- 2型糖尿病患者单核细胞TLR4表达及其与血浆TNF-α相关性研究被引量：6
- 2009年
- 目的探讨2型糖尿病患者单核细胞TLR4表达的变化及其与血浆炎症因子TNF-α的关系。方法应用实时定量PCR及流式细胞仪检测22例2型糖尿病患者及20例健康对照者外周血单核细胞TLR4 mRNA表达及TLR4阳性单核细胞比率，应用ELISA法检测血浆TNF-α浓度。结果2型糖尿病患者外周血单核细胞TLR4 mRNA相对表达量及TLR4阳性单核细胞比率为3．05±0．56、（14．93±3．48）％明显高于对照组1．48±0．30、（7．79±1．63）％（P〈0．05），血浆TNF-α浓度为（49．29±7．09）ng／L，高于对照组（39．55±5．22）ng／L（P〈0．05），TLR4阳性单核细胞比率与血浆TNF-α浓度正相关（r=0．543，P〈0．05）。结论2型糖尿病患者单核细胞TLR4表达增高，单核细胞TLR4可能参与了2型糖尿病的炎症反应。
- 陈海英曲鹏丁彦春王虹艳牛楠徐丹李蕾
- 关键词：2型糖尿病炎症动脉粥样硬化
- RNAi特异性抑制A20基因对H_2O_2诱导人脐动脉血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 背景:锌指蛋白A20是近年来细胞内源性保护机制研究的新靶点,目前研究表明锌指蛋白A20抑制肿瘤坏死因子,脂多糖等多种炎性细胞因子诱导核因子κB信号通路激活所引起的血管平滑肌细胞增殖,但有关A20抗细胞氧化损伤方面的影响报道甚少。目的:观察锌指蛋白A20基因干扰对H2O2诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞增殖和细胞核中核因子κB表达的影响及可能的分子生物学机制。设计、时间及地点:随机对照实验,于2007-03/2008-06在大连医科大学附属第二医院中心实验室完成。材料:体外培养人脐动脉血管平滑肌细胞,构建针对Genbank中人A20的基因序列,采用脂质体LipofectamineTM2000介导80pmolsiRNA,6μL转染。方法:将培养的第4代人脐动脉血管平滑肌细胞随机分6组,①空白组:培养基培养,未给与任何干预。②A20siRNA组:转染A20 siRNA 24h。③scramblesiRNA组:转染阴性对照scramblesiRNA24h。④H2O2组:H2O2持续刺激6h。⑤H2O2+A20siRNA组:转染A20siRNA24h后H2O2持续刺激6h。⑥H2O2+scramblesiRNA组:转染阴性对照scramblesiRNA24h后H2O2持续刺激6h。主要观察指标:以RT-PCR,Western-blotting检测A20基因表达变化,以四甲基偶氮唑蓝方法测定细胞增殖活性,以流式细胞技术观察血管平滑肌细胞细胞周期的变化,以Western-blotting检测细胞核中核因子κBp65的蛋白含量表达。结果:H2O2组细胞增殖率明显高于空白组,但低于H2O2+A20siRNA组(P<0.05)。H2O2组S期、G2/M期构成百分比,增殖指数均较空白组明显升高,然而较H2O2+A20siRNA组明显降低(P<0.05),空白组A20mRNA与蛋白有微弱表达,A20siRNA组较空白组表达减少(P<0.05);H2O2组A20mRNA与蛋白表达明显高于空白组但显著低于H2O2+A20siRNA组(P<0.05)干扰效率大约55%。细胞核中核因子κBp65有少量表达;A20siRNA干扰后核因子κBp65含量明显增加;H2O2刺激后核因子κBp65表达含量显著增加但明显低于H2O2+A20siRNA组(P<0.05)。结论:A2
- 李蕾高静陈海英俞帅曲鹏
- 关键词：锌指蛋白A20基因干扰血管平滑肌细胞增殖
- 单核细胞Toll样受体4信号通路在不稳定性心绞痛炎症反应中的作用
- 目的观察不稳定性心绞痛患者外周血单核细胞对Toll样受体4(TLR4)配体脂多糖(LPS)的反应性,探讨TLR4信号通路在不稳定型心绞痛炎症反应中的作用。方法以TLR4配体LPS刺激不稳定性心绞痛患者及对照者单核细胞,应...
