性和28 d亚急性毒性。【结果】Ames试验、微核试验和精母细胞染色体畸变试验结果表明,与对照组相比,EGB菌体及其细胞培养发酵液无基因突变能力,对ICR小鼠无明显的遗传毒性。EGB菌体及其细胞培养发酵液对ICR小鼠的急性经口半致死剂量(LD50)>10 g/kg BW(body weight);连续灌胃28 d后,处理组ICR小鼠的体重变化、采食饮水、血液生化指标、血常规、主要脏器指数和主要器官病理切片与对照组相比无显著差异(P<0.05)。【结论】粘细菌EGB菌体及其细胞培养发酵液的毒理安全性属于无毒类别,粘细菌的生物安全性使其在工农业领域的植物病害控制和生物转化等方面具有潜在的应用价值。; 乔燕夏丞垚李永凯李周坤叶现丰罗雪黄彦曹慧崔中利; 关键词：发酵液安全评估遗传毒理

施肥和季节演替对水稻根际土壤固氮微生物和根系内生固氮微生物多样性的影响: 水稻是我国的重要粮食作物，对氮素营养需求量大，水田条件下由于各种环境条件导致氮素易流失。氮素的供给来源于两个方面，一是生物固氮，二是化学氮肥。研究表明一些固氮菌能定植在水稻植株体内，具有促进植物生长、提高作物产量、生物防...; 罗雪王文辉黄彦崔中利

Rhodococcus sp.T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶酶学性质及分离纯化被引量：1: 2015年; [目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵（FE）降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸（FA）。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供更多的理论依据。[方法]以酯酶的通用底物乙酸-1-萘酯作为定量测定胞内酯酶活力的底物,分析温度和p H值对酯酶活力和稳定性的影响,同时探讨金属离子对酯酶活力的影响;通过硫酸铵沉淀、疏水层析、DEAE离子交换层析和Superdex-200凝胶层析柱组合技术对精恶唑禾草灵酯酶进行分离纯化,计算了纯化过程中酯酶的比活力、纯化倍数和回收率。[结果]胞内酯酶最适反应p H值为8.0,在p H 4.0-10.0内处理24 h活性稳定;最适反应温度为42℃,在温度50℃以下处理30 min活性稳定;1.0 mmol·L^-1Ag^＋对酯酶活力有强烈的抑制作用。纯化后的酯酶比活力从0.058 U·mg^-1提高到21.5 U·mg^-1,纯化倍数为369.5倍,回收率为3%。纯化后的粗酶经SDS-PAGE电泳后至少有4条明显的蛋白条带,通过酶谱确定精恶唑禾草灵酯酶条带的相对分子质量为42.3×10^3。[结论]精恶唑禾草灵酯酶具有较好的酸碱稳定性和热稳定性,在精恶唑禾草灵污染土壤修复中可能具有较好的应用潜力。; 董维亮侯颖王飞李周坤黄彦崔中利; 关键词：RHODOCOCCUS 精恶唑禾草灵分离纯化酶学性质

Pseudomonas putida DLL-E4中非编码RNA ins1、ins2对菌株降解对硝基苯酚的调控作用的初步研究: 硝基酚类化合物应用广泛,可作为原材料或中间体被应用于炸药、医药、杀虫剂、染料、木材防腐剂和橡胶等生产中。对硝基苯酚(PNP)是其中最重要的硝基酚类污染物,具有"三致"作用。PNP可通过多种方式进入到环境中,如化学工业中产...; 涂辉陈琼珍叶现丰黄彦崔中利

对硝基苯酚的生物降解研究进展被引量：3: 2021年; 对硝基苯酚是一类用途广泛的化工原料和药物中间体,在自然环境中半衰期较长,对生态环境造成威胁,被认定为环境内分泌干扰物,被列入我国优先控制污染物名单。目前,生物降解、化学氧化、光催化以及物理吸附等手段在对硝基苯酚降解中发挥着重要的作用,生物修复作为一种由微生物介导的、可持续的、环境友好型的污染物降解和脱毒方法,与化学和物理修复方法相比,在使用效率和生态环保方面具有明显优势。微生物是生物降解的核心,本文对对硝基苯酚的危害、降解性微生物及其微生物降解途径,微生物植物联合修复等方面的研究进展进行综述,同时也讨论了目前对硝基苯酚的微生物降解过程中存在的问题,旨在为利用功能微生物的降解作用保护土壤和水体健康提供理论参考。; 夏丞垚陈琼珍沈文静黄彦叶现丰曹慧崔中利; 关键词：对硝基苯酚优先控制污染物生物降解微生物修复

黏细菌捕食生物学研究进展及其在农业领域的应用潜力被引量：7: 2021年; 黏细菌(myxobacteria)是一类具有多细胞群体行为特征的捕食性微生物类群,能够以活的微生物细胞或者其他生物大分子作为食物获取营养,同时能够形成抗逆性强的子实体和黏孢子,从而使黏细菌具有良好的环境适应性。黏细菌对于植物病原真菌和细菌的捕食特性使其在植物病害防治方面具有重要的应用潜力,被视为是新的生防微生物类型。本文综述黏细菌对于微生物的捕食机制以及捕食行为的生态学功能,概述捕食性黏细菌作为一种新型的生防微生物在病害防治方面的应用潜力。在此基础上,也讨论目前黏细菌捕食生物学研究存在的问题,旨在为黏细菌捕食作用的深入研究及其在农业生产上的实际应用提供参考。; 李周坤叶现丰杨帆黄彦范加勤王辉崔中利; 关键词：黏细菌生防微生物植物病害防治

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