李迅
- 作品数：137 被引量：218H指数：7
- 供职机构：南京林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中的分泌型表达及酶学性质初探被引量：4
- 2014年
- 将南极假丝酵母脂肪酶B（CALB）基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA（含pAOX1启动子）和pGAPZαA（含pGAP启动子）中,转入毕赤酵母表达宿主KM71H,经三丁酸甘油酯平板活性筛选获得高效表达的酵母工程菌株.分泌型表达CLAB酵母工程菌的酶活较高,经摇瓶发酵96 h后,CLAB活力达到11.1 U/mL.经发酵罐高密度发酵84h后,CLAB活力达到179.2 U/mL,蛋白质量浓度为1.36 mg/mL.体积分数12％SDS-PAGE凝胶电泳显示重组CALB相对分子量为36 kDa.该酶最适温度为40℃,最适pH值为8.0.在pH7.5 -9.5较稳定,经55℃保温1h,残余酶活还有48.5％.5 mmol/L Mg^2＋、Ni^＋、Co^2＋和体积分数0.10％ SDS对CALB酶活影响很小,而Zn2强烈抑制酶催化反应,体积分数0.05％ Triton X-100对CALB稍有激活作用。
- 李迅邓若冰王飞
- 关键词：毕赤酵母分泌表达酶学性质
- 巨大芽孢杆菌细胞色素P450酶的表达纯化及定向进化研究
- 2014年
- 为了获得高效的重组来自巨大芽孢杆菌ALA2的细胞色素P450酶(CYPs),将CYPs基因(cyp)克隆到大肠杆菌表达载体p ET20b(含T7启动子)和p Trc99A(含trc启动子)中,转入大肠杆菌表达,发现trc启动子更适合CYPs的表达。优化了Ni-NTA纯化CYPs的条件,在p H值8.1时,用60 mmol/L的咪唑缓冲液洗脱得到电泳纯的重组CYPs,酶活达到2 095 U/mg,纯化回收率为31%,回收倍数为2.32。通过理性设计确定突变位点为269位苏氨酸(T)和394位苯丙氨酸(F),通过筛选获得了突变酶T269S和T269R,2种突变酶以软脂酸为底物,酶活提高32.0%和29.0%,以油酸为底物酶活提高11.6%和9.1%。
- 李迅王婷王亮亮王飞
- 关键词：巨大芽孢杆菌细胞色素P450酶定向进化软脂酸
- 草菇木聚糖酶SDS-PAGE后的复性及活性染色被引量：3
- 2003年
- 草菇木聚糖酶经SDS PAGE后在胶中能够原位复性,通过银染和刚果红活性染色比较,可确定该酶在胶中的位置.草菇木聚糖酶是单亚基蛋白,相对分子质量为24500.
- 胡沂淮李迅邵蔚蓝
- 关键词：草菇木聚糖酶SDS-PAGE复性活性染色银染
- 一种多突变位点的檀香烯合酶突变体及其制备方法
- 本发明涉及檀香烯合酶突变酶及其在合成檀香烯中的应用。具体涉及的突变酶SanSyn(S533A)、SanSyn(S533Q)、SanSyn(Q527A&S533A)，它们分别是将第533位的丝氨酸突变为丙氨酸、谷氨...
- 李迅张佳王询王飞
- 一种基于纤维小体的毕赤酵母表面共展示系统及其构建方法和应用
- 本发明提供了一种基于纤维小体的毕赤酵母表面共展示系统及其构建方法和应用，属于分子生物学、食品以及基因工程技术领域。本发明所述系统包括锚定蛋白和多蛋白展示底架蛋白，所述锚定蛋白为酿酒酵母细胞壁蛋白Sed1p；所述多蛋白展示...
- 李迅王亮亮王月皎李文谦王飞张瑜
- 文献传递
- 南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中的诱导表达
- 南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)是一种重要的脂肪酶,具有许多优良的特性,它对非水溶性和水溶性物质都有很强的催化活性,在水解和有机合成反应中具有高度的立体选择性。毕赤酵母表达系统因能高效表达外源蛋白以及蛋白易于纯化等优点而...
- 邓若冰李迅王飞
- 关键词：基因克隆毕赤酵母
- 一种生物质油制备羧酸甲酯催化芳构化制备芳烃的方法
- 本发明涉及一种生物质油制备羧酸甲酯催化芳构化制备芳烃的方法，属于生物质能源转化技术领域。目的是为了提供一种工艺简单、反应条件较温和，产品轻质芳烃含量高的芳烃制备方法。将惰性载气通入到固定床反应管，同时将生物质油以恒定流速...
- 王飞张军李迅夏海岸丘群峰
- 文献传递
- 一种修饰ERK多肽抑制剂的铁蛋白纳米粒子及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种修饰ERK多肽抑制剂的铁蛋白纳米粒子及其制备方法和应用，属于抗肿瘤药物制备技术领域。本发明提供的ERK多肽抑制剂修饰的铁蛋白纳米粒子，是将氨基酸序列为MPKKKPTPIQLNP的ERK多肽抑制剂，通过连接...
- 王飞董亦馨张瑜马原蒙李迅
- 文献传递
- 一种可再生富烃液体燃料的制备方法
- 本发明涉及一种可再生富烃液体燃料的制备方法，属于生物质能源转化技术领域。目的是为了提供一种工艺简单、反应条件较温和、产品轻质烃类含量高的富烃燃油制备方法。在惰性载气存在下，将预热后废弃油脂原料加入装有1～15g复合型多功...
- 王飞张军李迅潘青青张锡予
- 一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法
- 本发明公开了一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法，包括如下步骤：1)利用化学偶联法制备修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白；2)在特定离子强度条件下，利用温度法在步骤1)所得的铁蛋白内负载药物，制得铁蛋白载药纳米...
- 张瑜董亦馨王飞李迅杨昆