- 陈海英曲鹏丁彦春宋慧君牛楠徐丹李蕾
- 文献传递
- A20基因对H<,2>O<,2>诱导的平滑肌细胞增殖及分子机制探讨和中药大黄素干预研究
- 目的：血管平滑肌细胞增殖是动脉粥样硬化（AS）及经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后再狭窄（RS）的重要原因，对增殖机制以及抑制其增殖的研究近年来一直是心血管领域的热点。过氧化氢（H2O2）是一种体内氧自由基，属于活性氧家...
- 李蕾
- 关键词：平滑肌细胞细胞增殖基因转染大黄素锌指蛋白
- 羟考酮硬膜外给药对直肠癌手术胰岛素抵抗的影响
- 目的:探讨羟考酮硬膜外给药对直肠癌手术围术期胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)的影响。方法:选择我院90例行择期直肠癌手术患者为研究对象,患者根据美国麻醉医师学会(American Society ...
- 李蕾
- 关键词：羟考酮直肠癌手术全麻复合硬膜外麻醉胰岛素抵抗
- 大鼠颈动脉球囊损伤局部A20基因转染后内皮细胞再生及血管超微结构的影响被引量：5
- 2008年
- 目的：锌脂蛋白A20是核因子κB信号系统活化的产物。研究证实核因子κB的激活是球囊损伤动脉后血管狭窄发生的重要机制之一。实验拟观察锌指蛋白A20对大鼠颈总动脉球囊损伤局部血管内皮再生和血管超微结构的影响。方法：实验于2006-03／2007-06在大连医科大学附属第二医院中心实验室完成。①实验材料：健康雄性SD大鼠42只，体质量350-400g。②分组及实验过程：采用随机数字表法将大鼠分为3组，每组14只。制备A20质粒DNA，建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型（假手术组只进行颈动脉结扎，不进行球囊损伤术）；对照组：球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent＋TE缓冲液；治疗组：球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent＋TE缓冲液＋pCAGGS-GFP／A20重组质粒。A20质粒DNA在球囊损伤大鼠颈动脉的局部转染。③实验评估：荧光显微镜观察A20在损伤动脉壁的转染效率；伊文思蓝染色法评估损伤后颈动脉内皮再生情况；透射电镜观察血管超微结构改变。实验过程对动物的处理符合动物论理学标准。结果：①球囊损伤术和A20转染治疗后2周，治疗组再内皮化百分比大于对照组（P〈0．05）。②假手术组大鼠颈动脉平滑肌细胞电镜下呈典型的“收缩表型”；对照组球囊损伤后3d可见合成型细胞及过渡型细胞，7d血管平滑肌细胞表型发生明显改变，呈典型的“合成表型”，治疗组术后7d可见接近收缩型的血管平滑肌细胞。结论：局部转染A20基因可促进损伤血管内皮再生，抑制损伤处血管平滑肌细胞表型转化。
- 高静李蕾徐丹陈良曲鹏
- 关键词：锌指蛋白A20内皮基因转染
- 单核细胞Toll样受体4信号通路在不稳定型心绞痛炎症反应中的作用探讨被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨单核细胞Toll样受体4(TLR4)信号通路在不稳定型心绞痛炎症反应中的作用。方法:以TLR4配体LPS刺激不稳定型心绞痛患者及对照者单核细胞,应用实时定量RT-PCR检测单核细胞TLR4 mRNA、A20 mRNA的变化,ELISA法检测培养上清TNF-α、IL-10浓度。结果:不稳定型心绞痛患者单核细胞TLR4 mRNA、A20 mRNA相对表达量高于对照组,受LPS刺激后A20 mRNA无明显上调。不稳定型心绞痛患者单核细胞LPS刺激后与对照组单核细胞LPS刺激后相比,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)产生更多,白介素-10(IL-10)产生较少。结论:单核细胞TLR4信号通路参与不稳定型心绞痛的炎症反应,TLR4表达上调、A20上调不足与炎症反应有关。
