全碧波
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
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- 15-脱氧前列素2抑制MG63细胞活性并诱导其凋亡的机制
- 2014年
- 目的研究过氧化物酶体增殖活化受体(PPAR)γ的内源性配体15-脱氧前列素2(15d-PGJ2)对骨肉瘤细胞株MG63的增殖活性的影响及诱导其凋亡可能的作用机制。方法采用人骨肉瘤细胞MG63,分别用终浓度为0.1、1、5、10和50μmol/L15d-PGJ2处理,对照组不给予药物,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定药物作用24 h、48 h、72 h及96 h细胞增殖的变化;流式细胞术(FCM)结合Annexin V/PI双染色观察终浓度5μmol/L和20μmol/L15d-PGJ2作用48 h和72 h MG63细胞周期变化及诱导细胞凋亡和坏死情况;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测终浓度20μmol/L15d-PGJ2处理48 h对MG63细胞中PPARγm RNA的表达影响;通过免疫细胞化学技术检测终浓度20μmol/L15d-PGJ2作用48 h,MG63细胞中凋亡相关蛋白caspase3,p53和Bax/bcl-2的表达情况。结果 MTT结果显示:1各浓度15 d-PGJ2作用24 h、48 h、72 h及96 h,对MG63细胞增殖均有抑制作用,48 h达到最佳抑制效果。48 h、72 h及96 h抑制率两两比较均无差异(P>0.05),且50μmol/L对细胞的抑制率几乎达100%;2在各时间点,各浓度组间比较均有差异(P=0.000),在0.1~50μmol/L浓度组区间,相同时间点的抑制率有随浓度升高而递增的趋势。流式细胞术检测结果显示:不同浓度的各细胞周期分布差异有统计学意义(P=0.000)。加药组G0/G1期细胞比例均高于对照组,S和G2/M期相应减少,且细胞凋亡率增高,表明加药组可使细胞G0/G1期阻滞且诱导细胞凋亡;RT-PCR检测PPARγm RNA的表达,并同时逆转录稳定的内参片段β-actin,以二者的面积灰度值比值作为该m RNA的相对表达量,20μmol/L 15d-PGJ2作用48 h,PPARγm RNA的相对表达量(2.06±0.35)与对照组(0.94±0.23)比较有差异(P<0.05);免疫细胞化学结果显示:药物干预组凋亡相关蛋白caspase3和Bax表达与对照组比较显著增加,而p53和bcl-2表达下降(P<0.05)。结论 1PPARγ激动剂15d-PGJ2能明显抑制人骨肉瘤MG63细胞的生长,引起细胞G1期阻滞并诱�
- 全碧波张善锋李月白李晓坤李啸然李洁
- 关键词：过氧化物酶体增殖活化受体骨肉瘤MG63凋亡
- PPARγ激动剂罗格列酮对人骨肉瘤MG63细胞抑制生长及促进凋亡的作用
- 目的:探讨PPARγ激动剂罗格列酮对骨肉瘤的作用机制.
方法:用不同浓度的罗格列酮处理MG63细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定药物对细胞的生长抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布;TUNEL法检测细...
- 王义生李月白李啸然杨妍李晓坤全碧波
- 关键词：罗格列酮PPARΓ骨肉瘤MG63凋亡
- 过氧化物酶体增殖活化受体γ激动剂罗格列酮对MG63细胞抑制生长及促进凋亡的作用
- 2011年
- 目的观察过氧化物酶体增殖活化受体γ（PPARγ）激动剂罗格列酮对骨肉瘤细胞株MG63的生长抑制及诱导凋亡作用。方法取人骨肉瘤MG63细胞，用终质量浓度为0．5、5．0、50．0、100．0μmol／L罗格列酮分别处理细胞，对照组不给予药物，噻唑蓝（MTT）比色法测定药物作用24、48、72h对细胞生长的抑制率；流式细胞术（FCM）检测终质量浓度0、0．5、5．0、50．0μmol／L罗格列酮处理24、48h细胞周期分布；TUNEL法检测终质量浓度0．5μmol／L罗格列酮处理48h的细胞凋亡，并计算凋亡指数（AI）。结果细胞生长抑制率：（1）罗格列酮各浓度作用24、48、72h，2个时间点抑制率两两比较的差异均有统计学意义（P〈0．01），有随时间增长而增加的趋势，其中0．5μmol／L对细胞的抑制率（％）分别为30．10±0．01、46．70±0．01和48．80±0．02；（2）在各时间点，各浓度组间比较差异均有统计学意义（P〈0．01），在0．5—50．0μmol／L浓度组区间，相同时间点的抑制率有随浓度升高而降低的趋势。细胞周期：（1）不同浓度的各细胞周期分布差异有统计学意义（P〈0．01）。在24、48h时间点均表现为用药组G0／G1期细胞比例高于对照组，0．5μmol／L组细胞比例最高，但随用药浓度增加，G0／G1期比例有下降趋势；用药组S期细胞比例均低于对照组，随用药浓度增加，S期比例有增高趋势；即用药可将细胞周期阻滞在G0／G1期的作用；（2）不同时间点间细胞周期分布变化的差异无统计学意义（F=0．36，P〉0．05）。细胞凋亡：0．5μmol／L组凋亡率（14．33±3．35）％明显高于对照组（2．82±0．63）％（P〈0．01），光镜下可见药物组细胞核固缩及散在的凋亡小体。结论PPARγ激动剂罗格列酮能明显抑制人骨肉瘤MG63细胞的增殖，诱导该细胞G1期阻滞和细胞凋亡。
- 李啸然李月白杨妍李晓坤全碧波王义生
- 关键词：罗格列酮PPARΓ脱噬作用
- 盐酸夫拉平度对人骨肉瘤细胞MG63细胞周期及凋亡的影响被引量：1
- 2014年
- 目的：观察不同浓度盐酸夫拉平度（FP）对人骨肉瘤MG63细胞增殖活力、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法：用含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养液常规培养MG63细胞,取对数生长期增殖旺盛细胞分为对照组和不同浓度FP干预组。MTT比色法测定不同浓度的FP对细胞增殖活性的影响;流式细胞术检测不同浓度的FP干预24和48 h后细胞周期变化和凋亡情况;RT-PCR测定不同浓度FP干预后,细胞周期相关基因表达的变化;Western blot检测细胞内CDK2蛋白表达变化。结果：50-2 000 nmol/L FP可抑制MG63细胞增殖活性,且有时间和浓度依赖性（F时间=319.470,F浓度=616.988,P均〈0.001）;不同浓度的FP分别干预MG63细胞不同时间后均可引起细胞G2期阻滞（F24 h=6.805,F48 h=12.000,P均〈0.001）,凋亡率增加（P均〈0.001）,且可明显降低MG63细胞中CDK2、Survivin mRNA及CDK2蛋白的表达（FmRNA=415.517、15.068,F蛋白=50.405,P均〈0.001）。结论：FP可抑制人骨肉瘤MG63细胞增殖及周期相关蛋白的表达,同时使细胞G2/M期阻滞并诱导细胞凋亡。
- 李洁施佳辰李啸然李月白全碧波宋石王义生
- 关键词：MG63凋亡CDK
