宋恩 作品数:20 被引量:38 H指数:3 供职机构: 昆明医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省重点新产品开发计划 云南省卫生科技内设研究机构项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
白细胞介素-18与深静脉血栓疾病的相关性研究 被引量:3 2015年 目的探讨白细胞介素-18(IL-18)的表达变化与深静脉血栓疾病(DVT)发生、发展的相关性及临床意义。方法收集临床DVT病例(DVT组,n=40)、实验对照组(n=40)、健康对照组(n=20)的血液,以ELISA法检测其中IL-18的表达并分析差异;培养原代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)行目标蛋白免疫荧光检测明确其定位;构建人IL-18过表达和干扰病毒载体(IL-18-pCDH-GFP、IL-18-LMP-shRNAmir1)感染HUVECs并进行基因表达谱芯片检测和KEGG Pathway等生物信息技术,分析IL-18与疾病的相关性。结果人血ELISA检测发现在DVT组和两对照组中IL-18的表达差异均有统计学意义(F=11.248,P<0.01);实验对照组与健康对照组之间IL-18的表达差异无统计学意义(P>0.05);免疫荧光检测显示目标蛋白定位于细胞质;人IL-18过表达和干扰载体经病毒转染后感染HUVECs;基因芯片检测发现与正常细胞比较,过表达载体IL-18-pCDH-GFP感染细胞有17条信号通路下调、16条上调;干扰载体IL-18-LMP-shRNAmir1感染细胞有23条信号通路下调、9条上调。结论 IL-18对HUVECs有确切影响,同时与DVT疾病密切相关,有希望作为深静脉血栓疾病临床预测诊断的候选分子标记物。 李光第 宋恩 赵学凌 白云城 彭志 周如丹关键词:静脉血栓形成 白细胞介素18 分子标记物 肱二头肌长头腱韧带样型纤维瘤病一例及文献复习 2017年 患者男性,66岁,主因右肩关节疼痛、活动无力半月余为主诉入院。门诊以"右肱二头肌长头腱损伤"收入昆明医科大学第一附属医院运动医学科。查体:右肩关节皮肤色泽正常,无淤青、肿胀,右上臂可见一大小约5cm×8cm肿物,大力水手征(+)见图1~2。右上肢皮肤感觉无异常,无麻木,感觉减退,肱骨上段肌间沟处压痛, 宋恩 李彦林 王福科 蔡国锋 何川 王国梁关键词:肱二头肌长头腱 肩关节活动度 皮肤感觉 肌间沟 右上臂 过表达或抑制IL-18对大鼠深静脉血栓形成的影响 被引量:1 2015年 目的 :探讨白介素(interleukin,IL)-18对大鼠深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)模型血栓形成的影响。方法 :构建IL18-p CDH-GFP、IL18-LMP-sh RNAmir1病毒载体。SD大鼠(n=27)随机均分为3组。过表达组:尾静脉注入IL-18慢病毒过表达载体(IL18-p CDH-GFP,100μl);抑制组:注入IL-18逆转录病毒抑制载体(IL18-LMP-sh RNAmir1,100μl);对照组:注入无菌生理盐水(100μl)。注射24 h后,SD大鼠行狭窄法下腔静脉(inferior vena cava,IVC)血栓造模,造模后24 h解剖观察IVC血栓形成情况,并取材称量血栓重量及长度;血栓静脉管壁行实时荧光定量PCR检测IL-18表达情况。结果:IL18-p CDH-GFP、IL18-LMPsh RNAmir1病毒载体的体外细胞实验具备理想的过表达率及抑制率。各组大鼠造模后24 h可见稳定血栓形成。IL-18过表达组的平均成栓长度和重量较IL-18抑制组、对照组明显增加(P<0.05),real-time PCR结果显示过表达组中IL-18在大鼠静脉壁表达量明显增加(F=3.784,P<0.05)。结论:IL-18表达量增加,对大鼠DVT造模后IVC血栓形成有促进作用,而表达减少亦对成栓有影响,其表达状况与深静脉血栓的发生、发展有关,IL-18介导的促炎反应在静脉血栓疾病发病机制中可能起重要作用。 李光第 白云城 宋恩 周如丹 王扬 王宫泽 卜鹏飞 赵学凌关键词:白介素-18 深静脉血栓 促炎症反应 MCP-1转染人脐静脉内皮细胞过表达/沉默后相关信号通路研究 2014年 目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)转染人脐静脉内皮细胞过表达/沉默后相关信号通路与深静脉血栓形成的关系。方法培养人脐静脉内皮细胞行免疫荧光、免疫共沉淀检测,构建人MCP-1细胞系过表达/沉默载体,基因表达谱芯片检测人MCP-1细胞系过表达/沉默后转录谱变化并行生物信息技术分析。结果培养人脐静脉内皮细胞;构建人MCP-1过表达/干扰载体MCP-1-p CDH-GFP/MCP-1-LMP sh RNAmir1经病毒转染后感染HUVECs;基因芯片检测发现与正常细胞相比,过表达载体MCP-1-p CDH-GFP转染细胞有18条信号通路下调,7条信号通路上调;干扰载体MCP-1-LMP sh RNAmir1转染细胞有60条信号通路下调,15条信号通路上调。结论MCP-1转染人脐静脉内皮细胞后相关信号通路为深静脉血栓疾病分子层面研究提供新的思路,MCP-1可能在深静脉血栓形成发生发展过程中发挥重要作用。 