- 陈海英曲鹏丁彦春宋慧君牛楠徐丹李蕾
- 关键词：心绞痛炎症
- RNAi特异性抑制A20基因对H_2O_2诱导的HUASMC细胞表型的影响
- 2009年
- 目的:通过采用锌指蛋白A20基因干扰技术观察其对H2O2诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMC)超微结构影响,以初步研究锌指蛋白A20在氧化还原方面对细胞的保护作用。方法:将培养的人脐动脉血管平滑肌细胞随机分六组,空白组;A20siRNA组;scramble siRNA组;H2O2组;H2O2+A20siRNA组;H2O2+scramble siRNA,采用RT-PCR,Western-blotting方法观察A20基因表达变化,应用透射电镜观察细胞超微结构改变。结果:空白组A20mRNA与蛋白有微弱表达,A20siRNA组较空白组表达减少(P<0.05);H2O2组A20mRNA与蛋白表达明显高于空白组但显著低于H2O2+A20siRNA组(P<0.05)干扰效率大约55%。空白组平滑肌细胞(VSMC)电镜下呈典型的"收缩表型";H2O2组VSMC表型发生明显改变,呈"合成表型"H2O2+A20siRNA组成典型的合成表型且肌丝明显减少,细胞器及分泌物增多。结论:A20基因可以抑制H2O2损伤诱导的血管平滑肌细胞表型转化。
- 李蕾宁淑娥陈海英曲鹏
- 关键词：H2O2锌指蛋白A20基因干扰
- A20基因转染对大鼠颈动脉再狭窄和核因子κB表达的影响被引量：7
- 2008年
- 目的观察局部转染锌指蛋白A20基因对大鼠颈动脉再狭窄模型球囊损伤后内膜增生和血管平滑肌细胞增殖的影响并探讨其可能的机制。方法建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型。104只健康雄性SD大鼠随机分为4组(n=26):假手术组、模型组、对照组和治疗组。假手术组只进行颈动脉结扎,不进行球囊损伤术;模型组只进行球囊损伤术,不进行局部转染治疗;对照组球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent+TE buffer;治疗组球囊损伤术后局部灌注Lipofectamine 2000 Reagent+pCAGGS-GFP/A20重组质粒。荧光显微镜观察A20在损伤动脉壁的转染效率;病理组织学观察内膜增生情况;溴脱氧尿嘧啶核苷标记技术评估血管平滑肌细胞的增殖指数;分别用免疫组织化学染色、Western-blotting方法检测核因子κB p65在各组大鼠颈总动脉中的表达情况。结果大鼠颈总动脉球囊损伤术后14 d模型组和对照组血管内膜显著增生。A20基因转染可抑制新内膜面积的增加(减少47.8%,P<0.05)和内/中膜比值的增加(减少42.9%,P<0.05)。术后10 d治疗组血管平滑肌细胞体内增殖指数(9.6%±2.3%)显著少于对照组(26.7%±5.1%,P<0.05)。术后10 d治疗组血管壁细胞核因子κB p65阳性细胞率显著低于对照组(P<0.05)。术后7 d、14 d和28 d治疗组血管组织核因子κB p65的蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05)。结论局部转染A20基因可抑制损伤血管内膜增生及平滑肌细胞的增殖,其分子机制可能通过其负反馈抑制了核因子κB介导的胞内信号转导途径。
- 高静李蕾徐丹林媛媛曲鹏
- 关键词：病理学与病理生理学再狭窄锌指蛋白A20基因转染
- 锌指蛋白A20对大鼠颈动脉球囊损伤后内皮再生和血管超微结构的影响
- 目的观察锌指蛋白A20对实验性大鼠颈总动脉球囊损伤后内皮再生和血管超微结构的影响并探讨其可能的机制。方法建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型。18只健康雄性Sprague-Dawley(sD)大鼠随机分为3组:假手术组,PBS对...
- 高静李蕾徐丹陈良曲鹏
- 文献传递
