徐辉明
- 作品数：6 被引量：25H指数：2
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 虎纹镇痛活性肽在毕赤酵母中的分泌表达被引量：2
- 2001年
- 虎纹镇痛活性肽HWAP Ⅰ是从虎纹捕鸟蛛初毒中分离纯化 ,具有镇痛活性的多肽类神经毒素 .为了在P .pastoris中高效分泌表达HWAP Ⅰ ,依照RT PCR的结果 ,人工合成编码虎纹镇痛活性肽的基因片段 ,与酵母表达载体 pPIC9K重组 ,构建表达质粒pPIC9K HWAP Ⅰ .转化GS115宿主菌后 ,筛选出整合型His+ MutS 表达菌株 .经诱导培养后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)证明HWAP Ⅰ在毕赤酵母中能有效分泌表达 ,产物的分子质量为 4ku左右 ,产量达 80mg/L .
- 何宁佳聂东宋徐辉明李敏梁宋平
- 关键词：分泌表达虎纹捕鸟蛛
- 虎纹捕鸟蛛毒素的抗菌活性探讨被引量：3
- 2001年
- 从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离得到 2种多肽毒素 ,huwentoxin -Ⅰ和huwentoxin -Ⅱ。抗菌实验结果表明 ,这 2种多肽毒素能抑制革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌及啤酒酵母菌的生长 。
- 徐辉明梁宋平李敏黄沙礼赵宗先
- 关键词：虎纹捕鸟蛛毒素抗菌作用
- 化学合成虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅱ基因的克隆
- 2000年
- 报道了全化学合成虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅱ (HWTX Ⅱ )基因 ,在克隆载体pBluescript中的克隆 .但HWTX Ⅱ基因在表达载体pGEX KT中几乎无表达 .根据以前成功地表达全化学合成虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅰ (HWTX Ⅰ )基因的实验结果 ,对在同一表达系统所构建的HWTX Ⅰ与HWTX Ⅱ基因的表达产物进行比较 ,认为HWTX Ⅰ与HWTX Ⅱ在原核表达系统的表达行为上的差异有助于我们进一步探讨HWTX
- 徐辉明陈嘉勤梁宋平李敏
- 关键词：蜘蛛化学合成克隆
- 虎纹捕鸟蛛毒素-1基因的克隆、测序及在毕赤酵母系统的分泌表达
- 虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(Huwentoxin-Ⅰ,HWTX-Ⅰ)是90年代初从中国珍稀毒蛛种虎纹捕鸟蛛(Selenocosmia Huwena) 毒腺中分离的一种新型肽类神经毒素,33个氨基酸,二维核磁共振方法解析HWTX-...
- 李敏周政何宁佳聂东宋徐辉明梁宋平
- 关键词：毕赤酵母分泌表达捕鸟蛛
- 文献传递
- 重组虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ在巴氏毕赤酵母中的表达及纯化被引量：20
- 2002年
- 虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离纯化 ,具有镇痛活性的肽类神经毒素。对巴氏毕赤酵母生产的重组HWTX Ⅰ进行多步纯化 ,首先将分泌到培养上清的rHWTX Ⅰ进行 90 %饱和度的 (NH4) 2 SO4沉淀 ,再用截留分子量 3kD的滤膜脱盐 ,再用CM阳离子交换层析分离 ,最后用C1 8反相层析脱盐纯化 ,真空干燥后得到的rHWTX Ⅰ经TricineSDS PAGE ,质谱鉴定 ,氨基酸组成分析 ,N 端序列测定及活性鉴定 ,证明已获得高纯度的重组HWTX Ⅰ ,摇瓶表达量约为 80mg L ,约占总分泌量的 2 3.6 % ,并对摇瓶发酵条件进行了优化 ,为利用基因工程方法生产HWTX
- 聂东宋李敏徐辉明何宁佳梁宋平
- 关键词：分泌表达分离纯化巴氏毕赤酵母
- 蜘蛛神经肽类毒素基因的克隆和在Pichia Pastoris的表达
- 虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(Huwentoxin-Ⅰ,HWTX-Ⅰ)是90年代初从中国珍稀毒蛛种虎纹捕鸟蛛(SelenocosmiaHuwena)毒腺中分离的一种新型肽类神经毒素,33个氨基酸,二维核磁共振方法解析HWTX-Ⅰ的...
- 李敏周政何宁佳聂东宋徐辉明梁宋平
- 关键词：重组子毒素基因神经肽类
- 文献传递