宋恩 李光第 周如丹 赵学凌关键词:单核细胞 趋化因子类 内皮 脐静脉 单核细胞趋化蛋白-1 人脐静脉内皮细胞 携载增强型绿色荧光蛋白基因慢病毒转染骨髓间充质干细胞示踪方法 2019年 目的本实验研究旨在研究使用携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced Green Fluorescent Protein,eGFP的慢病毒转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)的方法,用于解决组织工程骨研究中种子细胞分化、增殖过程中的示踪问题。方法用携带eGFP的慢病毒转染第3 代BMSCs,用流式细胞仪检测转染率,获得稳定表达eGFP 的BMSCs,并通过描绘生长曲线来判定对BMSCs 增殖性能的影响。结果当MOI值为70 时,经eGFP 慢病毒转染后的BMSCs 能够得到活性较好、转染率高的eGFP-BMSCs;转染后各细胞生长曲线呈"S"形,MOI=70 与MOI=0 时细胞增殖最好,MOI=100 会对BMSCs 增殖造成影响。结论MOI=70 时携载eGFP基因慢病毒转染BMSC效果最好。 王福科 张红 杨桂然 肖渝 何川 宋恩 李彦林关键词:EGFP基因 慢病毒 转染 骨髓间充质干细胞 血小板膜糖蛋白Ⅰbα、血管性血友病因子表达水平与深静脉血栓进展的相关性 被引量:8 2014年 目的 观察血液血小板膜糖蛋白Ⅰbα(GPⅠbα)、血管性血友病因子(vWF)表达水平与静脉血栓性疾病(VTE)进展的相关性。方法 SD大鼠下腔静脉(IVC)血栓造模,检测造模后2、8、24、72 h各组大鼠血液中GPⅠbα、vWF的变化情况;收集30例DVT患者、30例实验对照患者、30例健康对照者血样,ELISA法检测GPⅠbα、vWF的表达水平并进行比较分析。结果 大鼠造模后,假手术组与模型组血GPⅠbα、vWF水平均呈增高趋势。在下腔静脉受损、血栓形成的起始阶段(2 h),GPⅠbα、vWF水平未明显增高;而在2~24 h血栓形成高峰阶段,假手术组与模型组GPⅠbα、vWF水平升高,模型组GPⅠbα、vWF升高更显著;24~72 h稳定血栓形成,GPⅠbα水平降低,模型组和假手术组vWF水平仍表现高于2 h和对照组。DVT患者组GPⅠbα、vWF表达水平高于无DVT患者组及健康人对照组(P〈0.05)。结论 血GPⅠbα、vWF表达水平随DVT发生而升高,与VTE的进展相关。 李光第 宋恩 周如丹 王宫泽 王扬 赵学凌关键词:血管性血友病因子 深静脉血栓 DVT形成前Arg1、eNOS表达变化与血栓形成的基础及临床初步研究 [目的] 针对TDVT大鼠股静脉内皮组织、血细胞,重点关注深静脉血栓形成前,形成高峰期关键状态,检测精氨酸酶1(Arg1)、内皮细胞损伤相关因子vWF及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达变化;针对人血细胞,重点关注深静脉... 宋恩关键词:ENOS VWF 深静脉血栓形成 内皮细胞 文献传递 创伤性深静脉血栓模型大鼠及精氨酸酶Ⅰ表达的变化(英文) 被引量:5 2011年 背景:近期相关研究发现精氨酸酶Ⅰ与多种心血管疾病发生发展有关, 但国内外相关研究大都集中在动脉, 并未对静脉性疾病, 进行广泛研究。目的:观察深静脉血栓形成模型大鼠精氨酸酶Ⅰ的表达变化, 分析其在深静脉血栓形成过程中可能发挥的作用。方法:将100只SD大鼠随机分为正常对照组和模型组,采用血管钳夹股静脉+双后肢髋人字石膏外固定制动的方式建立大鼠创伤性深静脉血栓模型, 根据不同的观察时间点和血栓形成的不同病理生理过程情况分为血栓形成前组、血栓形成高峰期组和无血栓形成组,提取各组血液RNA,应用实时荧光定量 PCR 检测精氨酸酶Ⅰ在各组血细胞中的表达变化。结果与结论:血栓形成高峰期组精氨酸酶Ⅰ表达量比其他3组明显上升(P <0.01),正常对照组、血栓形成前组和无血栓形成组精氨酸酶Ⅰ表达差异无显著性意义 (P>0.05)。提示精氨酸酶Ⅰ与深静脉血栓形成密切相关。 宋恩 李云建 章玉冰 姚黎清 周如丹 李宏昆 李兴国 张春强 王兵 赵学凌关键词:深静脉血栓形成 动物模型 一氧化氮 一氧化氮合酶 β2-GP1、VEGF、TF与大鼠DVT形成的关系 被引量:3 2014年 目的建立大鼠下腔静脉狭窄法深静脉血栓(DVT)模型,检测大鼠血液中β-2糖蛋白1(β2-GP1)、血管内皮生长因子(VEGF)、组织因子(TF)表达变化,研究其与DVT形成的关系。方法 70只SD大鼠,随机分为对照组(10只),假手术组(30只),模型组(30只),模型组于造模后2 h、8 h、24 h分为3个亚组,采集各组大鼠下腔静脉血5 m L,ELISA法检测β2-GP1、VEGF、TF水平。结果大鼠血液中β2-GP1、VEGF、TF表达在对照组与假手术组间比较无统计学差异(P〉0.05),造模后2~24 h,β2-GP1、VEGF、TF在血液中的表达呈上升趋势,24 h时达峰值,高于对照组、假手术组、造模后2 h组和造模后8 h组(P〈0.01),其余4组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论大鼠DVT形成过程中,β2-GP1、VEGF、TF可能起到促进血栓形成的作用。 宋恩 李光第 娄振凯 王扬 赵学凌关键词:血管内皮生长因子类 凝血致活酶 静脉血栓形成